大鼠脑缺血模型2-甲氧基雌二醇对全脑缺血大鼠HIF-1α及RTP801的作用研究撰写时间：202X年XX月XX日摘要目的探讨2-甲氧基雌二醇（2ME2）对全脑缺血大鼠HIF-1α及凋亡相关基因RTP801的作用。方法将成年雄性SD大鼠104只随机分为对照组（n=8）、全脑缺血组（n=48）和全脑缺血2-甲氧基雌二醇干预组（n=48），后两组按再灌注时间不同各分为6个亚组。采用改良的Pulsineli4-VO方法行全脑缺血大鼠模型制作。Nissl染色进行海马神经元计数，免疫组化及RT-PCR技术进行HIF-1α及RTP801mRNA表达检测。结果全脑缺血2ME2干预组与全脑缺血组相应时间点亚组相比，神经细胞计数明显增加，HIF-1α表达减少，RTP801mRNA表达减低（P＜0.05）。结论在全脑缺血急性期，2ME2抑制HIF-1α及凋亡相关基因RTP801表达，具有一定的神经保护作用。关键词RTP801；全脑缺血；缺氧诱导因子-1；2-甲氧基雌二醇中图分类号R743.31文献标识码B文章编号1673-9701（2021）01-6-03Effectsof2ME2onhypoxia-induciblefactor1αandapoptosis-relatedgeneRTP801inhippocampusfollowingtheglobalcerebralischemiainratsPENGJinghua1ZHANGHongri2HUANGLina1LIYun31.DepartmentofNeurology,theFirstAffiliatedHospitaltoHenanUniversityofScienceandTechnology,Luoyang4713,China;2.DepartmentofNeurosurgery,theFirstAffiliatedHospitaltoHenanUniversityofScienceandTechnology,Luoyang4713,China;3.DepartmentofEmergency,JinanCentralHospitalAffiliatedtoShandongUniversity,Jinan2513,ChinaAbstractObjectiveToinvestigatetheeffectof2ME2onthehypoxia-induciblefactor1αandapoptosis-relatedgeneRTP801inhippocampusfollowingtheglobalcerebralischemiainrats.MethodsOnehundredandfouradultmaleSprague-Dawleyratswererandomlydividedinto3groups:shamgroup(n=8),globalcerebralischemiagroup(n=48)andglobalcerebralischemia+2ME2treatmentgroup(n=48),andtheratsofGIgroupandGI+2ME2groupweresacrificedafterperfusion.The4vesselocclusion(4-VO)globalischemiaratmodelwasproduced.Nisslstainingwasusedtoperformquantitativeanalysisofcellnumbers.ImmunohistochemistrystainingandRT-PCRprovidedtheinformationofthedistributionofpositivecellstoHIF-1αproteinandtheexpressionofRTP801mRNA.ResultsThenumberofcellsfromGI+2ME2groupwassignificantlyhigherthanthatfromGIgroup(P＜0.05).2ME2significantlysuppressedthelevelsofHIF-1α(P＜0.05).Theexpressionofapoptosis-relatedgeneRTP801decreasedsignificantly(P＜0.05).Conclusion2ME2hasbrainprotectiveeffectonglobalcerebralischemiainrats.2ME2inhibitstheelevationofhypoxia-induciblefactor1α,whichinhibitstheelevationofapoptosis-relatedgeneRTP801.KeywordsRTP801;Globalcerebralischemia;Hypoxia-induciblefactor1;2-methoxyestradiol缺氧诱导因子-1（hypoxiainduciblefactor-1，HIF-1）是能在低氧状态下被激活的核转录因子，国内外已有许多的研究表明在轻度脑缺血时缺氧诱导因子-1表达增加具有保护作用，但是，有研究表明，在严重缺血缺氧时，大量HIF-1的表达表现为损伤性作用1，2。全脑缺血可发生于心跳骤停、休克、颅脑外伤、外科手术中的低压等情况。目前，在全脑缺血缺氧过程中，关于缺氧诱导因子-1在神经细胞的凋亡中的作用及机制尚不明确，国内外相关报道较少。本实验应用HIF-1的抑制剂2-甲氧基雌二醇（2-methoxyestradiol，2ME2）作用于全脑缺血大鼠模型，探讨2ME2对全脑缺血大鼠HIF-1α及凋亡相关基因RTP801的作用。1材料与方法1.1动物及分组健康雄性成年Sprague-Dawley大鼠104只，体重（320±21）g（购于上海实验动物中心），随机分为假手术组（Sham）、全脑缺血组（GI）及全脑缺血2-甲氧基雌二醇干预组（GI+2ME2）3组，其中全脑缺血组及全脑缺血2-甲氧基雌二醇干预组按再灌注时间的不同，分为6h、12h、24h、48h、72h、7d6个亚组，假手术组和各亚组均为8只大鼠。1.2模型制作及组织获取全脑缺血大鼠模型制作采用改良的Pulsineli4血管闭塞...