鸡血藤醇提物及其活性成分儿茶素抗辐射作用及机制研究

鸡血藤醇提物及其活性成分儿茶素抗辐射作用及机制研究谭潇董宪喆郭代红王石李牧函赵润清刘屏[摘要]研究雞血藤乙醇提取物及其活性成分儿茶素的抗辐射作用,并探讨初步作用机制。采用6Gy60Coγ射线一次性全身照射ICR小鼠造成亚急性辐射损伤模型,随机分为正常组、模型组、阳性对照组(氨磷汀,436mg·kg-1,iv)、鸡血藤组(生药10,20,40g·kg-1)、儿茶素组(50,100,200mg·kg-1),连续ig给药28d,每日1次。检测给药前1d及给药1,3,7,14,21,28d后小鼠外周血WBC,RBC,PLT计数和HGB含量;观察给药7d后小鼠胸腺及脾脏指数的变化;比色法测定给药7d血清SOD,GSHPx活性和MDA水平;采用半固体培养基测定给药7d后骨髓造血祖细胞集落形成能力;HE染色观察给药7,14d股骨骨髓病理学改变;流式细胞术检测给药7d后骨髓细胞的凋亡,Westernblot测定骨髓细胞中cleavedcaspase3和Bcl2的表达,免疫组化法检测股骨骨髓中Bax的表达。结果表明,鸡血藤醇提物和儿茶素均可促进辐射小鼠外周血象的恢复,增加免疫器官胸腺和造血器官脾脏的脏器指数,提高血清抗氧化酶SOD和GSHPx活性、降低MDA水平,促进骨髓造血祖细胞的增殖分化;增加骨髓腔内细胞数量、减轻立体支架结构损伤,改善造血微环境;抑制骨髓细胞凋亡,使凋亡相关蛋白Bcl2的表达显著上调,cleavedcaspase3和Bax的表达显著下调。鸡血藤醇提物和儿茶素对亚急性辐射损伤小鼠有明显的保护作用,其机制与促造血、抗氧化、抗凋亡作用有关。[关键词]鸡血藤;儿茶素;辐射损伤;外周血象;造血祖细胞;细胞凋亡[Abstract]TostudytheantiradiationeffectandmechanismofethanolextractsfromSpatholobussuberectusanditsactivecomponentcatechin,ICRmicewereexposedto6Gyirradiationandrandomlydividedintonormalgroup,modelgroup,positivecontrolgroup(amifostine,436mg·kg-1,iv30minbeforeirradiation),SSDgroup(10,20,40g·kg-1)andcatechingroup(50,100,200mg·kg-1)Themicewereadministeredtheappropriatedrugsonceadayafterirradiationfor28consecutivedaysBloodsampleswerecollectedfromthetailendandthenumberofperipheralbloodcellswascountedbeforeirradiationandonday1,3,7,14,21and28usingamicrocellcounterChangesofthymusandspleenindexofmiceonday7wereobservedTheserumSOD,GSHPxactivityandMDAlevelweredetectedbythecolorimetricmethodThecolonyformingabilityofbonemarrowhematopoieticprogenitorcellsonday7wasdetectedbysemisolidculturemethodTheHEstainingwasadoptedtoobservethepathologicalchangesTheapoptosisofbonemarrowcellswasdetectedbyflowcytometryTheexpressionofcleavedcaspase3andBaxofbonemarrowcellsweremeasuredseparatelybywesternblottingandimmunohistochemistrymethodSSDandcatechincanbothsignificantlyreverttheirradiatedinduceddeclineinhematologicalparameters(RBC,WBC,PLT,Hb),improvethymusandspleenindex,significantlyenhanceserumSODandGSHPxactivityanddecreasetheMDAlevelTheproliferationanddifferentiationofhematopoieticprogenitorcellsinbonemarrowwerepromoted,theapoptosisofbonemarrowcellswassignificantlyupregulatedandtheexpressionofcleavedcaspase3andBaxwassignificantlyreducedinSSDandcatechingroupSSDandcatechinhavesignificantantiradiationeffectanditsmechanismmayberelatedtohematopoieticpromoting,antioxidantandantiapoptoticeffects[Keywords]Spatholobussuberectus;catechin;irradiationinjury;peripheralblood;hemopoieticprogenitorcell;cellapoptosisdoi:10.4268/cjcmm20160924辐射可直接导致多种DNA损伤,造成基因突变和染色体畸变;又会使机体产生大量内源性自由基,引发脂质过氧化,损伤组织器官[1]。辐射危害累及血液、免疫、消化、生殖等多个系统,甚至会诱发癌症[2]。临床上约70%的恶性肿瘤病人需放射治疗,但放疗后造成的骨髓抑制、造血功能障碍、外周血细胞下降、免疫功能受损等已成为制约其疗效的瓶颈[3...

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