大孔吸附树脂分离纯化山核桃蒲壳总生物碱摘要:用经筛选的大孔树脂分离纯化山核桃蒲壳总生物碱.选择极性不同的D101、AB-8、NKA-93种大孔树脂,比较其对山核桃蒲壳中总生物碱的吸附率和解吸率的影响,筛选较优树脂,并以总生物碱的纯化倍数和固体得率为考察指标,探索纯化工艺.NKA-9大孔树脂对山核桃蒲壳总生物碱有较好的吸附和解吸效果;pH为7.0的山核桃蒲壳生物碱提取液经大孔树脂吸附后,依次用蒸馏水2BV、30%乙醇2BV、50%乙醇3BV洗脱,总生物碱富集在50%乙醇部分,纯化倍数达到3.173倍,固体物得率为34.78%.采用NKA-9大孔树脂可以较好地分离纯化山核桃蒲壳总生物碱.关键词:山核桃蒲壳;总生物碱;大孔吸附树脂;纯化:O657文献标志码:A:1008-9497(2010)04-463-04ZHANGYong-yu??1,XUANGui-da??2,LILin-lin??2(1.PharmaceuticalCollegeofZhe激angUniversity,Hangzhou310058,China;2.CityCollegeofZhe激angUniversity,Hangzhou310015,China)SeparationandpurificationoftotalalkaloidsfromthepeelsofCaryacathayensisSarg.bymacroporousadsorptionresin.JournalofZhe激angUniversity(ScienceEdition),2010,37(4):463-466Abstract:SeparationandpurificationoftotalalkaloidsfromthepeelsofCaryacathayensisSarg.byselectedmacroporousadsorptionresinwereinvestigated.D101、AB-8、NKA-9,threetypesofmacropouousresinswerechoosedtopurifytotalalkaloids.Theadsorptionratioanddesorptionratiowerecomparedinordertoselecttheresins.Themethodforpurificationwasstudiedwiththetotalalkaloidspurificationmultipleandsolidratioasindexes.NKA-9macroporousresinwasthemosteffectiveresintopurifytotalalkaloidsfromthepeelsofCaryacathayensisSarg.;Theoptimumconditionswere:pHvalueof7??0;elutetotalalkaloidspartwith3BV50%alcoholafterelutingwith2BVdistilledwaterand2BV30%alcohol.Thetotalalkaloidsconcentratedin50%alcoholpart,thepurificationmultiplewas3.173,thesolidratiowas34.78%.NKA-9macroporousresinwaseffectivetopurifytotalalkaloidsfromthepeelsofCaryacathayensisSarg.KeyWords:peelsofCaryacathayensisSarg.;totalalkaloids;macroporousadsorptionresin;purification0前言山核桃属于胡桃科(Juglandaceae)山核桃属(CaryaNutt.)[1],主要分布在浙、皖两省交界的天目山一带,是当地农民致富的骨干产业.山核桃果实的集约化生产、加工,给农民带来了巨大经济效益,但弃置野外的山核桃蒲壳随意堆放或倒入河流,堵塞河道、污染河水、毒害鱼虾,是地方政府和林业部门急需解决的问题[2].目前,国内对山核桃的研究主要集中在生态、栽培及种仁的营养保健和药用价值上,有关山核桃蒲壳中所含生物碱的研究尚未见报道.本文以浙江临安产山核桃蒲壳为研究材料,用大孔树脂对其总生物碱分离纯化工艺做了初步探索,为进一步开发利用废弃山核桃蒲壳提供科学依据.1材料与仪器1.1实验材料山核桃蒲壳(浙江临安).1.2实验试剂所用试剂碘化铋钾、溴甲酚绿、甲醇(上海申翔化学试剂公司)均为分析纯;乙醇为95%工业酒精(太仓新太酒精有限公司);标准品盐酸小檗碱纯度大于98%(中国药品生物制品检定所,批号:633-65-8);大孔吸附树脂D101、AB-8、NKA-9(南开大学化工厂).1.3实验仪器KQ-500E医用超声波清洗器(昆明市超声仪器有限公司);SP-2000UV分光光度计(北京普析);RE-52AA旋转蒸发器(上海亚荣);电子天平(美国奥豪斯);DK-S24型电热恒温水浴锅(上海医疗器械厂);真空干燥箱(上海实验仪器厂);样本粉碎机(上海实验仪器厂);旋涡混合器(北京长安仪器厂).2方法与结果2.1总生物碱含量测定[3]2.1.1标准曲线的绘制精密称取盐酸小檗碱标准品5.7mg,加10mL甲醇溶解,作为储备液.取储备液1mL,加甲醇定容至10mL,得0.057g•L-1标准溶液.精密吸取标准品溶液0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6mL至分液漏斗中,挥干甲醇,然后加入磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液(pH4.0)2.0mL摇匀,再加入2.0mL溴甲酚绿酸性染料溶液摇匀,加10.0mL二氯甲烷萃取,剧烈振摇1min,静置1h,分取二氯甲烷层,以二氯甲烷为空白对照于415nm处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为...