甲硝哩诺氟沙星栓微生物限度检查方法探［摘要］目的：建立甲硝哇诺氟沙星栓微生物限度检查方法。方法：以含1%吐温-80的pH=7.0无菌氯化钠-蛋白豚缓冲液为溶剂，用匀浆法制备供试品溶液，采用薄膜过滤并在培养基中加入中和剂的方法，来进行细菌数的检测和控制菌检查。霉菌及酵母菌数的测定，可采用培养基稀释法。结果:可以有效地去除甲硝哇诺氟沙星栓的抗菌成分,5种阳性菌的回收率均达到70%,符合《中国药典》2005年版的要求。结论：所建立的方法适用于甲硝哇诺氟沙星栓的微生物限度检查。［关键词］甲硝瞠诺氟沙星栓;匀浆；薄膜过滤；中和剂［中图分类号］R927.2［文献标识码］A［文章编号］1673-7210(2010)02(a)-042-03StudyonmethodofmicrobiallimittestforMetronidazole-norfloxacinSuppositoriesZHOUXiusen,LIDaoming(XinyangInstituteforFoodandDrugControl,Xinyang464000,China)［Abstract］Objective：ToestablishamethodofmicrobiallimittestforMetronidazole-norfloxacinSuppositories・Methods：1%Tween-80sterilesodiumchloride-peptonebuffer(pH=7・0)asthesolvent,Thesolutionfortestwerepreparedbyhomogenatetechnique,Bacterialcountandthecontrolledbacteriumwasexaminedbymembranefiltrationmethodandmediumaddedneutralizer,Thenumberofmoldsandyeastweredeterminedwithmediadilutionmethod・ResuIts：ThemethodcaneffectivelyeliminatethebacteriostasiseffectsofMetronidazo1e~norf1oxacinSuppositoriesandrateofrecoveredof5-positivebacteriahaveattained70%,accordwiththestandardofChinesePharmacopeia(2005Edition).Conclusion：ThemethodissuitableformicrobiallimittestforMetronidazole-norfloxacinSuppositories・[Keywords]Metronidazole-norfloxacinSuppositories；Homogenate；Membranefiltration；Neutralizer甲硝吐诺氟沙星栓是河南信阳职业技术学院附属医院制剂室配制的外用制剂，以甲硝哇和诺氟沙星为主药、硬脂酸聚痊氧(40)酯为基质混合制成的栓剂。其中甲硝哇对大多数厌氧菌具强大抗菌作用，对阿米巴原虫和滴虫也有较强的杀灭作用，诺氟沙星为第三代喳诺酮类抗菌药物，具有抗菌谱广、作用强等特点。临床用于治疗阴道滴虫、阴道炎，各种阿米巴病及术后预防和治疗厌氧菌引起的感染等。本文按照《中国药典》2005年版二部附录XIJ微生物限度检查法［1］有关要求，对甲硝哇诺氟沙星栓微生物限度检查方法的建立进行探讨。1仪器与试药1.1仪器HTY-III智能集菌仪、HTY反复使用集菌培养器（杭州泰林医疗器械厂）；YJA型电动匀浆仪（台州市椒江五星机械仪器有限公司）;1RH-150B型生化培养箱（广东省医疗器械厂）；电热三用水箱（北京市医疗设备厂）；JM3102电子天平（余姚纪铭称重校验设备公司）。1.2试药甲硝坐诺氟沙星栓（规格：3.4g,批号：20090311,河南信阳职业技术学院附属医院制剂室提供）；大肠埃希菌［CMCC（B）44102］、金黄色葡萄球菌［CMCC（B）26003］.枯草芽砲杆菌［CMCC（B）63501］、铜绿假单胞菌［CMCC（B）10104］.白色念珠菌［CMCC（F）98001］、黑曲霉［CMCC（F）98003］均购自河南省食品药品检验所，菌株传代数均为第4代；营养琼脂培养基（批号：070328）；玫瑰红钠琼脂培养基（批号：070531）；营养肉汤培养基（批号：070508）；改良马丁培养基（批号：070302）；胆盐乳糖培养基（批号：070419）；改良马丁琼脂培养基（批号：070520）；甘露醇氯化钠琼脂培养基（批号:080520）；澳化十六烷基三甲铁琼脂培养基（批号：070620）均为北京三药科技开发有限公司生产；pH=7.0氯化钠-蛋白月东缓冲液（批号：070523,北京三药科技开发有限公司）；吐温-80、硫酸猛为国产分析纯。2方法与结果2.1菌液制备分别取经371培养18〜24h的大肠埃希菌、枯草芽鞄杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的营养肉汤培养物1ml,经25-28°C培养18〜24h的白色念珠菌的改良马丁液体培养物1ml,用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释成每毫升含菌数50〜100cfu的菌悬液；取经25〜28°C培养1周的黑曲霉改良马丁琼脂斜面培养物，用5ml0.9%无菌氯化钠溶液洗下黑曲霉胞子，吸胞子悬...