外科学(普外)专业优秀论文参附注射液对大鼠肝缺血再灌注细胞凋亡的影响关键词：参附注射液肝脏缺血再灌注损伤细胞凋亡Bcl-2Caspase-3摘要：目的：研究参附注射液对大鼠肝脏缺血再灌注期间肝细胞凋亡的影响，并探讨其可能机制。方法：采用Pringle’s法阻断入肝血流30min,建立大鼠肝缺血再灌注模型。54只Wistar大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和参附治疗组。假手术组(S组)开腹后仅行游离肝周韧带而不行阻断；缺血再灌注组(IR组)和参附治疗组(SF组)均阻断大鼠肝脏的血流，30min后恢复再灌注，其中S组和IR组在术前30分钟经尾静脉注射生理盐水10ml/kg；SF组在术前30分钟经尾静脉注射参附注射液10ml/kg。分别在再灌注2h、6h、24h后，自下腔静脉采血2ml测定血清丙氨酸转移酶酶(ALT)、天冬氨酸转移酶(AST)；取小块肝组织在10％的中性福尔马林溶液中固定，石蜡包埋，用于HE染色光学显微镜观察、TUNEL法检测肝细胞凋亡指数(AI)以及免疫组化方法检测Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达。结果：血清生化酶结果：各时间点血清生化酶(ALT、AST)水平，IR组和SF组均明显高于S组(P<0.01)，而SF组明显低于IR组(P<0.01)。HE染色光镜下观察：S组肝组织、肝细胞结构基本正常。IR组肝细胞浊肿、大片坏死，肝窦扩张，其内淤积大量红细胞，汇管区充满大量中性粒细胞浸润，以6h时点最明显。SF组肝窦内淤血和组织损伤明显减轻，仍可见少量小灶状坏死，汇管区少量中性粒细胞浸润。肝细胞凋亡指数(AI)发现，在再灌注各时间点，IR组和SF组均高于S组，差异显著，(P<0.01)，SF组明显低于IR组，有显著差异(P<0.01)。且在再灌注2-6h，AI逐渐升高，在再灌注6-24h，AI逐渐降低，AI在6h达到峰值。Bcl-2蛋白表达情况：在S组有少量Bcl-2蛋白表达，在再灌注2h、6h和24h，IR组和SF组的Bcl-2蛋白表达与S组相比明显提高，P<0.01；与IR组比较，SF组的Bcl-2蛋白表达在再灌注6h、24h提高的显著，P<0.01。Caspase-3蛋白的表达情况：在S组有少量Caspase-3蛋白表达，在再灌注2h、6h和24h，蛋白的表达情况：在S组有少量Caspase-3蛋白表达，在再灌注2h、6h和24h，IR组和SF组的Caspase-3蛋白表达与S组相比提高的明显，P<0.01；与IR组比较，SF组的Caspase-3蛋白表达在再灌注2h、6h下降的显著，P<0.01。结论：参附注射液通过抗细胞凋亡途径保护肝脏缺血再灌注损伤。肝脏缺血再灌注损伤期间，Caspase-3基因的高水平表达和Bcl-2基因表达的抑制可能是肝脏细胞凋亡的重要机制。而SF通过下调Caspase-3表达，同时上调Bcl-2表达，从而抑制肝缺血再灌注损伤时肝细胞和肝窦内皮细胞的异常凋亡，减轻肝缺血再灌注损伤。正文内容目的：研究参附注射液对大鼠肝脏缺血再灌注期间肝细胞凋亡的影响，并探讨其可能机制。方法：采用Pringle’s法阻断入肝血流30min,建立大鼠肝缺血再灌注模型。54只Wistar大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和参附治疗组。假手术组(S组)开腹后仅行游离肝周韧带而不行阻断；缺血再灌注组(IR组)和参附治疗组(SF组)均阻断大鼠肝脏的血流，30min后恢复再灌注，其中S组和IR组在术前30分钟经尾静脉注射生理盐水10ml/kg；SF组在术前30分钟经尾静脉注射参附注射液10ml/kg。分别在再灌注2h、6h、24h后，自下腔静脉采血2ml测定血清丙氨酸转移酶酶(ALT)、天冬氨酸转移酶(AST)；取小块肝组织在10％的中性福尔马林溶液中固定，石蜡包埋，用于HE染色光学显微镜观察、TUNEL法检测肝细胞凋亡指数(AI)以及免疫组化方法检测Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达。结果：血清生化酶结果：各时间点血清生化酶(ALT、AST)水平，IR组和SF组均明显高于S组(P<0.01)，而SF组明显低于IR组(P<0.01)。HE染色光镜下观察：S组肝组织、肝细胞结构基本正常。IR组肝细胞浊肿、大片坏死，肝窦扩张，其内淤积大量红细胞，汇管区充满大量中性粒细胞浸润，以6h时点最明显。SF组肝窦内淤血和组织损伤明显减轻，仍可见少量小灶状坏死，汇管区少量中性粒细胞浸润。肝细胞凋亡指数(AI)发现，在再灌注各时间点，IR组和SF组均高于S组，差异显著，(P<0.01)，SF组明显低于IR组，有显著差异(P<0.01)。且在再灌注2-6h，AI逐渐升高，在再灌注6-24h，AI逐渐降低，AI在6h达到峰值。Bcl-2蛋白...