HCVRNA与抗一HCV在丙型肝炎诊断中的临床意义HCVRNA与抗一HCV在丙型肝炎诊断中的临床意义【摘耍】目的：探讨丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)和HCVRNA定量检测结果对丙型肝炎诊断的临床意义。方法：采用酶联免疫吸附法(ELTSA)和荧光定量PCR分别对122例标本作抗-HCV和HCVRNA检测。结果：122例样本抗-HCV总阳性率为94.3%(115/122),抗-HCV、HCVRNA同时阳性率为65.2%(75/115),抗-HCV阳性,HCVRNA阴性为37.8%(40/115),抗-HCV阴性而HCVRNA阳性率为5.7%(7/122)。结论：在丙肝诊断治疗中同步检测抗-HCV和HCVRNA可更好地了解丙肝病患HCV感染的情况，对临床的诊断和疗效的观察有指导作用。【关键词】丙型肝炎；抗-HCV；HCVRNA；PCRTheclinicalsignificanceofserurmanti-HCVandHCVRNAinthediagnosisofHepatitisCpatient[Abstract]Objective：toinvestigatetheclinicalsignificaneeofserurmanti-HCVandHCVRNAinthediagnosisofHepatitisCpatient.Methods：ELTSAandFlurescentQuantityPCRmethodswereusedtodetect122casesofanti-HCVpositiveorHCVRNApositivesamples・Results：Anti-HCV(+)totalpositiverateis94.3%.Anti-HCV(+)/HCVRNA(+)bothpositiverareis65.2%.onlyAnti-HCV(+)positiverateis37.8%.Anti-HCV(-)/HCVRNA(+)rateis5.7%.Conclusion：combingthemeasureofAnti-HCVandHCVRNAcanincreasetherateofpositiveinpatientC・leadstoforitsdiagnosistreatmeritoffering・[Ketwords]HepatitisC；anti-HCV；HCVRNA；PCR【]R512.6+3【文献标识码】A【11003-8183(2013)11-0241-02丙型肝炎是一种非肠道性感染的传染病，是导致肝硬化和肝癌的主要原因之一，特别是在以往医疗过程中曾引起不少的医疗纠纷，所以应对其作出及早的准确诊断及治疗。抗-HCV和HCVRNA是诊断内型肝炎的重要依据，本文通过我院122例HCV患者进行抗-HCV和HCVRNA的测定，并对其加以研究及分析。1材料与方法1.1标本:广东省惠州市惠阳区人民医院2006年9月一2008年9月门诊和住院的疑似i人j肝患者122例,其中男76例,年龄为3-85岁，平均年龄为44岁；女48例，年龄为6-79岁，平均年龄为42岁。1.2试剂：抗-HCV试剂购于北京万泰生物药业有限公司,HCVRNA试剂购于深圳匹基生物工程股份有限公司。1.3仪器：Lightcyler480全自动荧光定量PCR分析仪，来自罗氏诊断公司；Pastuer酶标分析仪。1.4检验方法1.4.1抗-HCV的检测方法：ELISA法测定抗-HCV,严格按照试剂操作说明书进行，带有室内质控物。1.4.2HCVRNA的检测方法：釆用荧光定量PCR方法测定，过程如下：①标本处理：取样本血浆50ul加入150ul裂解液，混匀再加入50ul氯仿，混匀器上振荡5秒；4°C1300rpm离心15min；吸取上层液相移入相应管中加入100ul异内醇，颠倒混匀；4°C1300rpm离心15min,轻轻倒去上清，倒置于吸水纸上沾干余液，加入300ml75%乙醇，颠倒混匀；4°C1300rpm离心15min,轻轻倒去上清，倒置于吸水纸上沾干余液,400rpm离心10秒种，用微量加样器吸干残余液体，室温干燥1-5min；分别加入15U1DEPC水，充分溶解离心管内RNA,2000rpm离心5秒，冰上备用。②试剂准备和加样：在试剂准备区按每管RT-PCR反应液9.55ul、RT-PCR酶0.25ul和PCR-EnhancerO.2ul配好试剂，分别加入N个Roche毛细管中（每管10ul）；把上述试剂移至样本处理区，每管分别加入15ul制备好的RNA溶液，盖紧管盖离心200rpm离心10秒，把Roche毛细管依次放入Roche荧光PCR仪中。③RT-PCR反应：逆转录条件为42°C30min,PCR扩增条件为92°C3min,92°C10sec,52°C20sec,72°C30sec,5个循环；92°C5sec,60°C30sec,40个循环；退至40°C,扩增完毕。④结果分析：利用阳性标准品的Ct值所制成的标准曲线，在根据各待测样品的Ct值确定HCV核酸的拷贝数。灵敏度为5.0X102copies/ml,阳性取MIX103copies/ml为阳性。2结果在122例被检者中抗-HCV总阳性率为94.3%(115/122),HCVRNA阳性率67.2%(82/122),抗-HCV、HCVRNA同时阳性率为65.2%(75/115),抗-HCV阳性，HCVRNA阴性为37.8%(40/115),抗-HCV阴性而HCVRNA阳性率为5.7%(7/122)。结果见表1显示<!—endprint—><!--startprint-->3讨论ELISA法检测抗-HCV是我国目前临床上判断HCV的常规方法。抗-HCV是机体感染HCV...