电针对MCAO大鼠皮层神经营养因子表达的影响

电针对MCAO大鼠皮层神经营养因子表达的影响摘要:目的应用免疫组织化学法观察电针对缺血皮层神经元脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)表达的影响。方法实验分缺血组和缺血+电针组,大脑中动脉线栓(MCAO)造成局灶性缺血75min,缺血+电针组在缺血后立即给予电针1h。在缺血再灌不同时间分别处死,然后进行免疫组织化学染色。结果BDNF和NGF主要在缺血灶周围的皮层表达。在再灌后8h内缺血+电针组BDNF和NGF免疫阳性细胞的表达高于缺血组(P<0.01)。结论电针能够提高NGF和BDNF在缺血灶周围皮层的表达,这种高表达可能对脑缺血具有保护作用。关键词:电针;脑源性神经营养因子;神经生长因子;脑缺血;免疫组织化学中分类号:R743文献标识码:A:1003-2754(2000)03-0139-03TheeffectofelectroacupunctureonneurotrophinsexpressionofischemiccortexinMCAORatCHENYing-hui,HUANGXian-fen.(DepartmentofNeurobiology,ShanghaiMedicalUniversity,Shanghai200032,China)Abstract:ObjectiveToobservetheeffectofelectroacupunture(EA)onbrainderivedneurotrophicfactor(BDNF)andnervegrowthfactor(NGF)expressionofischemiccortexinratbyimmunohistochemicalmethod.MethodsTheexperimentwasdividedintotwogroups,ischemiaandEAgroup.Themiddlecerebralartery(MCA)inWistarratswasoccludedfor75mintoresultinthefocalischemia.One-hour-EAwasappliedimmediatelyaftercerebralischemia.Theseanimalsweredecapitatedatdifferentreperfusionpoint,andtheimmunohistochemicalmethodwasusedevaluatethechangeofBDNFandNGFexpressionbetweenischemiagroupandEAgroup.ResultsItwasfoundthatBDNFandNGFimmunoreactivecellsexpressedmainlyintheperipheralcortexoftheinfarction,andbothofthemweresameinthetime-courseoftheexpression.TheexpressionofBDNFandNGFincreasedgraduallyafterEA.At8hourofreperfusion,itreachedthepeak,thenitdecreasedgradually.At12hour,itreturnedthelevelofischemiagroup.InEAgrouptheexpressionofBDNFandNGFin8hoursofreprefusionwassignificantlyhigherthanthatinischemiagroup(P<0.01).ConclusionEAmayincreaseexpressionofBDNFandNGFintheperipheralcortexoftheinfarction,anditwouldbeprotectiveeffectagainstcerebralischemia.Keywords:Electroacupuncture;Brainderivedneurotrophicfactor;Nervegrowthfactor;Cerebralischemia;Immunohistochemistry---本文于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---实验证明神经生长因子和脑源性神经营养因子对脑缺血具有保护作用,并能促进缺血后损伤神经元的修复。但NGF和BDNF作为大分子蛋白质很难通过血-脑脊液屏障。脑室内或皮层给药虽然可以达到治疗目的,但也不可避免对大脑造成损伤,而且操作复杂不易为临床接受。因此寻求一条能提高NGF和BDNF内源性表达的途径尤为重要。针灸对脑缺血的疗效已被国际公认,而且大量实验证明针灸能影响脑内一些递质或神经肽的表达。因此我们应用免疫组织化学的方法观察电针对缺血大鼠不同再灌时间,缺血灶周围皮层NGF和BDNF表达的影响。1材料与方法1.1实验动物及分组Wistar雄性大鼠(230g~260g),由上海医科大学动物房提供。随机分成两组:缺血组和缺血+电针组。每组又根据不同的缺血后再灌时间分成6个时间点,每时间点6只大鼠。1.2动物模型及电针参数采用大脑中动脉线栓法造成大脑局部缺血75min[1],电针则在缺血后立即给予,取穴为“人中”和“百会”,时间为1h,强度3.5mA,频率100Hz。两组大鼠分别在缺血再灌后1、2、4、8、12和24h处死。1.3样品采集及处理10%水合氯醛腹腔麻醉,心脏快速灌流生理盐水100ml,然后用4%多聚甲醛(4℃)灌流固定30min。断头取脑放入20%蔗糖多聚甲醛溶液进行后固定,然后置于30%蔗糖脱水。待脑组织下沉后取出做冰冻切片,片厚30μm,取缺血中心的脑片(前囟嘴侧0.2~0.8mm)进行免疫组织化学染色。1.4免疫组织化学染色(ABC法)切片入0.01mol/L磷酸盐缓冲液(PBS,pH7.2~7.4)漂洗3次,每次5min。然后入含有10%正常羊血清和0....

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