全国结核病耐药性基线调查报告篇一：124例耐多药结核分枝杆菌基因突变特征分析124例耐多药结核分枝杆菌基因突变特征分析梁亚萍11赵丽丽2高漫1摘要：目的对临床分离的耐多药结核分枝杆菌相关基因的突变特征进行分析。方法对124例耐多药结核分枝杆菌和50株敏感株的耐药相关基因（异烟肼inhA、katG和oxyR-ahpC间隔区;利福平rpoB）进行序列测定，分析其基因突变情况。结果异烟肼耐药inhA基因突变率为%；katG基因突变率为%（87/124），主要位于315位；oxyR-ahpC间隔区突变率为%；inhA、katG两种基因同时突变率%，三种基因同时考虑突变率%。利福平rpoB基因突变的检出率高达%，突变主要发生在531、526、516位点。结论我省耐多药菌异烟肼耐药相关基因最常见突变为katG315、inhAC-T（-15）、axyR-ahpC间隔区C-T，利福平为rpoB531、526、516。结合MDR-TB耐药相关基因的特征分析，可以建立一种快速、准确、特异的适合于我省的检测结核耐多药性的新方法。关键词：结核分枝杆菌耐多药基因测序突变Analysisofcharacteristicsofgeneticmutationof124casesofmultidrug-resistantmycobacteriumtuberculosisLiangYaping11ZhaoLili2GaoMan1[Abstract]Objective:Toanalyzethemutatio---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---ncharacteristicsofmultidrug-resistantmycobacteriumtuberculosisrelated:Resistantgenesof124casesofmultidrug-resistantmycobacteriumtuberculosisand50sensitivestrainsweregivensequencedeterminationtoanalyzethegene:GenemutationrateofinhAwas%;genemutationrateofKatGwas%,mainlyinthe315;genemutationrateofoxyR-ahpCspacerwas%;mutationrateofinhA,katGatthesametimewas%,mutationrateofthethreegenesatthesametimewas%.GenemutationrateofrpoBofrifampicinwas%,andmutationoccurredmainlyinthe531,526,516:Themostxxmonmutationofmultidrug-resistantisoniazidgenesinourprovincewerekatG315,inhAC-T,oxyR-ahpCspacerC-T,andtherifampicinwererpoB531,526,analysisofxxbiningthefeatureofMDR-TBresistancerelatedgenecanestablisharapid,accurate,specificandsuitablenewmethodtodetectmultidrug-resistanttuberculosis.Keywords:Mycobacteriumtuberculosis;Multidrug----本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---resistant;Genesequencing;Mutation【】：R52【文献标识码】：【】：我国的耐药结核病流行情况较为严重，是全球27个耐药结核高负担国家之一，据全国结核病耐药基线调查结果显示[1]：我国肺结核病患者中耐多药结核（MDR-TB，指结核分枝杆菌同时对异1基金项目：陕西省卫生科研项目（)作者简介：梁亚萍，女，本科，副主任检验师，主要从事结核病实验室诊断相关工作烟肼、利福平耐药）耐药率为%。我省是结核病的重灾区，耐多药率高达%[2]，MDR-TB的增多严重影响了结核病的化疗效果，使患者治疗费用高治愈率低，死亡率高，已成为我省结核病控制的难题。结核分枝杆菌耐药通常与某些基因突变有关但不同地区的耐药相关基因突变特征有所不同。本研究对我院来自我省各地的结核患者124株耐多药结核分支杆菌进行了耐多药相关基因测序，异烟肼耐药相关基因inhA、katG和axyR-ahpC,利福平耐药基因ropB，分析我省耐多药基因的突变特征，从而建立一种快速、准确、特异的适合于我省的检测结核耐多药的新方法。1材料和方法标本：本研究菌株是收集本院20XX年8月-20XX年2月来自于我省陕北、陕南以及关中结核患者的174株结核分枝杆菌临床分离株，其中124株耐多药菌株和50株敏感菌株。药敏试验:采用美国BD公司的BACTECMGIT960行利福平、异烟肼快速药敏实验，药物浓度及操作过程严格按照---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---MGITTMProcedureManual要求进行[3]。DNA模板的制备：采用CTAB法[4]提取结核分枝杆菌DNA。PCR扩增及序列测定：聚合酶链反应（PCR）引物序列见表1，采用50ul反应体系。反应参数：95℃预变性5min；95℃变性40s，64℃退火40s，72℃延伸1min,35个...