---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---园艺学报2014，41（6）：1080–1088://wwahs.ac.cnActaHorticulturaeSinicaE-mail:yuanyixuebao@126收稿日期：2014–01–17；修回日期：2014–05–28基金项目：国家自然科学基金项目（）；陕西省重点科技创新团队葡萄种质资源与育种应用项目（2013KCT-25）*通信作者Authorforcorrespondence（E-mail：wangxiping@nwsuaf.edu）葡萄白粉病菌应答基因VpSTART的克隆及表达分析闫筱筱1，侯鸿敏2，焦晨1，王西平1,3,*（1西北农林科技大学园艺学院，旱区作物逆境生物学国家重点实验室，陕西杨凌；2青岛农业大学园艺学院，山东青岛；3农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点开放实验室，陕西杨凌）摘要：在前期获得葡萄白粉病菌应答基因VpSTART的EST基础上，采用RACE和RT-PCR技术克隆该基因cDNA全长序列。VpSTART全长1321bp，3′端非编码区114bp，包含一个1206bp开放阅读框，编码401个氨基酸。VpSTART蛋白分子量为45.3kD，与欧亚种葡萄、玉米、拟南芥、蒺藜状苜蓿和蓖麻的蛋白同源性分别为99%、64%、58%、46%和25%。实时荧光定量PCR表明，VpSTART在‘商–24’葡萄花序、卷须和茎中表达量较高；感白粉病的‘湖南–1’葡萄叶片接种白粉病菌后VpSTART表达量与对照没有显著差异，而抗白粉病的‘商–24’葡萄接种12h后VpSTART表达量增加，在24~96h表现显著性差异；用SA、MeJA和Eth等不同信号分子分别处理‘湖南–1’和‘商–24’葡萄叶片1~48h后，VpSTART基因的表达受SA负调控，受MeJA和Eth正调控。关键词：葡萄；白粉病菌；VpSTART；基因克隆；表达分析：S663.1文献标志码：A：0513-353X（2014）06-1080-09CloningandExpressionAnalysisofPowderyMildewFungusResponsiveGeneVpSTARTinGrapeYANXiao-xiao1，HOUHong-min2，激AOChen1，andWANGXi-ping1,3,*（1CollegeofHorticulture，StateKeyLaboratoryofCropStressBiologyinAridAreas，NorthwestAFUniversity，Yangling，Shaanxi，China；2CollegeofHorticulture，QingdaoAgriculturalUniversity，Qingdao，Shandong，China；3KeyLaboratoryofHorticulturalCropBiologyandGermplasmDevelopmentinNorthwestChina，MinistryofAgriculture，Yangling，Shaanxi，China）Abstract：BasedonpreviousESTsequenceofgrapepowderymildewfungusresponsivegeneVpSTART，afull-lengthcDNAsequencewasclonedthroughRACEandRT-PCRtechnologiesinthisstudy.Thefull-lengthcDNAofVpSTARTwas1321bpwith114bp3′UTR，containeda1206bpopenreadingframeencoding401aminoacidsresidues.VpSTARTproteinshowedacalculatedmolecularweightof45.3kD，andshared99%，64%，58%，46%and25%homologywiththatofVitisvinifera，Zeamays，Arabidopsisthaliana，MedicagotruncatulaandRicinuscommunis.Real-timequantitativePCRindicatedtheexpressionlevelofVpSTARTwashighininflorescence，tendrilandstemofShang-24grapeabundantly；AccumulationofVpSTARTtranscriptsinHunan-1grapeleafthatissusceptibletopowdery---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---6期闫筱筱等：葡萄白粉病菌应答基因VpSTART的克隆及表达分析1081mildewshowednosignificantdifferencewiththatincontrastafterE.necatorinoculation，whiletheaccumulationincreasedinShang-24grapefor12hthatisresistantpowderymildewandshowedasignificantdifferenceduring24–96hinoculation；After1–48htreatmentwithSA，MeJAandEthsignalmoleculesinHunan-1andShang-24grapeleaf，theexpressionpatternsofVpSTARTshowednegativeregulationbySA，positiveregulationbyMeJAandEth.Keywords：grape；powderymildew；VpSTART；geneclone；expressionanalysis自1985年首次指出类固醇激素合成急性调节基因（StAR）响应在合成类固醇激素的组织后，动物体内该蛋白的合成途径与调控关系得到了深入研究（LizaNanette，1985，1986；LindaNanette，1991）。StAR基因在小鼠MA-10细胞中被克隆研究后命名为steroidogen...