富硒酵母中含硒分子的提取和硒的种态分析高愈希1,蒲云霞1,2,彭晓敏1,吴刚2(1.中国科学院高能物理研究所核分析技术重点实验室，北京100049；2.包头医学院基础医学部，包头014040）摘要富硒酵母是常见的补硒营养品，其品质与所含硒的种态有关。为了评价富硒酵母品质，用超声法破碎酵母的细胞壁，用考马斯亮兰法测定提取液中的蛋白浓度以考察细胞破碎程度，用酶解提取法提取酵母含硒组分，用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）测定硒含量，通过提取液中的硒含量评估提取效率，用反相离子对高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱联用技术（HPLC-ICP-MS）分析酶解液中的小分子硒。酶解提取法硒回收率为80.97%，其中，SeO32-和SeO42-占总硒的1.63%，65%的硒以易被人体吸收的硒代蛋氨酸形式存在，其中大部分存在于含硒蛋白分子中。结果表明：超声破碎后用酶解提取法适合于分析富硒酵母中硒的结合形态且能很好地避免提取液内含硒小分子的转化，所研究富硒酵母中硒主要以易被人体吸收的含硒蛋白形式存在，品质较好。关键词:富硒酵母，种态分析，超声破碎酶解提取，HPLC-ICP-MS中图分类号：R194.5，O652ExtractionandSpeciationofSelenium-ContainingSpeciesinSelenium-enrichedYeastGAOYu-xi1,PUYun-xia1,2,PENGXiao-min1,WUGang2(1.KeyLaboratoryofNuclearAnalyticalTechniques,InstituteofHighEnergyPhysics,ChineseAcademyofSciences,Beijing100049China;2.SchoolofBasicmedicine,BaotouMedicalCollege,Baotou014040,China)Abstract:Se-enrichedyeastisacommonnurtureforseleniumcomplement.ItsqualitydependsontheSe-containingspecies.Toevaluatethequalityofselenium-enrichedyeast,theSe-containingspecieswereanalyzedasfollowing:thewallsofSe-enrichedyeastweredisruptedbyanultrasonicassistedprocedure,andthentheSe-containingspecieswereextractedwithanenzymolysisprocedure.ThevalidityofdisruptionwasestimatedbasedontheproteinconcentrationinthedisruptingbuffermeasuredwiththeBradfordmethod.TheextractionefficiencywasevaluatedbasedontheseleniumcontentintheextractmeasuredwithICP-MS.Theselenium-containingspeciesinenzymolysissupernatantwasanalyzedwithreversed-phaseion-pairingHPLC-ICP-MStoassessthequalityofselenium-enrichedyeast.TheSerecoveryfortheenzymolysisprocedurewas80.97%,amongthem,theinorganicformsofSe(SeO32-andSeO42-)wasonly1.63%oftotalSe.Amajorityofseleniumexistedintheyeastwasintheformofselenomethioninewhichcanbeeasilyabsorbedandutilizedbyhumans.Theresultsindicatethattheenzymolysisextractionafterultrasonicdisruptionisasuitabletechniqueofsamplepreparation收稿日期：修订日期：基金项目：本文系国家自然科学基金“硒对植物体内汞的生物学行为及效应的影响20777075”及“用金属组学追踪细胞中的金属:对金属相关的病理生理的启示，20931160430”资助项目第一作者简介：高愈希（1962—）、男、博士、中国科学院高能物理研究所副研究员，E-mail:gaoyx@ihep.ac.cn---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---forassessingthequalityofSe-enrichedyeastandcanavoidthetransformationofSe-containingspeciesintheextractedsolution.ThetestedyeasthasagoodqualitywithselenomethionineasitsdominantSe-containingformspresentinproteins.Keywords:selenium-enrichedyeast,speciation,ultrasonicdisruption-enzymolysisextraction，HPLC-ICP-MS硒是人体必需的微量元素，在体内具有抗氧化、提高机体免疫力以及拮抗重金属毒性等功能。人体缺硒可以导致克山氏病、大骨节病等疾病，补硒可以预防相关疾病的发生[1,2]。因为硒在地壳中分布很不均匀，我国低硒地带从东北一直延伸到西南，有数亿居民缺硒[3]。目前市场上出现了许多富硒食品和保健品，如富硒米、富硒香菇、富硒螺旋藻、富硒酵母等。富硒食品、保健品的品质不仅取决于其硒含量，还取决于其中的硒形态，因此硒的种态分析对...