活血熄风方对局灶性脑缺血大鼠血管内皮生长因子mRNA表达的影响【摘要】目的观察活血熄风方对局灶性脑缺血模型大鼠脑梗塞体积及脑组织中血管内皮生长因子（VEGFmRNA）表达的影响。方法Wistar雄性大鼠随机分为假手术组，模型组，活血熄风方高、中、低3个剂量组（剂量分别为20，10，5g·kg-1）和尼莫地平对照组（0.02g·kg-1），采用光化学法建立局灶性脑缺血大鼠模型，造模前7d灌胃给药，造模后24h取材，TTC染色法测脑梗塞体积，逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法测VEGFmRNA表达。结果与模型组比较，活血熄风方各剂量组的脑梗塞体积明显减少（P＜0.01），VEGFmRNA表达明显升高(P＜0.01)。结论活血熄风方可明显减少局灶性脑缺血大鼠脑梗塞体积，具有脑保护作用，其作用机制可能与增强VEGFmRNA表达有关。【关键词】活血熄风方；光化学法；血管内皮生长因子mRNA；逆转录聚合酶链式反应；局灶性脑缺血ChinaAbstract:ObjectiveToobservetheeffectsofHuoxueXifengRecipe(HXR)oninfarctionvolumeandtheexpressionsofVEGFmRNAinbraintissueafterfocalcerebralinfarction(FCI)inrats.MethodsWistarmaleratswererandomlydividedintosixgroups:shamgrou---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---p,modelgroup,HXRtreatedgroup(20，10，5g·kg-1ashigh，middleandlowdoserespectively)andnimodipinecontrolgroup(0.02g·kg-1).ThemodelofFCIwasestablishedbasedontheprincipleofphoto-chemistryinitiationofthrombosis,intragastricadministrationcontinued7daysbeforemodelinganddrawthematerialafter24h.InfarctionvolumewasdetectedbyTTCstainingtechnique,theexpressionofVEGFmRNAwasdetectedbyreversetranscriptionpolymerasechainreaction(RT-PCR).ResultsTheinfarctionvolumewasdecreasedandtheexpressionsofVEGFmRNAwashigherinHXRtrertedgroupsthanthatofFCImodelrats(P＜0.05orP＜0.01).ConclusionHXRcandecreasedinfarctionvolumeandhasaprotectiveeffectonFCIrats,andthemechanismmayberelatedtoincreasingtheexpressionofVEGFmRNA.Keywords:HuoxueXifengRecipe;Photo-chemistry;VEGFmRNA;RT-PCR;Focalcerebralinfarction脑缺血后，由于脑组织缺血、缺氧，缺血中心区细胞迅速死亡，半暗区神经细胞处于低氧、低灌注状态，及时恢复该区域血流供应有---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---望改善患者的神经功能。而半暗区血流的恢复有赖于侧枝循环的建立，血管再生是决定这些细胞存活的关键因素，与缺血性脑卒中病人的预后关系密切［1］。在血管再生过程中，众多因子参与调节，血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)是已知作用最强和特异性最高的促血管生长因子［2］，在血管生成和神经保护方面发挥着重要作用。活血熄风方是在“淤血生风”假说［3］基础上提出的治疗中风的新组方，全方以活血化淤为主，通过活血化淤以求逐淤熄风，经临床验证疗效满意，已有实验证实活血熄风方具有脑保护作用［4］。本实验用TTC染色法观察光化学法诱导的局灶性脑缺血大鼠脑梗塞体积大小，采用RT-PCR技术观察VEGFmRNA的表达以及活血熄风方对上述方面的干预作用，来探讨活血熄风方脑保护的作用机制。1材料与仪器1.1动物健康雄性Wistar大鼠，体质量200～250g，山东鲁抗医药有限公司提供［合格证号：SCXK(鲁)20050017］。1.2药物活血熄风方，由当归、红花、川芎、水蛭等药物组成，蒸馏水浸泡1h，水煎2次，30min/次，两次煎液混匀，旋转蒸发仪分别浓缩至2，1，0.5g·ml-1，4℃保存备用。尼莫地平片，山东鲁抗---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---医药集团赛特有限责任公司生产，每片20mg，使用前用蒸馏水溶解成含量为2mg·ml-1的混悬液。1.3试剂与仪器TrizolReagent（美国Invitrogen）；DNAMarkerDL2000、Taq酶、Ribonucleaseinhibitor、dNTPMixture（大连宝生物）；M-MLVReverseTranscriptase（美国Promega）；玫瑰红(美国Sigma)；红四氮唑(TTC)（化学纯，北京化工厂）。...