TGFP1对大黃多糖治疗糖尿病的作用论文TGFpl对人黄多糖治疗糖尿病的作用论文预读:摘要:【摘要】1=1的探讨人黄多糖对糖尿病皮肤创血的疗效及可能机制•方法链魔佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,2周后手术制作背部创面模型,再随机分为糖尿病组(给予生理盐水)、大黄多糖组(给予大黄多糖)及大黄多糖-SB431542m(给予人黄多糖及TGFpl受体抑制剂SB431542混合液),另取正常人鼠制作背部创而模型给了住理盐水为对照组.2周后观测创面愈合率,检测创面%脯氨酸含量,HE染色观测创面肉芽组织生长情况,免疫组化染色检测TGFpl表达.结果•对照组相比,糖尿病组及大黄多糖-SB431542组创血愈合率明显降低,疑脯氨酸含量减少(均V0.01),而大黄多糖组无明显变化(>0.05).对照纽与人黄多糖纽真皮层较厚,胶原纤维丰富,而糖尿病纽与人黄多糖-SB431542组真皮层较薄,皮下胶原纟R织较少.糖尿病纟ftTGFpi表达较对照纟fl减少,人黄多糖组及大黄多W-SB431542组TGF卩1表达明显增加.结论诱导TGFpl表达是人黄多糖促进糖尿病皮肤创面愈合的重要机制2—・【关键词】大黄多糖;糖尿病;皮狀创面;TGFP1;大鼠【中图分类号】R587.1【文献标志码】A【DOI]10.16695/j.cnki.1006-2947.2015.06.006糖尿病微血管病变可导致皮肤营养障碍,皮肤易于受损且伤而修复能力羞,患者常继发感染,引起难以愈合的溃疡.糖尿病患者皮肤溃疡发病率约为溃疡迁延不愈,可长达数月到数年Z久.[1]30%,糖尿病患者手部、臀部、峻部及足部均可发生皮肤溃疡,其中尤以足部溃疡在糖尿病难治性溃疡中最为常见,其高截肢率和高致残率是糖尿病患者致残、致死的重要原因,给患者带來沉重的家庭负担.[2]屮药人黄具有生肌、攻积滞、清湿热、泻火、凉血、祛瘀、解毒等作用,中药外用创伤药多含有中药大黄.大黄多糖是中药大黄的重要药理成分之一,貝有抑制细胞凋亡,促进细胞增殖的作用.木[3]研究拟探讨大黄多糖对糖尿病皮肤创面愈合的影响及机制,为糖尿病皮肤破损的治疗提供依据.1材料和方法1」试剂人黄多糖购自广州泽力医药科技有限公司,HE染色试剂盒购白北京碧云天牛物科技有限公司,疑脯氨酸检测试剂盒购自南京建成牛物工程研究所,转化生长因子卩・1(transforminggrowthfactor-P1,TGFp1)抗体及TGF卩1特异性受体拮抗剂SB431542均购自Abeam公司;链腺佐菌素(streptozotocin,STZ)购HSigma公司」.2动物模型的建立及分组雄性SD大鼠,体质量200〜230g(辽宁医学院实验动物中心);大鼠腹腔注射2%STZ溶液(60mg/kg),48h后尾静脉取血,血糖浓度大于16.7mmol/L[4]即为糖尿病大鼠.糖尿病模型2周后,参照文献,用手术刀切取人鼠的背部制作2.0cmx2.0cm的方形创[3,5]面至皮下组织,形成丿支肤创面•参照文献,配制大黄多糖溶液(100mg/L)及人黄多糖-SB431542混合液(大黄多糖100mg/L、SB43154220pmmol/L).实验分为4组,对照组(正常大鼠给予生理盐水)、糖尿病组(糖尿病大鼠给予生理盐水)、大黄多糖组(糖尿病大鼠给予大黄多糖)、大黄多糖-SB431542组(糖丿來病大鼠给了人黄多糖-SB431542混合液),创面每FI滴液0」ml,一次性无菌纱布包扎,连续给药2周.1.3创而愈合率,HE染色给药2周示,将无伸缩性的透明膜覆盖于创面上,描记创面的轮廓,再将该图像扫描输入计算机,利用MIG2000软件计算出创面轮廓面积.该轮廓面积•创面面积的百分比即创面愈合率.取皮肤标本浸入4%多聚甲醛溶液中固定、石蜡包埋、切片、脱蜡、水化,常规进行HE染色,显微镜下观察并记录各组创血肉芽组织牛成情况.1.4创面组织屮為脯氨酸含量测定将创面纽织准确称重后,以9倍生理盐水制成10%的组织匀浆,12000rpm离心10min,将上清液稀释至50倍体积,按OHP含量测定试剂盒说明进行操作.1.5免疫组化检测创面组织TGFpl表达取创面组纵于4%多聚「卩醛間定后,常规制作石蜡切片,切片水化后,室温下以血清封闭lh,以TGFP1抗体孵冇,DAB显色后,苏木梢轻度复染.逐级洒精梯度脱水、二甲苯透明、封片后显微镜下观察并拍照.利用软件ImageJ,将对照组灰度值设置为100%,测算各组灰度值.统计学分析利用SPSS17.0软件,实验数据用均数土标准差表示,组问比较釆用t检验,<0.05认为有统计学意义.2结果2」创...