附子总生物碱含量测定方法比较附子总生物碱含量测定方法比较何军1,2,祝林1,奉建芳1(1.上海医药工业研究院药物制剂部,上海200437;2.四川大学华西药学院,四川成都610141)摘要:目的比较滴定法和紫外分光光度(UV)法在测定附子总生物碱中差异,探讨适宜附子总生物碱的含量测定方法。方法用两种方法测定相同样品,比较测定结果差异,并考察操作步骤对测定结果的影响。结果两种不同的测定方法对附子总生物碱含量测定结果有较大的影响,滴定法的加样回收率为97.7%,而UV法为75.6%,滴定法测定结果更准确。水分及萃取静置时间对UV法测定结果有一定影响。结论附子总生物碱含量测定以滴定法(药典法)为宜,紫外分光光度法用于其测定有待于进一步改进。关键词:附子;附子总生物碱;含量测定中图分类号:R284.2文献标识码:A文章编号:1014221101(2003)0620020223中药川乌、草乌、附子等其主要有效成分为总生物碱,虽然含量较低[1],但因药理作用强、有一定的毒性,常作为中药的制剂质量控制的指标。2000版中国药典中有关总生物碱的含量测定方法为滴定法[2],文献中多采用紫外分光光度法[3,4],但哪一种方法更灵敏、准确和具有更好的重现性,文献中并未见报道。本文以附子提取物作为样品,对这两种方法用于测定附子总生物碱的含量进行比较研究,为含该类成分的中药制剂的质量控制提供实验依据。1仪器、材料与试剂仪器:7512GW分光光度计(安捷伦科技上海分析仪器有限公司)。材料:乌头碱对照品(中国药品生物制品检定所,批号:0730210107)。制附子(上海雷允上中药饮片厂)。所用试剂均为分析纯。2实验方法与结果2.1样品溶液制备取制附子药材适量,粉碎成中粉,加85%的乙醇溶液加热回流2次。醇提液经回收乙醇、浓缩、调pH、过滤后得提取液。提取液经大孔吸附树脂分离纯化,收集80%醇洗脱液,经减压浓缩与药材量相当后所得溶液作为样品溶液。2.2滴定(药典)法测定附子总生物碱含量精密量取样品液20.0ml蒸干,残渣以少量水溶解,置分液漏斗中,以氨水调pH=10～11,氯仿萃取5次(10,10,10,8,8ml),合并氯仿液,回收氯仿,水浴挥干,残渣用乙醇5.0ml溶解,精密加入硫酸滴定液(0.01molL)15ml、水15ml与甲基红指示液3滴,用氢氧化钠滴定液(0.02molL)滴定至黄色,读取消耗的NaOH溶液的量,计算总生物碱的含量[每1ml硫酸滴定液(0.01molL)相当于12.9mg的乌头碱(C34H47NO11)]。2.2紫外分光光度(UV)法测定附子总生物碱含量[4]2.2.1对照品溶液制备精密称取12.0mg乌头碱对照品于50ml的容量瓶中,加1molL盐酸溶液数滴,溶解,加等量1molLNaOH溶液,用蒸馏水定容至刻度,摇匀,即得浓度为0.24mgml的对照品溶液。2.2.2标准曲线的制备精密量取乌头碱对照品液0、0.35、0.40、0.50、0.80、1.00ml,分别置于分液漏斗中,各加蒸馏水3.00、2.65、2.60、2.50、2.20、2.00ml,加溴麝香草酚蓝指示液2.0ml,邻苯二甲酸氢钾2氢氧化钠(pH=6)缓冲液5.0ml,加氯仿10ml,振摇3min,静置1h,分取氯仿液,并加入---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---0.5g无水硫酸钠,放置0.5h,以第一份为空白,于410nm处测定吸收度,计算回归方程,A=0.0035M-0.0869,r=0.101101,乌头碱含量在84～240Λg范围内线性关系良好。2.2.3样品测定方法取上柱洗脱液5.0ml蒸干,残渣以少量水溶解,置分液漏斗中,以氨水调pH=10～11,氯仿萃取5次(10,10,10,8,8ml),合并氯仿液,回收氯仿,水浴挥干,残渣用少量1molL盐酸溶解后,加入等量的1molLNaOH溶液,用蒸馏水定容至25ml,摇匀。精密吸取2.00ml,按标准曲线项下测定总生物碱含量。结果见表2。2.3两种测定方法含量测定结果的比较取同一样品溶液,分别用上述两种测定方法各—02—现代中药研究与实践2003年第17卷第6期ResearchandPracticeofChineseMedicines本文来源：网络收集与整理，如有侵权，请联系作者删除，谢谢！---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---