神经生长因子对新生大鼠HIBD后海马区凋亡相关蛋白表达的影响作者：胡伟，巩守平，李文妍，王岗，黄绍平【Abstract】AIM:Toinvestigatetheeffectsofnervegrowthfactor(NGF)ontheexpressionofapoptosisrelatedproteins(Bcl2,Bax)inhippocampusofneonatalratsfollowinghypoxicischemicbraindamage(HIBD),anditsmolecularbiologicalmechanism.METHODS:Seventytworatswererandomlydividedintocontrolgroup,HIBDgroupandNGFgroup.TheratmodelsofHIBDwereestablishedbymodifiedRICEmethod.ImmunohistochemistryandTUNELstainingwereemployedrespectivelytodetecttheexpressionsofBcl2andBaxandthenumberofapoptotichippocampalneurons.RESULTS:MoreorlessapoptoticneuronscouldbeobservedinhippocampusinHIBDgroupandthelevelofBcl2expressionwaselevatedslightly,whileBaxexpressionwassignificantlyhigherthanthatincontrolgroup.AfterNGFadministration,thenumberofapoptoticneuronswasdecreased(P《0.01),Bcl2expressionincreased(P《0.01)andBaxexpressiondecreasedremarkably(P《0.01)---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---ascomparedwithHIBDgroup.CONCLUSION:TheadministrationofNGFmayincreaseBcl2expressionanddecreaseBaxexpressionafterHIBDinneonatalrats,thusinhibitingtheapoptosisinhippocampus.【Keywords】nervegrowthfactor;hypoxiaIschemia,brain;braininjuries;hippocampus;apoptosisrelatedprotein【摘要】目的：应用新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）模型，观察神经生长因子对海马区细胞凋亡及相关蛋白Bcl2和Bax的影响，探讨其神经保护作用的分子生物学机制.方法：72只大鼠随机分为对照组、HIBD组和NGF治疗组.应用改良RICE法制作大鼠HIBD模型，TUNEL法检测各组动物海马区细胞凋亡数，免疫组化染色观察Bcl2,Bax蛋白的表达.结果：与假手术组相比，新生大鼠HIBD后海马区存在不同程度的细胞凋亡，Bcl2表达轻度升高，Bax表达明显升高.与HIBD组比较，NGF治疗后，凋亡细胞减少（P《0.01），Bcl2蛋白表达升高（P《0.01），Bax表达下降（P《0.01）.结论：HIBD后，新生大鼠海马区细胞存在细胞凋亡，NGF治疗增强Bcl2表达，减少损伤基因Bax表达，抑制细胞凋亡，具有脑保护作用.【关键词】神经生长因子；缺氧缺血，脑；脑损伤；海马；凋亡相关蛋白0引言缺氧缺血性脑损伤(hypoxicischemicbraindamage,HIBD)---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---是由于宫内窘迫、新生儿窒息等引起的新生儿脑部严重损伤，有较高的发病率和死亡率,也是导致智能落后和脑性瘫痪等儿童伤残的主要原因［1］.HIBD发病机制复杂，涉及多个环节，而凋亡是后期神经细胞缺失和功能障碍的主要原因.细胞凋亡持续时间较长，适当的治疗可逆转凋亡的病理过程而改善预后.本实验应用新生大鼠HIBD模型，以神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)进行治疗，观察NGF对新生大鼠HIBD后海马区细胞凋亡及相关蛋白Bcl2和Bax的影响，探讨其神经保护的分子生物学机制，以探讨HIBD更为有效的治疗途径和方法，为临床治疗新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxicischemicencephalopathy,HIE)提供理论依据.1材料和方法1.1材料新生7d龄SD大鼠72只，雌雄不拘，体质量11～16g，由第四军医大学医学动物实验中心提供.注射用鼠神经生长因子(NGF恩经复)（厦门北大之路生物工程公司）；兔抗大鼠Bcl2多克隆抗体，小鼠BaxmAb，免疫组化染色SP试剂盒，细胞凋亡检测试剂盒（武汉博士得生物工程公司）.1.2方法1.2.1动物模型制备参照文献［2］制作HIBD模型：大鼠乙醚麻醉后，游离左颈总动脉并永久结扎，术后水浴箱恢复1h，再置于37℃自制缺氧舱中，以3L/min速度持续输入含80ml/L氧气的氮氧混合气体2h，制成HIBD模型.1.2.2动物分组大鼠随机分为3组：①对照组：24只（假手---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---术处理，仅游离左颈总动脉，不结扎亦不缺氧）；②HIBD组：24只，RICE法制备HIBD模型后腹...