青藏高原7种嵩草遗传多样性AFLP研究郑XX1,呼XX2,王XX2,张XX3,宋XX2(1西北农林科技大学资源环境学院,陕西杨凌712100;2西北农林科技大学动物科技学院;2陕西省农业分子生物学重点实验室,陕西杨凌712100)摘要:【目的】从分子水平研究嵩草品种资源之间的遗传多样性,为综合评价青藏高原嵩草种质资源提供依据。【方法】用筛选出的4对E+3/M+3引物对11份嵩草基因组DNA进行AFLP扩增。【结果】共得到164条清晰可辨条带,多态性条带154条,多态性位点百分率为93.96%,嵩草平均Nei’s基因多样性指数为0.2430,Shannon’s多样性指数为0.4012,表明嵩草种质间存在丰富的遗传多样性。通过UPGMA聚类分析,将11个嵩草居群划分为5类。【结论】嵩草的11个自然居群存在丰富遗传多样性,嵩草居群的遗传相似系数与海拔之间没有相关性,嵩草居群的生境的异质性影响遗传分化。关键词:嵩草;遗传多样性;AFLPResearchofGeneticDiversityinSevenKobresiabyAFLPTibetPlateauofChinaZHENGHong-mei1,HUTian-ming2,WANGQuan-zhen2,ZHANGGuo-yun3,SONG激ang-hu2(1CollegeofResoursesandEnvironment,NorthwestAgriculturalandForestryUniversity,Yangling712100,Shaanxi;2CollegeofAnimalScienceandTechnology,NorthwestAgriculturalandForestryUniversity,Yangling712100,Shaanxi;3KeyLaboratoryMolecularBiologyofAgricutureShaanxi,Yangling712100,Shaanxi)Abstract:【Objective】ThisworkanalyzedthegeneticdiversityofKobresiaaccessions,inthemolecularlevel,andfurtherobtainedthehelpfulinformationforbreedingandgermplasmevaluation.【Method】GenomicDNAofKobresiawasamplifiedwithfourE+3andM+3primercombinationswithAFLP.【Result】AFLPanalysisproduced164scoreablebands,amongthem154(93.96%)werepolymorphic.ThemeanNei’sgenediversityindex(H)was0.2430,theShannon’sinformationindex(I)was0.4012,indicatingthatgeneticdiversityofKobresiaisabundant.Thenumberof11KobresiaaccessionsfromTibetanPlateaucanbeclassifiedintofivegroupswithclusteranalysisbasedontheUPGMAmethod.【Conclusion】Ingeneral,thereisanabundantgeneticdiversityamongKobresiaaccessionsresources,andthegeneticcoefficientisunrelatedtotheirgeographiclatitude.NaturalhabitatsinfluencgeneticdifferentiationofKobresia.Keywords:Kobresia;Geneticdiversity;AFLP0引言【研究意义】嵩草属(KobresiaWilld.)植物属莎草科中的苔草亚科,是多年生草本植物,多数是高寒草甸的建群种,它们具有草质柔软、营养丰富等特点,为各类家畜所喜食,是青藏高原控制水土流失,保持生态平衡的重要植物种类[1]。嵩草属植物作为高寒草甸主要的建群种,其研究对促进西藏高寒草地生态建设、改良天然草地、建立人工草地和发展草地畜牧业具有极其重要的科学研究和生产价值。【前人研究进展】AFLP自其问世以来,该方法已被广泛应用于生物多样性研究[4,5]、图谱构建[6,7]、品种鉴定[8,9]、基因定位分离[10,11]、杂种优势预测[12]和分子标记辅助---本文来源于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---选择育种[13]等多方面的研究,在多种植物如野生鸭茅、羽扇豆、烟草、羊草、玉米等[14~18]的研究中已取得很大进展,但在蒿草属植物研究中鲜见应用。【本研究切入点】嵩草种质资源的分子标记目前虽做了一些初步研究,但仅限于RAPD分析[2,3],未见有关嵩草AFLP(amplifiedfragmentlengthpolymorphism)分析的报道。【拟解决的关键问题】本试验采用AFLP分子标记技术对11份青藏高原嵩草的基因组DNA进行多态性扩增,旨在从分子水平对不同产地嵩草资源进行遗传多样性分析,为综合评价我国青藏高原嵩草种质资源提供依据。1材料与方法1.1材料2006年9月在西藏自治区那曲、当雄、浪卡子等地的天然草场采收成熟嵩草种子。10月在陕西省农业分子生物学重点实验室进行种子萌发,取萌发幼嫩叶片作为试验材料,每个群体取30株。1.2试验方法嵩草植物基因组DNA的提取采用CTAB法[19]。AFLP流程参照Vos等的方法[20]...