神经干细胞移植治疗血管性痴呆大鼠的实验研究

神经干细胞移植治疗血管性痴呆大鼠的实验研究[摘要]目的研究神经干细胞移植治疗血管性痴呆大鼠的临床效果。方法选择年龄在12个月左右的60只健康成年Wistar大鼠作为该次实验对象,实验时间为2015年5―10月,大鼠的体重均在300~400g左右,用于制备血管性痴呆2VO模型,将大鼠随机分成3组,分别为假手术组、对照组及NSCs组,在移植前后对3组大鼠实施Morris水迷测试。结果移植后5周、10周时,NSCs组大鼠逃避潜伏期(36.85±7.14)、(40.26±8.11)相对于对照组(52.11±6.57)、(54.10±7.16)有了显著的减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论针对VaD大鼠模型采用神经干细胞移植的效果显著,能有效改善大鼠学习记忆能力。[关键词]神经干细胞移植;血管性痴呆;实验研究[]R749.13[文献标识码]A[]1674-0742(2016)04(a)-0056-02[Abstract]ObjectiveToresearchtheclinicaleffectofneuralstemcellstransplantationintreatmentofratswithvasculardementia.Methods60healthyadultWistarratswhoseweightwerebetween300~400gandwhoseageswereabout12monthswereselectedastheexperimentalobject,andtheexperimentaltimewasfromMay2015toOctober2015,andtheywereusedtopreparevasculardementia2VOmodelsandrandomlydividedintothesham-operatedgroup,controlgroupandNSCsgroup,andthethreegroupsweretestedbyMorriswatermazetaskbeforeandaftertransplantation.ResultsTheescapelatentperiodsofratsintheNSCsgroupobviouslydecreasedatthe5weeksand10weeksaftertransplantationcomparedwiththoseinthecontrolgroupwithstatisticalsignificance[(36.85±7.14),(40.26±8.11)vs(52.11±6.57),(54.10±7.16)](P<0.05).ConclusionTheeffectofneuralstemcellstransplantationforVaDratmodelsisprominent,whichcaneffectivelyimprovethelearningandmemoryabilitiesofrats.[Keywords]Neuralstemcellstransplantation;Vasculardementia;Experimentalresearch血管性痴呆是指由出血性卒中、缺血性卒中及造成认知、行为及记忆等脑区低灌注的脑血管疾病所致的严重认知功能障碍综合征,主要发生原因与脑缺氧、出血性病变、感染因素、家族史及其他因素有关,临床症状主要表现为焦虑、眼花、猜疑、认知功能障碍及易激惹等,严重影响患者的生活质量,增加患者家庭的经济及精神负担,若不及时治疗,将会导致抑郁症、自主神经功能紊乱及肺部感染尿路感染等疾病出现。1资料与方法1.1一般资料选择年龄在12个月左右的60只健康成年Wistar大鼠作为该实验对象,实验时间为2015年5―10月,大鼠的体重均在300~400g左右,用于制备血管性痴呆2VO模型,将大鼠随机分成3组,分别为假手术组、对照组及神经干细胞移植组,每组各20只,假手术组大鼠月龄为10~15个月,平均月龄为(12.50±1.31)个月,体重300~450g,平均体重为(385.12±25.64)g;对照组大鼠月龄为10~14个月,平均月龄为(12.38±1.29)个月,体重300~420g,平均体重为(385.10±25.38)g;神经干细胞移植组大鼠月龄为10~13个月,平均月龄为(12.23±1.28)个月,体重300~410g,平均体重为(383.10±25.10)g。对比3组大鼠临床资料发现,差异无统计学意义(P>0.05),组间具有可比性。1.2方法对照组20只在模型建立成功后一个月海马立体定位注射10uL生理盐水。NSCs组在VaD模型造模成功后1个月海马立体定位注射10uLNSCs液。进行原代培养Wistar大鼠神经干细胞球,传代至第6代后,将慢病毒介导GFP转染后移植备用。给予10%水合氯醛进行麻醉,剔除颈部毛发,将颈部皮肤充分暴露,常规消毒,于胸骨上方正中处作一2cm左右的切口,将皮下组织、肌肉钝性分离,充分暴露神经、血管,将迷走神经及颈总动脉采用玻钩进行分离,于颈总动脉上1/3处用手术线在近心端与远心端结扎,阻断血流,离断颈总动脉,在结扎另一侧颈总动脉,撒上头孢唑林钠粉,避免感染现象,最后缝合伤口,注射头孢唑林钠。假手术组采用常规麻醉后,切开皮肤,将双侧颈总动脉暴露出来,无需结扎血管,海马立体定位注射10ul生理盐水。假手术组手术方式与NSCs组一致,但注意其...

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