药物分析学专业毕业论文[精品论文]芦笋质量控制的现代分析方法研究关键词：芦笋质量控制氨基酸黄酮苷全二维液相色谱体外抗氧化活性摘要：芦笋是百合科天门冬属植物，是世界十大名菜之一，味道鲜美、营养丰富，并具有很好的保健功效。研究表明，芦笋具有多种药理活性，如抗肿瘤、降血脂、增强免疫力、抗衰老、抗疲劳和保护肝脏等。目前，对芦笋化学成分的研究较少，仅停留在总黄酮和总皂苷的初步分离纯化上，因此，尚无法对芦笋进行全面有效的质量控制。本论文首先对芦笋的营养成分进行了较为全面的质量控制，然后对芦笋中的化学成分进行分离鉴定，并对芦笋黄酮部位进行富集纯化并作定量分析，再通过二维柱切换液相色谱法分离制备了芦笋中五种黄酮苷，并采用全二维液相色谱法对芦笋黄酮部位进行了分析，考察了各成分与脂质体膜之间的相互作用，最后对所得五种黄酮苷和芦笋黄酮部位进行了体外抗氧化活性研究，初步揭示并验证了芦笋发挥药理活性的物质基础和黄酮抗氧化活性的构效关系。一、芦笋中营养成分的质量控制1、氨基酸在pH5.5时与茚三酮反应形成蓝紫色化合物，颜色的深浅与溶液中氨基酸的含量成正比，且在570nm处有最大吸收，利用此原理，测定该波长处的吸光度即可计算氨基酸浓度。本实验以L-谷氨酸为标准品对方法学进行了全面考察，线性回归方程为A=0.0073C-0.1133(r=0.9998)，线性范围30.30-151.50μg/mL，样品经显色反应后在1.5h小时内稳定，精密度、重现性和回收率结果均符合要求。十批不同来源的鲜芦笋样品中总游离氨基酸含量为17.43-22.43‰。2、考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色，在稀酸中与蛋白质结合变成蓝色，最大吸收波长也从465nm变成595nm，蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合物在595nm波长下的吸光度与蛋白质含量成正比，因此，可以根据此原理测定蛋白质含量。本实验以牛血清白蛋白为标准品对方法学进行了全面的考察，线性回归方程为A=0.0077C+0.0524(r=0.9996)，线性范围19.80-99.00μg/mL，样品经显色反应后在1.5h小时内稳定，精密度、重现性和回收率结果均符合要求。十批不同来源的鲜芦笋样品中总蛋白质含量为1.08-1.69‰。3、芦笋中总多糖的含量测定采用的是硫酸葸酮显色法，以葡萄糖为标准品，线性方程为A=0.0081C+0.0907(r=0.9990)，线性范围20.00-100.00μg/mL，样品经显色反应后在1.5h小时内稳定，精密度、重现性和回收率结果均符合要求。十批不同来源的干燥芦笋样品中总多糖含量为1.16-1.64％。4、选择AOC为衍生化试剂，以普通C18柱作为分离载体，建立了芦笋水解氨基酸的指纹图谱，确定了16个共有峰，鉴定了其中的11个氨基酸，并在指纹图谱条件的基础上测定了10批芦笋中11种氨基酸的含量，结果如下：组氨酸2.97-5.56％0，甘氨酸0.39-0.53％0，天冬氨酸1.64-3.63％0，谷氨酸0.89-1.55‰，苏氨酸0.32-0.46％0，丙氨酸0.32-0.57％0，胱氨酸0.47-1.01‰，酪氨酸0.23-0.28‰，缬氨酸0.36-0.65‰，亮氨酸0.37-0.60‰，苯丙氨酸0.35-0.44％0。二、芦笋的化学成分研究1、芦笋中两种嘌呤类化合物的分离制备干燥芦笋药材的60％乙醇回流提取液浓缩后过大孔吸附树脂柱，收集20％乙醇洗脱流分，再经葡聚糖凝胶柱脱色，纯化后的样品采用制备液相色谱法分离，得到两种嘌呤类化合物，经1HNMR和13CNMR鉴定为9-(2-甲硫基-3-磺酸基-4-羟基)-呋喃-6-氨基-嘌呤和腺苷。2、芦笋中五个黄酮类化合物的分离制备干燥芦笋药材的60％乙醇回流提取液浓缩后过大孔吸附树脂柱，收集40％乙醇洗脱流分，---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---再经葡聚糖凝胶柱脱色，纯化后的样品采用制备液相色谱法分离，得到五种黄酮苷，经HPLC-DAD-MS鉴定为槲皮素-3-O-葡萄糖-芸香糖苷、芦丁、异鼠李素-3-O-葡萄糖.芸香糖苷、烟花苷和水仙苷。3、芦笋中一种有机酸的分离制备干燥芦笋药材的60％乙醇回流提取液浓缩后过大孔吸附树脂柱，收集60％乙醇洗脱流分，再经葡聚糖凝胶柱纯化，即得纯品，经1HNMR和13CNMR鉴定为肉桂酸。三、芦笋黄酮部位的制备与定量分析1、干燥芦笋药材的60％乙醇回流提取液浓缩后过大孔吸附树脂柱(60×4cm)，先静止吸附1h，再分别用水1...