胸腹水细胞块切片结合免疫组化在病理诊断中的应用体会乔国莉七台河市矿业精煤集团有限责任公司总医院154600摘要：目的：研究分析胸腹水细胞块切片结合免疫组化在病理诊断中的应用价值。方法：选择在2013年6月至2014年8月入住我院进行临床送检的139例胸腹水标木行常规细胞涂片检查作为研究对象，选择常规细胞涂片疑似恶性胸腹腔积液标木22例制作细胞沉渣切片，行HE常规染色和免疫组化染色。结果：22例疑为恶性胸腹水标木进行离心沉濟乜埋及借助免疫组织化学染色，诊断腺癌13例，鱗状细胞癌3例，小细胞癌2例，恶性间皮瘤1例，恶性淋巴瘤1例，反应性间皮细胞2例。细胞块切片HE染色细胞丰富密集，染色分明，结构清晰，具有一定的组织结构。免疫组织化学染色阳性信号定位准确，对比度好，背景干净。结论：细胞沉濟石蜡切片及免疫组化技术与常规胸腹水脱落细胞学检查相结合可有效提高胸腹水病理诊断的准确率，提高肿瘤细胞诊断的阳性率，值得临床推广。关键词：免疫组化染色；胸腹水；细胞学检查胸腹腔积液在临床中较为常见，产生机制十分复杂，判定其良恶性对疾病的诊断、治疗和预后有重要意义。胸腹水脱落细胞学检查是临床诊断的重要方法,但单纯细胞形态学不能提供像组织学一样准确的病理诊断，因而给正确诊断带来网难。笔者所在科室利用细胞块与免疫组化技术和常规胸腹水脱落细胞学检查相结合，能够提高细胞病理诊断的准确率，为临床诊断和治疗提供依据，现报告如下。1资料与方法1.1材料收集笔者所往医院2013-6只-2014什:8月临床送检的139例胸腹水标木，均为自浆膜腔抽取的新鲜液体。其中男88例，女51例，年龄18〜72岁。1.2方法1.2.1常规细胞涂片送检的139例胸腹水标本中，每例标本100ml左右，阴凉处静置5min,取自然沉淀标本50ml置于离心管中，2500r/min的速度离心10min,吸出上清液。取沉淀物涂片，95%乙醇固定10min：苏木素染色3min，1%盐酸洒精分化5s，流水返蓝5min,伊红染色5s，水洗1次，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片［1】。涂片由两位高年资细胞病理医师进行形态学观察，根据细胞形态、核不典型性和黏附性分为良性、恶性。1.2.2细胞沉渣切片制作选择常规细胞涂片疑似恶性胸腹腔积液标本22例，将常规细胞学检査剩余的细胞学标本移入20〜50ml离心管，2500r/min10min,离心后用吸管吸掉上清液，向含沉淀物的离心管内加入10%中性福尔马林20ml,放入振荡仪振荡10min,随后再离心10min,弃上清液，用镊子取出沉淀物，用擦镜纸包好，常规脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色。有些胸腹水中含血性成分较多，加入冰醋酸与乙醇混合液20ml（25%乙醇95ml,冰醋酸5ml），混合后再离心。1.2.3免疫组化染色免疫组化采取Envision两步法，按照试剂说明书严格操作。检测TTF-1、CK7、CR、VNlin、CEA、EMA、CA125、Vim、mesothelial等表达。石蜡切片脱蜡至水，蒸馏水洗2〜3次各2min,高压抗原修复，3%H2O2室温孵育lOmin，以消除内源性过氧化物酶的活性。PBS洗2〜3次各5min;滴加正常山羊血清封闭液，室温10min,滴加I抗，4°C过夜。阴性对照用PBS代替1抗。滴加II抗，DAB显色，苏木素复染。盐酸乙醇分化，切片脱水、透明、封片、镜检。同时设立阴性和阳性对照。2结果对22例疑为恶性胸腹水标本进行离心沉渣包埋及借助免疫组织化学染色，诊断结果：腺癌13例，鱗状细胞癌3例，小细胞癌2例，恶性间皮瘤1例，恶性淋巴瘤1例，反应性间皮细胞2例。细胞块切片常规HE染色，切片中细胞丰富密集，染色分明，细胞结构清晰，具有一定的组织结构。免疫组织化学染色阳性信号定位准确，对比度好，背景干浄，见图1〜图6。3讨论胸腹水脱落细胞学检查因方法简单、操作简易、经济快速并且患者痛苦少,在临床工作中应用广泛。常规胸腹水脱落细胞学涂片检查阳性率较低，一些病例难以确定其组织。对于典型的细胞能较准确地诊断，但奋吋炎性胸腹水增生、退变的间皮细胞在形态上与某些恶性细胞，尤其是腺癌细胞易于混淆，增加了诊断的困难。细胞块切片可作为传统细胞涂片的奋效辅助方法，而砬用胸腹水细胞块结合免疫组化方法更能补充常规细胞涂片的不足［2］。胸腹水细胞沉渣石蜡切片技术操作简便，既提高胸腹水标本的阳性诊断...