不同级别胃粘膜上皮内瘤变组织C0X-2和VEGF同步表达的差异性及临床意义贺庆娟张博赵亚楠(青岛市第八人民医院消化内科山东青岛266001)【摘要】本文通过通过对R粘膜低级别、高级别上皮内瘤变组织及胃癌组织屮COX-2、VEGF表达水平的研究，探讨二者在不同程度胃粘膜病变组织屮同步表达的差异性及相关的临床意义，得出结论:随着H粘膜病变程度的加重，COX-2的表达逐渐增强，而VEGF仅在高级别上皮内瘤变组屮开始呈一定水平的表达，但COX-2与VEGF的表达又成正相关，推测在胃癌的形成过程屮，表达逐步增强的COX-2可能促使了VEGF的表达。【关键词】低级别上皮内瘤变高级别上皮内瘤变COX-2VEGF【中图分类号】R73【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2014)01-0022-02【Abstract】ThepaperThroughtheresearchontheexpressionlevelsofCOX-2andVEGFinthegastriclowgrade,highgradeintraepithelialneoplasiaandgastriccarcinoma,toexploretheirdifferencebetweendifferentprecancerouslesionsandtheirclinicalsignificance,TheConclusion:TheCOX-2expressionweregraduallyincreasedasthegastricmucosallesionsaggravated,whileVEGFonlybegantoshowacertainlevelofexpressioninthehigh-gradeintraepithelialneoplasia.Itissupposedthat,duringtheformationofgastriccancer,theexpressionofCOX-2maypromotetheexpressionofVEGF.【Keywords]LowgradeintraepithelialneoplasiaHighgradeintraepithelialneoplasiaCyclooxygenase-2Vascularendothelialgrowthfactor环氧化酶(COX)是花生四烯酸代谢成前列腺素过程屮的限速酶，有2种构---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---型，结构型环氧化酶-1（C0X-1）和诱导型环諷化酶-2（C0X-2）。已有研究提示，C0X-2与肿瘤的发生发展尤苏是胃癌的发生和发展关系密切［1】。血管内皮生长因子（VEGF）是刺激肿瘤血管、淋巴管生成的主要因子［2】。C0X-2协同VEGF家族在促进内皮细胞迁移和管腔形成，进而诱导肿瘤血管和淋巴管的增殖、生长，增强胃癌的血管浸润与淋巴结转移等方面的研宄越来越详尽［3】，C0X-2与VEGF在肿瘤的发生、发展和侵袭转移过程中的作用一直是肿瘤研究的热点内容。本实验通过检测不同级别胃粘膜上皮瘤变组织中COX-2,VEGF的表达水平，探讨二者在胃癌癌前病变及癌变形成过程中的关系，以期为早期胃癌临床监控提供一些实验室依据。1材料与方法1.1临床资料收集2009年11月一2011年09月因上消化道症状于我院行胃镜检查取病理活检者158例（除外2个月内接受过PPI治疗及服用过NSAIDs者），男78例，女80例,年龄27岁一83岁，平均年龄50.12±11.15岁。所有送检组织均由病理学医师作出明确诊断。1.2主要试剂鼠抗人COX-2单克隆抗体（工作浓度1:200）及兔抗人VEGF多克隆抗体（工作浓度1:100｝均购自SantaCruzBiotechnology,免疫组化SABC试剂盒和DAB显色液均购自北京博奥森生物技术有限公司。1.3方法1.3.1免疫组化SABC法COX-2、VEGF检测步骤如下:⑴切片置于60°C恒温箱烘烤60miru（2）切片脱蜡脱水。⑶3%H202室温孵育10-15min,PBS缓冲液冲洗。⑷高压抗原修复:将切片置于0.01PH6.0左右的枸橼酸盐缓冲液中，置于电炉上加热至沸腾，室温冷却，PBS缓冲液冲洗。（5）滴加A液（封闭用正常山羊血清工作液），室温20min。⑹分别滴加按比例配制的一抗工作液，4"C湿盒中过夜。⑺取出湿盒，室温放置30min。PBS缓冲液冲洗。⑻滴加B液（生物素化二抗工作液），---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---37°C湿盒中孵育30min,PBS缓冲液冲洗。⑼滴加C液（辣根酶标记链霉素卵白素工作液)，37°C湿盒中孵育30min，PBS缓冲液冲洗。(10)DAB显色剂显色。(11)苏木素复染5min,水洗、脱水、透明、封片，显微镜观察。1.3.2诊断标准胃镜病理分型采用2000年WHO的胃粘膜病变诊断名称定义和标准［4］。1.3.3阳性结果判定以PBS替代一抗作阴性对照，用己知C0X-2和VEGF表达阳性的乳腺癌组织切片作为阳性对照。免疫组化染色结果利用H.PLORIIAS-IOOO高清晰度彩色病理图文报告分析系统(武汉千屏影像工程公司)进行...