_聚赖氨酸产生菌的筛选方法改进

_聚赖氨酸产生菌的筛选方法改进第29卷第2期2022年3月食品与生物技术学报JournalofFoodScienceandBiotechnologyVol.29No.2Mar.2022:167321689(2022)022*******收稿日期:2022204201基金项目:国家863计划项目(2006AA020301)。3通信作者:毛忠贵(1954-),男,江苏溧水人,教授,博士生导师,主要从事清洁生产、功能性物质开发及纤维资源高值转化方面的研究。Email:maozg@s://wwsodocs/doc/aa8947116。。ε2聚赖氨酸产生菌的筛选方法改进李树1,2,陈旭升1,2,廖莉娟1,2,张建华1,2,毛忠贵31,2(1.江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122;2.江南大学生物工程学院,江苏无锡214122)摘要:改进了ε2聚赖氨酸(ε2PL)产生菌的筛选方法。在加有复合抑制剂的初筛平板上涂布土壤悬液,于30℃培养7d后,将琼脂整体揭下,平铺到另一加有美兰的琼脂上。挑取形成透明圈的137株菌进行摇瓶发酵,发酵液与Dragendorff试剂和甲基橙反应,有50株呈阳性。通过薄板层析,确定有42株菌的产物含有赖氨酸聚合物。通过水杨醛保护氨基的化学法对产物进行了酰胺键连接方式的研究,确定了聚赖氨酸是由ε2NH2和α2COOH形成的ε2酰氨键聚合而成。通过生理生化特征和分子生物学鉴定,表明其中的一株---本文来源于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---菌为链霉菌属中的稠李链霉菌Streptomycespade2nus,其初始菌的摇瓶产量可达018g/L。关键词:ε2聚赖氨酸;筛选;菌种鉴定;16srDNA:TQ920.1文献标识码:AAProtocolforScreeningofε2PolylysineProducingStrainsLIShu1,2,CHENXu2sheng1,2,LIAOLi2juan1,2,ZHANG激an2hua1,2,MAOZhong2gui31,2(1.KeyLaboratoryofIndustrialBiotechnology,MinistryofEducation,激angnanUniversity,Wuxi214122,China;2.SchoolofBiotechnology,激angnanUniversity,Wuxi214122,China)Abstract:Anovelε2polylysineproducestrainscreenprotocolwasdevelopedinthisstudybasedonthechemicalcharacteristicsofε2polylysine.Throughthisthree2stepsprotocol,42strainshasbeenidentifiedaslysinepolymerproducer,thenthosepolymerstructurewereanalysizedbychemicalmethod,bywhichconfirmsthatthepolymerislinkedbyε2NH2andα2COOH.Amongofthem,onestrain,0.8g/Lε2polylysinewasfoundinfermentationbroth,wasidentifiedasStreptomycespadanusbythecombinationresultsofphysiologicalandbiochemicalcharacteristics,and16srDNAsequence.Keywords:ε2polylysine,screening,strainidentification,16srDNAε2聚赖氨酸(ε2PL)是一种水溶性强、抑菌谱广、可以食用并且对人体无任何毒副作用的新型生物防---本文来源于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---腐剂,它由单一的L2赖氨酸通过α2COOH和ε2NH2形成的ε型酰氨键聚合而成,在人体内可分解第29卷第2期2022年3月食品与生物技术学报JournalofFoodScienceandBiotechnologyVol.29No.2Mar.2022:167321689(2022)022*******收稿日期:2022204201基金项目:国家863计划项目(2006AA020301)。3通信作者:毛忠贵(1954-),男,江苏溧水人,教授,博士生导师,主要从事清洁生产、功能性物质开发及纤维资源高值转化方面的研究。Email:maozg@s://wwsodocs/doc/aa8947116。。ε2聚赖氨酸产生菌的筛选方法改进李树1,2,陈旭升1,2,廖莉娟1,2,张建华1,2,毛忠贵31,2(1.江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122;2.江南大学生物工程学院,江苏无锡214122)摘要:改进了ε2聚赖氨酸(ε2PL)产生菌的筛选方法。在加有复合抑制剂的初筛平板上涂布土壤悬液,于30℃培养7d后,将琼脂整体揭下,平铺到另一加有美兰的琼脂上。挑取形成透明圈的137株菌进行摇瓶发酵,发酵液与Dragendorff试剂和甲基橙反应,有50株呈阳性。通过薄板层析,确定有42株菌的产物含有赖氨酸聚合物。通过水杨醛保护氨基的化学法对产物进行了酰胺键连接方式的研究,确定了聚赖氨酸是由ε2NH2和α2COOH形成的ε2酰氨键聚合而成。通过生理生化特征和分子生物学鉴定,表明其中的一株菌为链霉菌属中的稠李链霉菌Streptomycespade2nus,其初始菌的摇瓶产量可达018g/L。关键词:...

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