・药物分析・反相高效液相色谱法测定毛鱼藤中鱼藤酮的含量胡道德,顾磊,刘皋林(上海交通大学附属第一人民医院,上海200080作者简介:胡道德(19642,男,副主任药师,副教授,研究生导师1Tel:(02163240090×4801,E2mail:shanghaiyao@sina.com1摘要目的:建立以反相高效液相色谱法测定毛鱼藤中鱼藤酮含量的方法。方法:以ZORBAXEclipseXDB-C18(5μm,4.6×150mm色谱柱为固定相;乙腈:0.1%磷酸溶液(48ζ52,v/v,pH2.6为流动相;流速1.0mL/min;柱温40.0;℃检测波长299nm。结果:鱼藤酮在浓度为30~50mg/L范围内,其峰面积与浓度线性关系良好,线性方程为A=20.7311C-0.3616(r=0.9998,平均加样回收率为100.74%,RSD为0.86%。结论:本方法操作简便、快速,结果准确,可用于毛鱼藤中鱼藤酮的含量测定。关键词毛鱼藤;鱼藤酮;反相高效液相色谱法中图分类号:R917文献标识码:A文章编号:1006-0111(200703-0159-03DeterminationofrotenoneinDerrisellipticabyreversed2phasehighperformanceliquidchromatographyHUDao2de,GuLei,LiouGao2lin(DepartmentofPharmacy,AffiliatedFirstPeople’sHospital,ShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai200080,ChinaABSTRCTObjective:Toestablishareversed2phasehighperformanceliquidchromatographymethodforrotenoneinDerriselliptica.Methods:ThedeterminationwasperformedonZORBAXEclipseXDB2C18(5μm,4.6×150mmcolumn.Themobilephaseconsistedofacetonitrileand0.1%phosphateacidsolution(48ζ52,v/v,pH2.6withflowrateat1.0mL/minanddeterminationwavelengthat299nmunder40.0.Results:Undertheconditionsdescribed,thecalibrationcurve℃ofrotenonewaslinearovertheconcentrationrangeof30to50mg/L.Theregressionequationwas:A=20.7311C20.3616,r=0.9998(n=5,P<0.01.Theaveragerecoveryforrotenonewas100.74%.Themeanrelativestandarddeviation(RSDwas0.86%.Conclusion:Themethodissimpleandaccurate,andsuitableforthedeterminationofrotenoneinDerriselliptica.KEYWORDSDerriselliptica;rotenone;reversed2phasehighperformanceliquidchromatography毛鱼藤(Derriselliptica为豆科鱼藤属植物,广泛生长在东南亚各国[1]。毛鱼藤根、茎中鱼藤酮(rotenone含量高,是目前我国鱼藤酮原药生产的主要原料。鱼藤酮是一种抑制神经组织和肌肉组织的选择性植物源杀虫剂,具有活性高、杀虫谱广的特点,在无公害农产品的害虫防治方面,具有较好的应用前景。近年文献报道[2,3],大鼠长时间接触鱼藤酮会对大鼠黑质多巴胺神经元有选择性损伤作用,可出现特征的Lewy小体,而对胆碱能神经元无影响,从而使大鼠产生类似于人类帕金森病(Parkinsondisease的症状,利用鱼藤酮的这一药理毒理作用可以建立大鼠帕金森病动物模型。我们在建造大鼠帕金森病动物模型之前,参考了有关文献[4,5],结合本实验室的具体条件,建立了测定毛鱼藤中鱼藤酮含量的反相高效液相色谱法,该方法操作简便、快速,结果准确,为鱼藤酮定量测定提供又一分析手段。1仪器与试药111仪器Agilent1100型高效液相色谱仪,包括四元梯度泵、二极管阵列检测器(DAD190~950nm、自动进样器、柱温箱、在线脱气机、数据处理系统为美国Agilent公司化学工作站(Chemstation,ZORBAXEclipseXDB2C18(5μm,4.6×150mm色谱柱,微孔滤膜(0.45μm,HP201真空过滤装置,MettlerToledo电子天平(AL104。112试药对照品鱼藤酮(Sigma2Aldrich,≥含量98.0%,乙腈(美国天地公司,批号:412021,色谱纯;三氯甲烷、丙酮、乙醇等均为分析纯;三蒸水(自制。2方法与结果211毛鱼藤根、茎提取物的制备称取毛鱼藤根、茎干粉适量,装入索氏提取器中,用三氯甲烷浸渍过951药学实践杂志2007年第25卷第3期夜(12h,然后回流提取1h,所得提取液先粗滤,后精滤(0.45μm,减压浓缩即得样品。212标准溶液配制精密称取干燥至恒重的鱼藤酮对照品适量,加丙酮-乙醇(1ζ2溶解并稀释至刻度,配成500mg/L储备液,置4℃冰箱保存。临用时将鱼藤酮储备液以乙醇按适当比例稀释,配制成浓度分别为30、35、40、45、50mg/L的鱼藤酮标准溶液。213供试品溶液配制精密吸取样品1.0mL,置50mL量瓶中,加乙醇至刻度,摇均,再精密吸取上述溶...