内科学(内分泌与代谢病)专业优秀论文骨髓间充质干细胞旁分泌效应对胰岛细胞增殖及凋亡的影响关键词：糖尿病骨髓间充质干细胞胰岛细胞细胞增殖细胞凋亡胰腺β细胞摘要：第一部分骨髓间充质干细胞旁分泌效应对胰腺β细胞系的影响目的：研究胰腺提取物对骨髓间充质干细胞分泌细胞因子的影响，并分析胰腺提取物处理后的骨髓间充质干细胞条件培养液对体外培养的胰腺β细胞增殖、凋亡及胰岛素分泌的影响方法：（1）制备正常大鼠胰腺提取物（normalratpancreaticextracts，N-RPE），再生性大鼠胰腺提取物（regenerativeratpancreaticextracts，R-RPE），分离培养鉴定大鼠骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcells，MSCs），分别应用N-RPE和R-RPE孵育MSCs获得条件培养液（MSCconditionedmedia，MSC-CM），分别为N-RPE-CM，R-RPE-CM，并设立无RPE处理的对照组（CTR-CM），ELISA法分析三组CM中IGF-1，HGF，bFGF及VEGF的含量，应用RT-PCR分析RPE对MSCs中细胞因子IGF-1，HGF，bFGF及VEGFmRNA的改变。（2）应用RPE处理后的MSC-CM孵育体外培养的大鼠胰腺β细胞系INS-1细胞，设立单纯RPMI1640培养基作为对照组（RPMI1640组），应用MTT分析N-RPE-CM，R-RPE-CM及CTR-CM对INS-1细胞增殖的影响；应用IL-1β，TNF-α和IFN-γ诱导INS-1细胞凋亡，AnnexinV/PI双染分析MSC-CM对INS-1细胞凋亡的影响。应用RIA分析MSC-CM对INS-1细胞分泌胰岛素影响，应用RT-PCR分析对INS-1细胞胰岛素mRNA的影响。结论：（1）胰腺提取物可以促进骨髓间充质干细胞分泌IGF-1，HGF，VEGF及bFGF，mRNA表达增加，再生性胰腺提取物促进作用更强。（2）胰腺提取物处理后的骨髓间充质干细胞条件培养液促进体外培养的INS-1细胞增殖，抑制其凋亡，促进INS-1细胞胰岛素分泌及mRNA表达（3）MSCs条件培养液的胰腺保护作用提示MSCs的旁分泌效应可能在MSCs移植治疗糖尿病中发挥重要的作用。第二部分骨髓间充质干细胞条件培养液对糖尿病大鼠胰岛细胞的作用目的：探讨应用骨髓间充质干细胞条件培养液对糖尿病大鼠模型的血糖控制、胰岛细胞增殖及凋亡的影响。方法：1％STZ60mg/kg单次腹腔注射制备糖尿病大鼠模型，分为四组：糖尿病对照组（DM-CTR组，腹腔注射生理盐水），n=6；CTR-CM组（腹腔注射CTR-CM），n=8：N-RPE-CM组（腹腔注射N-RPE-CM），n=8；R-RPE-CM组（腹腔注射R-RPE-CM），n=8。分析条件培养液对糖尿病大鼠体重，血糖的影响；胰腺HE染色分析对胰岛形态的改变，应用免疫组织化学胰岛素及Ki67染色，分析对胰岛细胞增殖的影响；应用TUNEL分析条件培养液对胰岛细胞凋亡的影响。结论：骨髓间充质干细胞条件培养液可以降低糖尿病大鼠的血糖，促进大鼠胰岛细胞的增殖，抑制其凋亡。正文内容第一部分骨髓间充质干细胞旁分泌效应对胰腺β细胞系的影响目的：研究胰腺提取物对骨髓间充质干细胞分泌细胞因子的影响，并分析胰腺提取物处理后的骨髓间充质干细胞条件培养液对体外培养的胰腺β细胞增殖、凋亡及胰岛素分泌的影响方法：（1）制备正常大鼠胰腺提取物（normalratpancreaticextracts，N-RPE），再生性大鼠胰腺提取物（regenerativeratpancreaticextracts，R-RPE），分离培养鉴定大鼠骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcells，MSCs），分别应用N-RPE和R-RPE孵育MSCs获得条件培养液（MSCconditionedmedia，MSC-CM），分别为N-RPE-CM，R-RPE-CM，并设立无RPE处理的对照组（CTR-CM），ELISA法分析三组CM中IGF-1，HGF，bFGF及VEGF的含量，应用RT-PCR分析RPE对MSCs中细胞因子IGF-1，HGF，bFGF及VEGFmRNA的改变。（2）应用RPE处理后的MSC-CM孵育体外培养的大鼠胰腺β细胞系INS-1细胞，设立单纯RPMI1640培养基作为对照组（RPMI1640组），应用MTT分析N-RPE-CM，R-RPE-CM及CTR-CM对INS-1细胞增殖的影响；应用IL-1β，TNF-α和IFN-γ诱导INS-1细胞凋亡，AnnexinV/PI双染分析MSC-CM对INS-1细胞凋亡的影响。应用RIA分析MSC-CM对INS-1细胞分泌胰岛素影响，应用RT-PCR分析对INS-1细胞胰岛素mRNA的影响。结论：（1）胰腺提取物可以促进骨髓间充质干细胞分泌IGF-1，HGF，VEGF及bFGF，mRNA表达增加，再生性胰腺提取物促进作用更强。（2）胰腺提取物处理后的...