参黄冲剂对衰老患者P16基因mRNA表达及临床疗效的影响韩旭李七一郭宏敏赖仁胜艾炳蔚苑志军孙云霞张彪尤峰屠浩明江苏省中医院（中国210029）：R22.34文献标识码：A：1818・0086（2012）01摘要：目的应用基因测序技术，通过观察参黄冲剂对衰老患者P16基因mRNA定量表达等相关内环境指标影响与个体反应差异的相关性，评价参黄冲剂在延缓衰老方面的作用和临床疗效。方法采用随机、单盲、对照研究方法，共选择60例符合条件的衰老患者纳入研究及统计分析。所有患者被随机分为参黄冲剂治疗组和对照治疗组，每组30人。参黄冲剂组进行常规治疗基础上加用参黄冲剂治疗（江苏省中医院协定处方）,每次10g,每日3次。对照组进行常规系统治疗，并给予甲磺酸双氢麦角毒碱片，每次1mg,每日3次。各组均连续服药8周为1个疗程，观察时间为1个疗程。结果衰老患者肾阴虚、肾阳虚2种证型P16基因的序列特征未见突变改变。参黄冲剂组治疗后衰老患者P16基因mRNA扩增曲线起始循环数（ct值）明显变大（p<0.05）,对照组治疗后衰老患者P16基因mRNA扩増曲线起始循环数（ct值）无明显差异（p>0.05）;参黄冲剂组治疗后肾阴虚、肾阳虚两种证型P16基因mRNA扩增曲线起始循环数（ct值）未见明显差异（p>0.05\参黄冲剂组与对照组在治疗前的衰老患者P16基因mRNA定量表达无统计学意义（p>0.05）,二者之间具有可比性；在治疗后两组比较具有统计学意义（p<0.05）o两组治疗后衰老患者临床疗效比较，参黄冲剂组30例，显效3例，有效21例，无效6例，总有效率80.0%;对照组30例，显效1例，有效12例，无效17例，总有效率43.3%;经统计学处理，两组间有效率有统计学意义（p<0.01）o结论参黄冲剂治疗老年肾虚患者，可有效改善临床衰老的临床症状，提高日常生活能力；而且参黄冲剂可减少P16基因mRNA的表达，其机制可能是通过抑制衰老细胞的增殖而达到延缓衰老的作用，从而起到抗衰老的作用，但衰老主要证型肾阴虚、肾阳虚P16基因的序列特征未见突变改变，为进一步诠释中医辨证施治衰老的机制提供了分子生物学的依据。关键词：P16基因；mRNA定量表达；遗传；参黄冲剂；衰老；辨证论治随着我国人口老龄化的加快，积极寻找延缓衰老并防治衰老相关疾病的有效手段尤为重要。本研究在以往课题研究基础上，以中医理论为指导，采用遗传药理学方法研究衰老主要证型肾阴虚、肾阳虚之间的遗传差异，通过P16基因测序和其信使核糖核酸（mRNA）表达来分析衰老主要证型肾阴虚、肾阳虚的基因序列特征，并用参黄冲剂为代表的制剂进行中药治疗干预，探寻机体对中药干预产生的个体反应差异和P16基因mRNA表达等相关内环境指标的相关性，并对参黄冲剂延缓衰老的作用和临床综合疗效进行客观评价，为进一步诠释中医辨证施治衰老的机制提供分子生物学的依据。现将结果报道如下：1一般资料本研究60例受试者均于江苏省中医院老年科门诊和病房，男女不限，年龄为60-80周岁，无明显心、脑、肺、肝、肾及内分泌等器质性疾病；采用随机、单盲、对照研究方法进入参黄---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---x100%冲剂治疗组、对照组，每组各30例。1.1两组性别对比参黄冲剂治疗组男、女性分别为24人、6人；对照组男、女性分别为26人、4人；两组年龄分布没有显著性差异（p>0.05）b1.2两组年龄对比参黄冲剂治疗组年龄最高80岁，最低62岁；对照组年龄最高78岁，最低60岁；两组年龄分布没有显著性差异（p>0.05\1.3两组证型对比参黄冲剂治疗组肾阴虚型14例，肾阳虚型16例；对照组肾阴虚型12例，肾阳虚型18例；两组证型分布没有显著性差异（p>0.05b两组在性别、年龄、证型分布上皆具有可比性。2诊断标准和症状量化分级标准2.1衰老的辨证诊断标准：参照“中医虚证参考标准”⑴制定，分为肾阳虚证、肾阴虚证2个证型。肾阳虚证：腰膝酸软、性欲减退、畏寒肢冷、夜尿频多、下肢浮肿、腰膝酸软、精神萎靡、动则气短，舌质淡，脉弱。肾阴虚证：头目眩晕、视力模糊、耳鸣或耳聋、腰膝酸软、身疲乏力、烦热汗岀、咽干便燥、脱发或发白、失眠健忘、性功能减退、尿后余沥或不禁，齿摇或齿落、肤燥身痒、常易外感、震颤肢麻，舌质红，脉细。2.2衰...