长白山蜂胶的生物活性分析摘要：对长白山蜂胶的抗氧化、抗疲劳和抑菌能力进行了分析。结果表明，该蜂胶清除径基、DPPH和超氧阴离子3种自由基的能力随其浓度的增大而增强；蜂胶可显著延长小鼠游泳、爬杆力竭时间，小鼠的肝糖原和肌糖原储备显著增加，血乳酸变化幅度很小；蜂胶对细菌的抑制作用明显强于真菌，对9种细菌的最小抑制浓度MIC为25〜1600ug/mLo长白山蜂胶具有较强的生物活性。关键词：蜂胶；生物活性；抗氧化；抗疲劳；抑菌：S896.6文献标识码：A：0439-8114(2013)02-0430-05蜂胶(Propolis)是由蜜蜂采集植物树脂、叶芽及伤愈组织分泌物并混入蜂蜡、花粉等经咀嚼加工而成的一种黏稠物质，蜂胶中含有蜜蜂上瓠腺、蜡腺等的分泌物，属于动植物双源性物质［1］。北温带的蜂胶主要于杨树、桦树和针叶树等植物的树脂［2］。蜂胶是蜜蜂用于维持整个群体健康的有效物质，是蜜蜂献给人类的一种最独特、最神奇的天然物质，被称为“紫色黄金”。蜂胶是不透明的固体，表面光滑或粗糙，折断面呈沙粒状。味微苦，略带辛辣味，嚼之粘牙，低于15°C时变硬、变脆，易粉碎；高于36°C时质软有黏性和可塑性［3］。蜂胶的化学成分复杂，目前已发现200多种组分，主要包括黄酮类、酚醛类、帖类、酯类和有机酸类等，另外还有多种维生素、氨基酸以及镁、镉、铁、锌、银、钻等微量元素［4］,其中黄酮类化合物达70多种，是蜂胶质量的主要评价依据。蜂胶味苦、辛，性寒，归脾、胃经。内服补虚弱，化浊脂，止消渴；外用解毒消肿，收敛生肌。近年来，大量研究发现蜂胶具有抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、抑制肿瘤以及双向调节血糖等重要的生理功效［5］。近年来，随着生活水平提高，人们保健意识日益增强，具有营养和保健功能的蜂产品越来越受到青睐［6］o本试验以长白山蜂胶为原料，通过抗氧化、抗疲劳、抑菌等能力的研究，对其生物活性进行了分析，以期为长白山蜂胶的开发与应用提供参考。1材料与方法1.1仪器超临界流体萃取仪（南通华安HA121-50-01）、紫外-可见光度计（岛津UV-1700）、高速中药粉碎机（温州LG-08A）、空气振荡器（哈尔滨HZQ-C）、真空泵（昆山SHB-III）、旋转蒸发仪（步琪R-210）、离心机（江苏金坛800型）、恒温干燥箱（上海101-O-BS）、匀浆机（潔河金田JT-B）、超声波清洗器（昆山KQ3200DB）＞恒温培养箱（上海比朗HWS-150）、冰箱（海尔BCD-215KA）、电子天平（梅特勒XL-204）01.2原料与试剂原蜂胶样品，购于吉林省养蜂科学研究所；1,1-二苯基苦基苯月井（DPPH）,购于Sigma公司；2,6-二叔丁基对甲酚（BTH）和没食子酸丙酯（PG）均为食品级，购于河南省所以仪工有限公司肝糖原标准液,肌糖原标准液，尿素氮测定试剂盒，购于南京建成生物工程研究所。无水乙醇、三氯甲烷、甲醇、铁氧化钾、磷酸、三氯乙酸、双氧水、硫酸亚铁、水杨酸、邻苯三酚、丙酮、乳酸、冰乙酸、碘化钾、硫代硫酸钠、乙醸、酚SL氢氧化钾、氟化钠等（以上试剂均为分析纯）。牛肉膏蛋白腺液体培养基、PDA培养基、蜡样芽胞杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、普通变形杆菌、产气杆菌、啤酒酵母、假丝酵母、黑曲霉（以上菌种、培养基均由吉林农业科技学院微生物研究室提供）。试验动物：昆明种雄性小鼠6~8周龄，体重18〜22g,由吉林正业生物制品有限公司动物室提供。1.3方法131蜂胶萃取液的制备将原蜂胶样品冷冻、粉碎后，取50.0g,加入10.0g滑石粉混合均匀后装入萃取斧中，以体积分数为75%的乙醇作为夹带剂，采用超临界CO2流体萃取法萃取蜂胶。其中萃取温度为40°C,萃取压力为30MPa；分离1压力为8MPa,温度为45°C；分离2压力为6MPa,温度为40°C。循环萃取，间隔30min,从分离1中取萃取物至无。1.3.2清除自由基能力的测定取2.5mL2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0ug/mL蜂胶萃取物乙醇液、BHT和PG乙醇溶液，加入0.2mol/LpH6.6磷酸缓冲溶液2.5mL及质量分数为1%的铁氧化钾2.5mL,50£水浴20min后急速冷却，加入质量分数为10%的三氯乙酸溶液2.5mL3000r/min离心10min,取上清液5mL,加蒸憾水4mL及质量分数为0.1%的FeC131mL混匀放置10min,于700nm处测定吸光值。1.3.3軽基自由基清除率的测定分别于6个10mL容量瓶中加入9mmol/LFeS04...