猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段原核表达条件的优化

猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段原核表达条件的优化摘要:为了提高猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段在大肠杆菌中的表达量,研究了载体、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对衣壳蛋白基因CP239片段融合蛋白表达量的影响。结果表明,用LB培养基于37℃培养3.5h后,采用终浓度为0.3mmol/L的IPTG在37℃、200r/min诱导培养4h,pET32a-CP239融合蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测结果表明pET32a-CP239融合蛋白的分子质量与预期大小一致,约为45.3ku;Westernblotting结果表明,pET32a-CP239融合蛋白可以与抗-HEV阳性血清发生特异性反应,并具有良好的反应原性,说明衣壳蛋白基因CP239片段蛋白得到正确表达。关键词:猪戊型肝炎病毒;衣壳蛋白;CP239片段;原核表达:Q786文献标识码:A:0439-8114(2011)15-3116-04---本文于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---OptimizationofProkaryoticExpressionforCapsidProteinGeneCP239intheswCH189StrainofSwineHepatitisEVirusHAOBao-cheng1,2,LIANGJian-ping1,3,LANXi2,XINGXiao-yong3,XIANGHai-tao3,WENFeng-qin3,HUYong-hao3,LIUJi-xing2,3(1.LanzhouInstituteofAnimalandVeterinaryPharmaceuticsSciences,ChineseAcademyofAgriculturalSciences/Keylaboratoryofnewanimaldrugproject/KeylaboratoryofnewanimaldrugprojectofGansuProvince,Lanzhou730050,China;2.ChineseAcade---本文于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---myofAgriculturalSciences,LanzhouVeterinaryResearchInstitute/livestockdiseaseStateKeyLaboratoryofPathogenBiology/MinistryofAgricultureKeyLaboratoryofAnimalVirology/DepartmentofAgriculturefocusedonplant-eatinganimaldiseaselaboratoryinLanzhou,Lanzhou730046,China;3.GansuAgriculturalUniversity,AnimalMedicalCollege,Lanzhou730070,China)Abstract:ToimprovetheexpressionquantityofcapsidproteinsgenesCP239fragmentofswinehepatitisEvirusswCH189strainsinEscherichiacoli.,theinfluenceofvector,temperature,rotatingspe---本文于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---ed,inductingtimeandIPTGconcentrationontheexpressionquantitywasanalysed.TheresultsshowedthatthefusionproteinexpressionamountofpET32a-CP239wasthelargestaftercultivated3.5hwithLBat37℃and4hinductingculturedwith0.3mmol/LIPTGa...

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