山东省生鲜牛乳中金黄色葡萄球菌的污染状况及耐药性分析赵效南苑晓萌张印胡明王文博刘玉庆摘要：本研究于2015—2016年从山东省主要乳制品生产城市的生鲜乳罐装车中采集412份生鲜牛乳样品，对其进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定，并采用微量肉汤稀释法对金黄色葡萄球菌进行药物敏感性试验。结果表明，从412份生鲜牛乳中共分离到148株金黄色葡萄球菌，分离率为35.8%;金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药率最高，为77.7%，其次为红霉素，耐药率为58.1%，对万古霉素和阿莫西林/克拉维酸的耐药率较低，分别为0.7%和1.4%，所有菌株對利奈唑胺表现为敏感。本研究结果可为山东地区生鲜牛乳中金黄色葡萄球菌的监测与防控，以及养殖场中抗生素的规范使用提供参考。关键词：金黄色葡萄球菌;生鲜牛乳;污染状况;耐药性：S432.4+2文献标识号：A：1001-4942（2019）12-0096-04AbstractInthestudy，fourhundredandtwelvefreshmilksampleswerecollectedfromthefreshmilkcanningtrucksinthemaindairyproductioncitiesofShandongProvinceduring2015-2016.TheS.aureuswasisolated，identifiedandconductedantibioticsensitivitytestsbymicro-brothdilutionmethod.Theresultsshowedthat148strainsofS.aureuswereisolatedwiththeisolatedrateas35.8%.S.aureushadthehighestresistanceratetopenicillinas77.7%，followedbyerythromycinwiththeresistancerateas58.1%，buthadlowerresistanceratestovancomycinandamoxicillin/clavulanicacidshowingas0.7%and1.4%，respectively.Allstrainsweresensitivetolinezolid.TheresultscouldprovidereferencesforthemonitoringandpreventionofS.aureusinfreshmilk，andregulatetheuseofantibioticsinfarmsofShandongProvince.KeywordsStaphylococcusaureus;Freshmilk;ContaminationStatus;Antimicrobialresistance金黄色葡萄球菌是一种条件性致病菌，常存在于环境以及人和动物的皮肤和粘膜中[1]，可导致多种感染，包括关节炎、尿路感染、乳腺炎和亚临床乳腺炎等，还可引起人体浅表皮肤感染甚至引发严重致命的侵入性疾病[2]，通常由生鲜牛乳和乳制品加工厂中分离得到[3]。奶牛乳房炎在奶牛养殖业中发生最为普遍，被认为是世界上最昂贵的奶牛疾病之一，通常由微生物引起，而金黄色葡萄球菌是该病最主要的致病菌[4]。患有乳房炎的奶牛通常会将大量细菌带入牛奶供应链中，被污染的牛奶可能含有能够引起食物中毒的致病菌株，从而对公共安全造成危害[5]。目前，抗生素是治疗金黄色葡萄球菌的主要药物，但随着大量使用，耐药菌株不断出现，甚至出现“超级细菌”[6]。近几年，有关生鲜牛乳中金黄色葡萄球菌的耐药性研究相对缺乏。因此，本研究从生鲜牛乳中进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定并对该细菌的耐药性进行分析，旨在为我国奶牛乳房炎治疗选择合适抗生素，同时为动物性食品安全和人类公共健康提供合理的检测数据。1材料与方法1.1样品采集2015—2016年，分别从山东省主要乳制品生产城市的生鲜乳罐装车中采集412份生鲜牛乳样品，其中济南市130份、潍坊市114份、日照市14份、泰安市62份、德州市32份、临沂市60份。每辆运输车取样1次，取样前需搅拌生鲜牛乳，将所取样品置于冰盒中，立即带回实验室进行细菌学分析。1.2金黄色葡萄球菌的分离与鉴定分别对412份生鲜牛乳样品进行倍比稀释，再涂布到Baird-Parker琼脂培养基上，35℃需氧培养24～48h。对于每个样本，取4个具有典型金黄色葡萄球菌外观特征（黑色外观并被透明圈包围）的菌落进行纯化，再通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行确定，并用甘油保存于-20℃。1.3药敏试验采用美国临床和实验室标准协会（ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute，CLSI）推荐的微量肉汤稀释法，对试验分离鉴定的金黄色葡萄球菌进行18种抗菌药物最小抑菌浓度的测定。抗菌药物包括：青霉素、阿莫西林/克拉维酸、红霉素、克林霉素、恩诺沙星、氧氟沙星、头孢噻呋、头孢西丁、磺胺异恶唑、苯唑西林、万古霉素、复方新诺明、多西环素、氟苯尼考、泰妙菌素、替米考星、庆大霉素、利奈唑胺。以大肠埃希菌ATCC25922作为药敏试验质控菌株，结果判定及质量...