桑椹抗氧化活性的初步研究【摘要】目的：桑椹是既是食用又是药用的水果之一，具有很高的营养价值，本文对它所含的抗氧化活性成分进行了研究。方法：新鲜桑椹的甲醇提取物用乙酸乙酯萃取后，通过硅胶柱层析、薄层层析等进行分离，得到的馏分用DPPH法测定其抗氧化活性。结果：经过两次分离，各得到12个和7个馏分，大部分的馏分显示出了很强的抗氧化活性。结论：日常食用的药食两用水果桑椹中含有抗氧化活性成分，可以通过日常饮食的摄入达到抗氧化的目的。【关键词】桑椹；抗氧化活性；DPPH法PreliminaryStudyonAntioxidativeActivityofMulberryWangRongWuTong【Abstract】ObjectiveMulberryisoneofbothedibleandmedicinalfruitswithhighnutrition.Theantioxidativecomponentswereisolatedandanalyzed.MethodThefreshmulberrywereextractedwithmethanol,andafterconcentrationunderreducedpressure,theaqueousresiduewaspartitionedwithEtOActogiveEtOAcextract.Afterisolatedandpurifiedbyasilicagelcolumnandthinlayerchromatography,gainedfractionsweresuppliedtomeasuretheantioxidativeactivitybyDPPHmethod.Result12fractionsand7fractionsweregainedafterisolatedtwice.Mostofthefractionsshowedtheverystrongantioxidativeactivity.ConclusionThereareantioxidativecomponentsinmulberry,andantioxidationcanbeachievedbyintakeofmulberry.【Keywords】mulberry;antioxidativeactivity;DPPHmethod【】R431【文献标识码】B【】1005-0515(2011)10-0419-02桑椹，又名桑果、桑子，味甘、性寒，具有生津止渴、滋阴补血、补肝益肾、固精安胎、乌须黑发、聪耳明目、安神养心、润肠通便、健步履、利关节、去风湿、解酒等功效，常用于医治糖尿病、肝肾阴虚、失眠耳鸣、津液不足、风湿、便秘、须发早白、神经衰弱［1］等。现代医学研究发现，桑椹还具有防癌抗诱变、增强免疫力、驻颜抗衰老、促进造血细胞生长、降低血糖血脂［2］等方面的保健功能。本研究旨在通过提取桑椹鲜果中的抗氧化活性物质，利用DPPH法测定各馏分的抗氧化活性。1材料与方法1.1材料。作为实验材料的桑椹为济南近郊所产的水果，从济南市果品批发市场购得。1.2仪器。SB-1000型旋转蒸发仪：上海爱明仪器有限公司；UV754紫外可见分光光度计、FA2004B型电子天平：上海精密科学仪器有限公司；SHB―Ⅲ循环水式多用真空水泵：郑州长城科工贸有限公司；ZF7C三用紫外分析仪：上海康华生化仪器制造有限公司。1.3试剂。DPPH(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl)：AlfaAesar公司；无水乙醇、硫酸：莱阳市康德化工有限公司；甲醇、正己烷：天津市广成化学试剂有限公司；三氯甲烷：天津市北方天医化学试剂厂；乙酸乙酯：天津市富宇精细化工有限公司；正丁醇、冰乙酸：天津市化学试剂三厂；硅胶：青岛海浪硅胶干燥剂厂；试剂均为分析纯。1.4方法1.4.1桑椹活性成分的提取。将10千克新鲜的紫红色桑椹放入容器中，加入10升甲醇溶液，室温下避光放置两天。用过滤瓶和砂芯漏斗抽滤后得到桑椹的初提液，暂放在棕色玻璃瓶中冷藏保存。再次将10升甲醇溶液加入盛有桑椹的容器中，放置一天，进行第二次提取。将两次的提取液混合，用旋转蒸发仪进行减压浓缩，得到桑椹的甲醇粗提水溶液。将桑椹的甲醇粗提水溶液用乙酸乙酯萃取，得到190克桑椹乙酸乙酯提取物，将其溶解在50毫升的乙酸乙酯中，放入棕色瓶中在冰箱中保存待用。1.4.2玻璃柱层析法分离桑椹活性成分。其中一部分的乙酸乙酯提取物（2.5g）经过硅胶色谱柱（40×2cmi.d.），用正己烷-乙酸乙酯-甲醇溶液按比例洗提，溶出12馏分。50%和100%甲醇馏分（0.5g）又进一步经过硅胶色谱柱（30×1.5cmi.d.），用三氯甲烷-甲醇溶液洗提，得到7馏分。1.4.3薄层层析法（thinlayerchromatography，TLC）分离桑椹活性成分。将各馏分用毛细管均匀地点在薄层层析板上，放入展开槽中进行分离。待分离完毕后，用含5%硫酸的乙醇溶液喷雾后加热，并计算分离成分的Rf值。1.4.4抗氧化活性的测定（DPPH法）。DPPH?是一种人工合成的稳定自由基，在无水乙醇中呈紫色，于517nm处有强吸收。当有自由基清除剂存在时，DPP...