补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用研究摘要】目的：探讨补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：采用线栓法制造大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，给药组给予补阳还五汤原方剂量的水煎液，每日一次，连续灌胃7d；模型组与假手术组均给予同体积生理盐水。测定SOD、GST和GSH-PX活性以及血清中MDA含量。结果：补阳还五汤可以显著提高脑缺血再灌注大鼠SOD、GST、GSH-PX的活性，明显抑制MDA的生成。结论：补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用，抗氧化作用是其发挥脑缺血保护作用的机制之一。关键词补阳还五汤；MCAO大鼠模型；SOD；GST；GSH-PX；MDA【】R2855【文献标志码】A【】1007-8517(2021)01-0042-02补阳还五汤是中医益气活血法的经典方，由黄芪、当归尾、赤芍、地龙、川芎、桃仁、红花七味药组成。临床广泛用于缺血性脑血管疾病，对灌注的大鼠皮层及小脑中活性氧。13药物与试剂黄芪〔批号：1203131，源和堂中药饮片有限责任公司〕；当归尾〔批号：1203046，源和堂中药饮片有限责任公司〕；赤芍〔批号：1203072，源和堂中药饮片有限责任公〕；地龙〔批号：1112207，源和堂中药饮片有限责任公司〕；川芎〔批号：1203055，源和堂中药饮片有限责任公司〕；桃仁〔批号：120211，源和堂中药饮片有限责任公司〕；红花〔批号：1203083，源和堂中药饮片有限责任公司〕；氯化钠〔批号：F20210307，国药集团化学试剂〕；SOD、GSH-Px和MDA试剂盒〔南京建成生物工程研究所〕；GST试剂盒〔上海生工生物技术〕。14方法141动物模型制备采取线栓法制作大脑中动脉闭塞/再灌注模型［4］。动物术前禁食12h，自由饮水。用10%水合氯醛3ml/kg行腹腔注射麻醉。钝性别离右侧右侧颈总动脉〔CCA〕、颈外动脉〔ECA〕、和颈内动脉〔ICA〕，并小心别离迷走神经，分别电凝ECA分支枕动脉和甲状腺上动脉。在距CCA分叉大约1cm处结扎ECA近心端，电凝远心端。用无创小动脉夹夹闭CCA，在ECA残端距CCA分叉3mm处剪一小口，将制备好的线栓经ECA插入ICA，线栓头端距CCA分叉处约18mm，此时进线有轻微阻力，栓线正好插至颅内的大脑前动脉，堵住大脑中动脉〔MCA〕开口，制成MCAO模型。造模后2h，以半剂量10%水合氯醛再次麻醉动物，拔出线栓，结扎ECA残端。术后20~25℃条件下饲养大鼠，自由进食水。假手术组除不在颈内动脉插入线栓外，其余步骤与上述相同。142分组与给药将21只大鼠随机分成3组，每组7只，分别为模型组、给药组、假手术组。给药组给予补阳还五汤煎剂原方剂量，黄芪120g，当归尾6g，赤芍5g，地龙3g，川芎3g，桃仁3g，红花3g。用水煎煮两次合并混匀。模型组与假手术组均给予生理盐水。每日一次，连续给药7d。143SOD、GST、GSH-Px的活力测定大鼠于缺血再灌注24h后断头取脑，冰上别离缺血侧大脑皮质适量，在冰浴中匀浆，用09%生理盐水制成10%的组织匀浆液。4000r/min离心10min，取上清。采用WST-1方法测定脑组织中SOD活力，CDNB法测定GST活力，采用酶联免疫吸附法测定GSH-Px活力。144MDA的含量测定按“143〞中的方法获得脑组织匀浆液，采用硫代巴比妥法测定脑组织中MDA含量。15统计学处理数据采用spss170软件进行统计分析，所有结果以均数标准差〔x±s〕来表示，组间差异用t检验分析结果，以P2实验结果模型组与假手术组比较，SOD的活力显著降低〔P超微补阳还五汤能明显降低组织内的血浆丙二醛〔MDA〕和增加超氧化物歧化酶〔SOD〕活性，并增强大鼠脑组织神经生长因子〔NGF〕的表达［5］；加味补---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---阳还五汤对8Hz130dB次声暴露下小鼠大脑过氧化水平及超微结构具有改善作用［6］。基因芯片分析补阳还五汤对局灶性脑缺血再灌注大鼠保护作用机制的研究显示，该方可上调多种抗氧化酶的基因，包括谷胱甘肽-S-转移酶〔GST〕，谷胱甘肽过氧化物酶-1〔Gpx-1〕、硫氧还蛋白〔Tdpx1〕等［7］。大量研究显示，补阳还五汤对抗脑缺血所致的氧化应激损伤而具有神经保护作用。自由基介导的氧化应激损伤广泛参与脑缺血性中风的神经病理机制。缺血性中风发生时，神经元由于失去氧和葡萄糖的供应，不能维持其静...