运动对心肌细胞中凋亡调控基因的影响张钧1，2，许豪文3（1.扬州大学体育学院江苏扬州225002；2.华东师范大学上海200062）摘要：目的：研究运动对心肌细胞中调控基因Bcl-2、Bax和p53的影响以探讨凋亡调控基因对运动引起心肌细胞凋亡的作用。方法：以大鼠中等运动强度训练、一次性力竭运动和过度训练为运动模型，采用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）技术观察了大鼠心肌细胞中调控基因Bcl-2、Bax和p53mRNA的表达。结果：长期中等强度的运动可造成大鼠心肌细胞中凋亡调控基因Bcl-2mRNA表达明显增加，可抑制心肌细胞凋亡；而力竭运动和过度训练可引起心肌细胞中Bcl-2mRNA表达下降和调控基因Bax、p53mRNA表达显著升高以及凋亡调控基因Bcl-2/Bax比值显著下降，可促进心肌细胞凋亡。结论：心肌细胞中凋亡调控基因Bcl-2、Bax和p53在不同运动后的不同表达对心肌细胞凋亡的发生有明显的调控作用。关键词：运动；心肌；凋亡调控基因；EffectsofexerciseonapoptoticgeneinmyocardiumZHANGJun,etal.(YangzhouUniversity,Yangzhou,225002,China)Abstract:Objective:ToprobeeffectsofexerciseonapoptoticgeneBcl-2,Bax,p53inmyocardiumtostudytheregulatingmechanismofapoptoticgeneBcl-2,Bax,p53tomyocardialapoptosisbyexercise.Method:Usingthemodelofmoderateintensityswimming,onceexhaustiveexerciseandoverloadtraining,thepresentstudyresearchesintotheexpressionofdifferentexercisemodelonapoptoticgeneinmyocardiumbyRT-PCR.Results:ExpressionofapoptoticgeneBcl-2mRNAhasincreasedafterthemoderateintensityexercise.Itcaninhibitmyocardialapoptosis.ExpressionofapoptoticgeneBcl-2mRNAhasdecreased,expressionofapoptoticgeneBaxandp53mRNAhaveincreased,buttheradioofBcl-2/Baxhasdecreasedsignificantlyafteroverloadtrainingandonceexhaustiveexercise.Itcancausemyocardialapoptosis.Conclusion:DifferentexpressionofapoptoticgeneBcl-2,Bax,p53mRNAinmyocardialafterdifferentexercisehassignificantregulatedtomyocardialapoptosis.Keywords:exercise;myocardium;apoptoticgene;细胞凋亡是一种由基因控制的细胞自我消亡过程。调控细胞凋亡的基因从功能上分为诱导细胞凋亡的基因和抑制细胞凋亡的基因。其中Bcl-2家族成员在细胞凋亡过程中起着至关重要的作用[1]。p53基因作为“基因组的卫士”能通过加强促凋亡基因的转录，阻断抑制凋亡基因的转录而使细胞凋亡[2]。过度运动可造成心肌细胞凋亡的事实已得到证实[3]，而有关运动对心肌细胞中凋亡调控基因Bcl-2、Bax和p53的影响，国内外尚没有较全面的报道。本实验试图研究运动对心肌细胞中凋亡调控基因Bcl-2、Bax和p53的影响，以探讨凋亡调控基因对运动引起心肌细胞凋亡的作用。为进一步研究运动性疲劳的机制提供理论依据。1材料与方法1.1实验动物：选用雄性SD大鼠100只，由上海医科大学实验动物中心提供，体重100~130g，常规分笼喂养，自然光照，饲养环境温度23±4℃，自由饮水进食。1.2分组和训练方案：大鼠购进后，先适应性喂养2天，称重后，随机分为4组：（1）对照组（C）20只，常规饲养，不加干预。（2）中等强度训练组（MS）20只，进行中等强度游泳训练。游泳池为100cm×70cm×60cm长方体，水深50cm，水温33±1℃。大鼠每周训练6天，每天游泳训练1次，第一天下水游泳10min，以后逐日增加，第1周末时每天游泳30min，第2周末时每天游泳60min。此后维持这一运动量直至游满8周。（3）力竭运动组（ES）20只，常规饲养，满8周后，让大鼠做一次性力竭运动，力竭判断标准按Thomas报道文献[4]。（4）过度训练组（O）40只，参见朱全的方法建立大鼠过度训练模型[5]。1.3PCR引物设计Bcl-2、Bax、P53根据已发表的文献设计，引物1、引物2均于外显子2，由中国科学院上海生物化学研究所合成并由中国科学院上海生理所黄诚博士惠赠。1.4实验方法1.4.1样本采集各组大鼠断头处死后，迅速取出心脏洗尽残血，取心室肌。对照组也以同样方法收集标本。1.4.2大鼠心肌组织中Bcl-2、Bax、p53基因mRNA的测定1.4.2.1大鼠心肌组织样品总RNA的制备总RNA抽...