碘量法测定发酵液中2•酮基•葡萄糖酸的方法学研究冯晓燕I周延政2,孙文敬13,王大明I,余泗莲彳，刘敬泽“(1.河北师范大学生命科学学院，河北石家庄050016；2.江苏大学食品与生物工程学院，江苏镇江212013；3.百勤异VC钠有限公司，江西德兴334221)摘要：在优化样品处理条件的基础上，考察葡萄糖对2-酮基葡萄糖酸测定的影响，改进发酵液中2-附基葡萄糖酸的碘量法测定技术。结果表明，滴定样品溶液所消耗的b标准溶液的体积、样品溶液中2■酮萄糖酸质戢浓度和fj萄糖质戢浓度之间存在良好的线性关系，心>0.9999：该方法精密度、稳定性和重现性良好，2-酮基葡萄糖酸的平均回收率为95.68%,RSD为1.35%(n=5)。该方法准确、快速，操作简便，可用于发酵液中2•酮J4D葡萄糖酸的定量检测。关键词：2-酮基4葡萄糖酸；葡萄糖；发酵液；碘最法；测定DeterminationofConcentrationsof2・Keto・D・gluconicAcidinFermentationBrothUsingIodometryFENGXiaoyan1,ZHOUYanzheng2,SUNWen激ng1'2,WANGDarning1,YUSilian3,LIU激ngze(1.CollegeofLifeScience,HebeiNormalUniversity,Shi激azhuang050016,China;2.SchoolofFoodandBiologicalEngineering,激angsuUniversity,Zhen激ang212013,China;3.ParchnSodiumIsovitaminCCo.,Ltd.,Dexing334221,China)Abstract:Onthebaseofoptimizingconditionsofsampletreatment,theeffectofglucoseondeterminationof2-kcto-D-gluconicacidwasinvestigated,andthetechniqueofiodometryexploitedtodeterminetheconcentrationsof2-keto-D-gluconicacidinfermentationbrothwasimproved.TheresultsrevealedagoodlinearrelationshipamongthevolumesofI2standardsolutionconsumedtotitratesampleandconcentrationsof2-keto-/)-gluconicacidandglucose(R2>0.9999).Theaveragerecoveiywas95.68%withtheRSD5of1.35%(n=5).Themethoddevelopedherehadgoodaccuracy,stabilityandreproducibility,andwaseasilyoperated,herebycouldbeusedforthedeterminationofconccntrationsof2・kcto・D-gluconicacidinfermentationbroth.Keywords:2-keto-D-gluconicacid;glucose;fermentationbroth;iodometry;determination：TQ921.2文献标识码：A：收稿日期：基金项H：江苏大学科研启动基金项冃(08JDG029)；江西省主要学科学术和技术带头人培养计划项H(2008DD00600)；江西省科技支撐计划项H(赣财教12008]147号)冯晓燕(1985—),女，硕士研究生，研究方向为微生物生态学。E-mail：xkioyan0316@126孙文敬(1964—),男，研究员，博士，研究方向为生物化工。E-mail：sunwen激ng1919(5)163刘敬泽(196—),男，教授，博士,研究方向为生态学。E-mail：liuiingze(a)mail.hebtu.edu2.酮基・D・葡萄糖酸（2-keto-D-gluconicacid,2KGA）是冃前国际上规模化发酵生产的有机酸之一,主要作为食品抗氧化剂D■异抗坏血酸及其盐类合成的前体［切。2KGA的质量浓度是2KGA发酵过程控制的一个极其重要的技术参数。关于发酵液中2KGA的测定方法己有一些报道，如旋光法叫酸碱滴定法叫HPLC法山、酶法⑴和碘量法7】等。旋光法、HPLC法和酶法等仪器分析方法可以准确检测发酵液中的2KGA,但因样品处理过程复杂、所需仪器昂贵或试剂成木较高等原因而难以在国内工业生产中得到推广应用；酸碱滴定法的操作过程比较简单，但因测定中的变色现象难以观察而导致检测结果误差较大。因此，碘量法成为目前国内工业牛产上检测发酵液中2KGA的主要方法。碘量法测定2KGA的基本原理是：2KGA分子内含有可直接发牛•酯化反应的竣基和醇拜基，还含有可发生互变异构反应的媒基，在强酸性条件下加热2KGA水溶液可以将其定量转化为D-异抗坏血酸內。利用0界抗坏血酸与【2的氧化还原反应可以定量测定D・异抗坏血酸的质量浓度以⑼，然后换算成2KGA的质:fi浓度。该方法也称转化碘量法⑴】。长期以来，国内相关学者对发酵液中2KGA碘量法测定的准确性还有一些质疑。有学者认为，发酵液中的葡萄糖对该法的测定结果影响很大⑷。因此，本研究对发酵液中2KGA的碘量法测定进行了方法学考察。1材料和方法1.1材料和试剂2KGA发酵液：采用文献［2］的菌种和方法自制；2KGA钙盐（...