中药对幽门螺杆菌的体外联合抗菌实验【摘要】目的研究黄连、乌梅、蜂胶对幽门螺杆菌的体外联合抗菌作用。方法应用棋盘法，以琼脂平板法测定两两组合的不同浓度中药提取物对Hp的最低抑菌浓度，计算部分抑菌浓度(FIC)指数并判定联合效应。结果黄连与蜂胶联合应用后，其FIC指数为0.13(＜0.5)；黄连与乌梅联合应用后，其FIC指数为0.75(＞0.5)；乌梅与蜂胶联合应用后，其FIC指数为0.19(＜0.5)。结论黄连与蜂胶联合应用及乌梅与蜂胶联合应用，对Hp表现为协同作用，且乌梅与蜂胶联合应用协同作用较强；黄连与乌梅联合应用对Hp表现为相加作用；3种中药之间均无拮抗作用。【关键词】黄连乌梅蜂胶幽门螺杆菌联合抗菌实验CombinedAntibacterialActivityofThreeChineseDrugsAgainstHelicobacterPyloriAbstractObjective：TostudythecombinedantibacterialactivityofCoptischinensis，DarkPlumFruitandBeePropolisproagainstHelicobacterpylori(Hp)．MethodsTheprotocolwasdesignedbycheckboardmethod．TheMICsofCoptischinensis，DarkPlumFruitandBeePropolisproaloneorintwo-and-twocombinationagainstHpweredeterminedbyagarplatemethod,andtheFICindexeswascalculatedfortheevaluationofthecombinedeffects．ResultsWhenCoptischinensiscombinedwithBeePropolispro，theFICindexwas0.13(＜0.5)butwas0.75(＞0.5)whencombinedwithDarkPlumFruit；TheFICindexwas0.19(＜0.5)whenDarkPlumFruitcombinedwithBeePropolispro．ConclusionBothCoptischinensisincombinationwithBeePropolisproorDarkPlumFruitincombinationwithBeePropolisprohadsynergisticactiononHp．withthelattershowingmorepotentsynergisticaction．CoptischinensiscombinedwithDarkPlumFruitCeorgihadadditivityagainstHp．NoantagonisticactionswerenotedinCoptischinensis，BeePropolisproandDarkPlumFruit．Keywords:Coptischinensis；DarkPlumFruit；BeePropolispro；Helicobacterpylori(Hp)；combineddrugsusceptibilitytest幽门螺杆菌(Helicobacterpylori，Hp)是由Warren和Marshall于1982年首次从慢性活动性胃炎患者胃窦黏膜活检组织中分离出来并培养成功的，目前认为该菌与慢性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴样组织(MALT)恶性淋巴瘤以及肠型胃癌密切相关，WHO于1994年将其列为胃癌的I类生物致癌因子［1］。据调查，Hp感染在世界范围内广泛存在，世界平均感染率为50%左右，我国各地自然人群中的Hp感染率(成人)均在50%以上。西医采用以抗生素为主的三联、四联疗法治疗Hp感染，但随着抗生素的使用，临床上观察到耐药菌株也越来越多。中医药治疗疾病有其独到之处，在注重局部病变的同时，更注重整体的调节，加上中药组方变化大，可供选择的药物多，其优势逐渐被人们认同。本研究考察了3种传统中药对Hp的体外抗菌作用。选用棋盘法测定其单独及联合药敏实验时各药物的最低抑菌浓度(MinimalInhibitoryConcentration,MIC)，以部分抑菌浓度(FractionalInhibitoryConcentration,FIC)指数评价药物的体外联合抗菌效应，为研制抗Hp新的中药组方提供实验依据。1材料1.1Hp菌株本研究采用的Hp菌株为国际统一的SS1(SydneyStrain1)菌株，经鉴定cagA(+)和VacA(+).由河北医科大学中医学院微生物室提供。1.2培养基［2］固体培养基为改良Skirrow选择性培养基，即在1000ml改良Skirrow琼脂基础中加入抗生素混合液，使终浓度为四环素(TMP)5mg／L，万古霉素10mg／L，多粘菌素B2500U／L，并加入50ml脱纤维冻融兔血。改良Skirrow琼脂基础和布氏肉汤均为北京陆桥技术有限责任公司产品。2方法2.1实验药液制备称取黄连、乌梅、蜂胶3种中药，按重量比加10倍的蒸馏水浸泡30min后，用文火煎熬30min，倒出煎液，药渣再加等量蒸馏水煎熬30min，2次煎液合并，3500r／min离心15min，倒出上清液，蒸发浓缩成含生药量1g／mL浓度的药液。以最少量的二甲基亚砜溶剂溶解后，使其母液浓度分别为100mg/mL、50mg/mL、50mg/mL.2.2菌液的制备将培养3d的Hp菌株用无菌生理盐水洗下后，配成布氏肉汤菌悬液，再用标准比浊管比浊，校正菌液浓度，使其菌液浓度相当于1×10...