冰灯玉露离体诱变技术摘要：为了获得冰灯玉露新品种，采用冰灯玉露松散型胚性愈伤组织为诱变试材，采用浸泡法和在培养基中加入诱变剂的方法进行离体诱变。通过采用不同浓度EMS和不同处理时间，找到愈伤组织半致死剂量的EMS使用浓度和时间，并在此条件下对冰灯玉露松散型胚性愈伤组织进行离体诱变，获得形态变化的突变体。结果显示，采用在培养基中加入0.1%EMS处理4d可以获得理想的半致死效果。以此条件处理冰灯玉露愈伤组织，通过再生培养可以获得1.5%的形态变异的个体，这些个体的遗传变异情况有待进一步检测。本文采集自网络，本站发布的论文均是优质论文，供学习和研宄使用，文中立场与本网站无关，版权和著作权归原作者所有，如有不愿意被转载的情况，请通知我们删除己转载的信息，如果需耍分享，请保留本段说明。关键词：冰灯玉露；半致死剂量；诱变剂；愈伤组织中图分类号：S682.36文献标识码：AD0I编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2017.07.007StudyoninVitroMutagenesisofHaworthiacooperivarZHOUHaicheng,LIUYanjun,HUANGJunxuan，YANGJinghui，LIJianke,WUChunxia(CollegeofHorticultureandLandscapeArchitecture,TianjinAgriculturalUniversity,Tianjin300384，China)Abstract：InordertoobtainthenewvarietyofHaworthiacooperivar，theembryogeniccallusofHaworthia.cooperivarwasusedasmutagenicmaterial.Themutagenesisinvitrowasexperimentedbyimmersionmethodandthemethodbyaddingmutageninmedium.ByusingdifferentconcentrationofEMSanddifferenttreatmenttime,themedianlethaldosewasfound.TheembryogeniccallusofHaworthiacooperivarwasmutatedinvitrobythismethod，andthemutantofmorphologicalchangewasobtained.Theresultsshowedthattheidealmedianlethaldosecouldbeobtainedbyadding0.1%EMStothemediumandtreatingfor4days.Bythismethod,afterthecallusregenerated,1.5%ofthemorphologicalvariationindividualswereobtained,butthegeneticvariationoftheseindividualsneedtobefurthertested.Keywords：Haworthiacooperivar；medianlethaldose；mutagen；callus冰灯玉露(Haworthiacooperivar)属于百合科十二卷属的多年生肉质草本植物，作为玉露中的极品，冰灯玉露的叶片晶莹剔透，奇特而美丽。近年来，越来越受到多肉花卉爱好者的青睐。虽然一些花卉栽培者收集各种玉露品种，并通过杂交育种手段培育出一批新的品种，但仍然难以满足市场的需求［1-3］。近年来关于体细胞诱变育种的研究报道很多，在许多植物上己经得到了应用［4-8］。冰灯玉露在组培方面虽有少量报道［9-10］，但采用离体诱变技术进行育种的研究很少。本试验以观赏多肉植物-冰灯玉露为试材，采用体外化学诱变方法，对其愈伤组织进行诱变处理，寻找诱变的适宜剂量和诱变方法，为冰灯玉露等多肉植物离体诱变育种研究提供一定的参考。1材料和方法1.1材料本试验中采用的试材冰灯玉露松散型胚性愈伤组织为天津农学院园林植物实验室提供。1.2方法1.2.1诱变材料的准备选取生长正常的冰灯松散型胚性愈伤组织，在超净台中将丼分成直径为0.5on的颗粒。将分割完的愈伤组织转移到含有滤纸与无菌水的培养皿中，放到25"C避光的环境下培养24h,目的是消除其培养中激素对愈??组织的影响。最后，将处理好的愈伤组织从培养室中取出备用。1.2.2采用浸泡法进行愈伤组织的离体诱变处理将EMS用磷酸缓冲液(0.lmol?L-l,pH值7.0)配制成不同浓度的溶液，采用抽滤灭菌的方法进行消毒处理。在超浄台中将灭菌的EMS溶液分别加到100mL无菌培养皿中。将事先准备的愈伤组织加到溶液中，每种浓度分别浸泡1，2,4h，浸泡时间到达后，将愈伤组织从溶液中捞出，用无菌滤纸吸干EMS溶液后将其接种到事先配制好的MS固体培养基上进行培养。对照采用无菌水处理。愈伤组织培养条件为25°C,24h连续光照，光照强度为2000lx。经过20d的培养，对愈伤组织的生长情况进行观察统计。1.2.3采用培养基中添加诱变剂的方法进行化学诱变处理将灭菌后的MS固体培养基在微波炉中融化，在培养基温度低于50°C时分别加入一定量的EMS溶液。EMS用磷酸缓冲液(0.1mo...