泌尿生殖道沙眼衣原体感染者血清抗衣原体免疫优势蛋白抗体检出率【摘要】目的：对泌尿生殖道沙眼衣原体感染者血清抗衣原体免疫优势蛋白抗体的检测展开研究分析。方法：随机选取接受治疗的50名泌尿生殖道沙眼衣原体感染患者、50名泌尿生殖无沙眼衣原体感染患者，对临床数据进行统计学分析，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对两组病例血清中抗外膜蛋白复合物B蛋白c端肽（OmcBc）、抗衣原体质粒编码蛋白3（Pgp3）、抗热休克蛋白60（HSP60）以及抗ct841编码蛋白（CT841）等抗体蛋白进行检测。结果：经GSTMagbeads纯化处理后的GST-OmcBc、GST-Pgp3、GST-HSP60、GST-CT841以及空质粒表达的GST蛋白于SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝染色，均呈现清晰目的条带。感染组血清中检出Pgp3抗体36例（72.0%），检出OmcBc抗体23例（46.0%），检出CT841抗体19（38.0%），检出HSP60抗体12例（24.0%）；未感染组血清中仅检出HSP60抗体3例（6.0%）；两组检测结果对比，数据差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：泌尿生殖道沙眼衣原体感染者血清抗衣原体免疫优势蛋白抗体检测，抗衣原体质粒编码蛋白3是抗原性较强、检出率较高的衣原体蛋白之一，抗热休克蛋白60是抗原性较弱、检出率较低的衣原体蛋白之一。【关键词】泌尿生殖道沙眼衣原体感染；衣原体；蛋白抗体【】R714.2【文献标志码】A现阶段，沙眼衣原体（Chlamydiatrachomatis，Ct）引发的泌尿生殖系感染已成为全球范围内主要的性传播疾病之一，相关医学研究结果指出，沙眼衣原体的感染率已经超过淋球菌成为性传播发病率最高的疾病，由沙眼衣原体所产生的并发症包括不孕不育、死胎、尿道炎、盆腔炎等，此类并发症临床症状错综复杂，迁延难愈。临床治疗期间，约10%～15%的患者存在持续感染、再感染情况，衣原体在不利生长的情况下，躲避宿主的防御免疫系统所衍生的一类可逆行为[1]。沙眼衣原体的高危性、流行性已引起了世界范围内医学专家的广泛关注，针对沙眼衣原体展开了众多的研究工作[2]。本次研究随机选取接收的50名泌尿生殖道沙眼衣原体感染患者、50名泌尿生殖道沙眼衣原体未感染患者，通过对其临床资料进行综合分析，初步了解泌尿生殖道沙眼衣原体感染者血清抗衣原体免疫优势蛋白抗体的检测情况，旨在为临床检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染者血清抗衣原体蛋白抗体抗原性、免疫优势提供有利依据，现内容如下。1资料与方法1.1临床资料采用随机数表法随机选取2011年9月至2013年9月接收治疗的50名泌尿生殖道沙眼衣原体感染患者及50名泌尿生殖无沙眼衣原体感染者，分别为感染组与未感染组。感染组中，男性27例，女性23例；年龄范围21～56岁，平均年龄（26.9±5.1）岁；收集阳性血清50份。未感染组，男性26例，女性24例；年龄范围20～55岁，平均年龄（27.1±4.9）岁；收集阴性血清50份。两组患者年龄、性别等资料对比差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。纳入标准：（1）资料沙眼衣原体感染情况均经实验室检验证实。（2）已签署知情书并自愿参加本项研究者。排除标准：（1）不符合上述纳入标准者。（2）合并多种急慢性疾病或免疫系统疾病者。（3）严重精神疾病患者。1.2方法将重组质粒转化大肠杆菌感受态BL-21细菌，经氨苄西林平板对阳性菌落进行筛选，并选取培养单菌落增殖，对新鲜菌液进行测序。选取4种有效鉴定转化的单克隆菌落置入含60g/L氨苄西林的LB液体培养基中，开展扩大培养至对数生长期操作，注入1mol/L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG），经2h诱导表达后，对其菌液进行离心收集，完毕后于含有蛋白酶抑制剂的细胞裂解液中重悬，收集经离心后上清。应用GSTMagbeads（选自于美国GenScript公司）对收集上清纯化开展SDS-PAGE电泳，鉴定蛋白表达。以1：4比例混合融合蛋白裂解液与磷酸盐缓冲液，应用谷胱甘肽预包被的ELISA96孔酶标板（选自于美国Pierce公司），200μL/孔，4℃条件下过夜。阴性对照选取pGEX-6p-2空质粒表达的GST包被酶标板，每个酶标版均设两个阳性对照孔，对OmcBc及Pgp3蛋白进行包被，并将其单克隆抗体视作一抗。以1∶50∶250的比例将收集的100份血清分别与空质粒诱导表达的蛋白裂解液、1%牛血清白蛋白（BSA）于常温条件下进行2h混...