小鼠肝脏非实质细胞在诱导Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞及肝移植免疫耐受中起重要作用#510152025303540刘宏宇1，关连越1，辛敏刚2，王展鹏1，李卓男1，李巍1,3，PerkinsJD3，ReyesJ3**（1.吉林大学中日联谊医院肝胆胰外科，长春，130033；2.吉林大学中日联谊医院麻醉科，长春，130033；3.华盛顿大学器官移植外科，西雅图，美国）摘要：我们最近的研究表明Foxp3+CD25+CD4+调节性T(Treg)细胞在肝移植自发耐受诱导过程中起重要作用，但Treg是如何被诱导的、Treg与其他免疫细胞之间的关系及相互作用仍然不十分清楚。在本研究中,我们使用供体B6小鼠肝脏非实质细胞（NPC）和树突状细胞（DC）在体外与同种异体C3HCD4T细胞共同培养，以扩增Treg，然后将扩增的Treg输注给心脏移植受体，通过心脏移植物的存活时间以检验Treg的免疫调节功能。通过应用Flt3L-/-小鼠，研究肝脏DC在诱导Treg和肝移植免疫耐受过程中的作用。结果：与脾细胞或脾脏DC相比，肝脏NPC，尤其是DC，在体外与同种异体CD4T细胞共同培养能够诱导产生较多的Foxp3+CD25+CD4+Treg。过继转输这些Treg给同种异体鼠后，能显著延长与其同品系鼠的心脏移植物存活时间。然而，来自PD-L1-/-鼠的DC却不能诱导Treg。Flt3L-/-和PD-L1-/-小鼠的肝脏移植给C3H会诱导受体抗移植物急性排斥反应。免疫组化染色发现Flt3L-/-和PD-L1-/-作为供体的肝移植物及受体脾内Foxp3+Treg细胞明显减少。结论：肝脏NPC，尤其是肝脏DC在诱导Foxp3+CD25+CD4+Treg和肝移植耐受过程中起重要作用，其机理可能是依赖其表面PD-L1信号传导通路。关键词：肝移植耐受；小鼠；Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞；肝脏非实质细胞：请查阅《中国图书馆分类法》LivernonparenchymalcellsplayasignificantroleintheinductionofFoxp3+CD4+CD25+TregandlivertransplantationtoleranceinmiceLIUHongyu1,GUANLianyue1,XINMingang2,WANGZhanpeng1,LIZhuonan1,LIWei1,3,PerkinsJD3,ReyesJ3(1.DeptofHepatobiliary-pancreaticSurgery,China-JapanUnionHospitalof激linUniversity,126XiantaiStreet,Changchun,130033;2.Anesthesiology,China-JapanUnionHospitalof激linUniversity,126XiantaiStreet,Changchun,130033;3.transplantsurgery，Washingtonuniversity,Seattle,USA)Abstract:OurrecentstudieshavedemonstratedthatFoxp3+CD25+CD4+regulatoryTcells(Treg)contributesignificantlytolivertransplanttoleranceinduction.ItislargelyunclearhowTregareinducedandhowthesecellsinterplayintheregulationoflivertransplanttolerance.Here,weattemptedtoexpandthenumberofTreginvitrobycocultureoflivernonparenchymalcells(NPCs)ordendriticcells(DCs)withallogeneicCD4Tcells,andassessedtheirfunctionbyadoptivetransfertoheartallograftrecipients.WeusedFlt3ligand(FL)mutationmice,whichhaveseverereductioninalltypes基金项目：美国华盛顿大学校长基金（李巍）；中国国家自然科学基金（李巍81170416；81273264）；中国教育部博士点基金（李巍20100061110069）；吉林省科技厅国际合作基金（李巍2011742）；天普研究基金（李巍01201046)；吉林省自然科学基金（李巍201015178）作者简介：刘宏宇（1980年生），男，主治医师，器官移植与免疫耐受通信联系人：李巍（1963年生），女，教授，器官移植与免疫耐受.weili888@hotmail-1-ofDCs,toexaminetheroleofliverDCsinlivertransplanttoleranceinvivoafterlivertransplantation.OurresultsshowedthatliverNPCs,inparticularDCs,inducedagreaternumberofFoxp3+Tregthan4550556065707580didspleencells(SCs)andspleenDCs.AdoptivetransferoftheCD25+CD4+TcellsgeneratedfromliverNPCsorDCsprolongedheartallograftsurvivalatasignificantlyhigherlevelthanthecellsexpandedbySCsorspleenDCs.TheDCswhichisolatedfromPD-L1-/-micecouldnotgenerateTreginvitro.Moreover,thelivergraftsfromFL-/-orPD-L1-/-micewererejectedacutelyintheC3HrecipientsandassociatedwithreductionofFoxp3+cellsinthelivergraftsandrecipientspleensfromFL-/-donor...