n---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---山东省地方标准DB37DB37/TXXXX-201X水质粪大肠菌群测定光度法Waterquality-determinationoffecalcoliforms-photometricmethod（报批稿）--实施--发布山东省市场监督管理局发布目次前言Ⅱ1适用范围12规范性引用文件13术语和定义14分光光度法15荧光法5前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山东省生态环境厅提出。本标准由山东省环保标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省生态环境监测中心、青岛佳明测控科技股份有限公司、北京华夏科创仪器股份有限公司。本标准主要起草人：李恒庆、由希华、宗雪梅、王婷、王聪、郑琳琳、邹康、潘光、周成、张芳、张爱芳。---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---水质粪大肠菌群测定光度法1适用范围本标准规定了测定水中粪大肠菌群的分光光度法和荧光法。本标准适用于地表水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的应急现场快速测定。本方法的检出限为30MPN/L，检测范围：30~109MPN/L，检测周期不大于18小时。2规范性引用文件下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T14581水质湖泊和水库采样技术指导HJ494水质采样技术指导HJ/T91地表水和污水监测技术规范3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1粪大肠菌群fecalcoliforms44.5℃培养能发酵乳糖产酸产气的需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。3.2最大可能数（MPN）mostprobablenumber最大可能数（mostprobablenumber，缩写为MPN），又称稀释培养计数，是一种基于泊松分布的间接计数法。利用统计学原理，根据一定体积不同稀释度样品经培养后产生的目标微生物阳性数，查表估算一定体积样品中目标微生物存在的数量（单位体积存在目标微生物的最大可能数）。4分光光度法4.1方法原理一定量的水样与选择性培养基混合均匀放置于44.5℃环境下，粪大肠菌群产生β-半乳糖苷酶（β-D-galactosidase），并分解色原底物释放出色原体使培养基呈现颜色变化，通过连续分光光度（波长：300nm~600nm）测定，依据待测水样色度变化与水中粪大肠菌群数成一定关系的原理，得出粪大肠菌群浓度。4.2干扰和消除---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---4.2.1活性氯具有氧化性，能破坏微生物细胞内的酶活性，导致细胞死亡，可在样品采集（4.5.1）时加入硫代硫酸钠溶液（4.3.4）消除干扰。4.2.2重金属离子具有细胞毒性，能破坏微生物细胞内的酶活性，导致细胞死亡，可在样品采集（4.5.1）时计入乙二胺四乙酸二钠溶液（4.3.5）消除干扰。4.3试剂和材料除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂。4.3.1粪大肠菌群检测试剂主要成分：蛋白胨5g硫酸锰0.005g硫酸镁0.001g硫酸锌0.001g磷酸盐1.78g两性霉素B0.60g蒸馏水1000ml制法：上述试剂溶于蒸馏水中，充分混匀，调整pH值为7.2~7.4，68.95kPa(115℃)，高压灭菌20min，分装贮存于4℃避光备用。也可采用市售商品化培养基制品。4.3.2硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H2O）。4.3.3乙二胺四乙酸二钠（C10H14N2O8Na2·2H2O）。4.3.4硫代硫酸钠溶液：ρ（Na2S2O3）=0.10g/ml称取15.7g硫代硫酸钠（4.3.2），溶于适量水中，定容至100ml，临用现配。4.3.5乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）溶液：ρ（C10H14N2O8Na2·2H2O）=0.15g/ml称取15g乙二胺四乙酸二钠（4.3.3），溶于适量水中，定容至100ml，此溶液保质期为30d。4.3.6无菌水：取适量纯水，经121℃高压蒸汽灭菌20min，备用。4.4仪器和设备4.4.1采样瓶：具螺旋帽或磨口塞的100ml、250ml、500ml广口玻璃瓶。注：在采集不存在或不考虑余氧、金属离子干扰的样品时，可采用市售无菌采样瓶或无菌采样袋。4.4.2微生物快速检测仪。4.4.2.1恒温培养单元：不少于2个温控系统，温度控制精度1℃，可自动调节待检测样本培养温度（44.5℃±1℃）。4.4.2.2检测单元：不少于4个独立的检测系统，可实现多个样本的同时监测。4.4.2.3数据显示、处理...