网织红细胞计数在恶性肿瘤治疗中应用的进展高庆峰黑龙江省农垦总医院检验科邮编：150088电话：0451-55197895摘要网织红细胞及其参数可反映恶性肿瘤患者放化疗时骨髓造血功能变化。网织红细胞在化疗开始及骨髓恢复期的变化要早于白细胞、血小板数量等其他指标的改变，且网织红细胞可通过显微镜检查、某些血液自动分析仪及流式细胞术检测法进行计数。关键词恶性肿瘤；网织红细胞计数；中荧光强度网织红细胞比率（MFR）网织红细胞（reticulocyte,Ret）是红细胞的前身,介于晚幼红细胞与成熟红细胞之间尚未成熟的红细胞（RBC），网织红细胞含有少量RNA,用煌焦油蓝染色时呈网状故名网织红细胞。其胞质中残存的RNA在活体染色时可与荧光染料结合形成复合物，经激光照射产生特定波长的荧光，黄再捷、张兵等[1]根据荧光强弱可将网织红细胞分为低荧光强度网织红细胞比率（LFR）、中荧光强度网织红细胞比率（MFR）、高荧光强度网织红细胞比率（HFR）三类。在正常情况下骨髓中有核红细胞并不释放至血液循环，只有网织红细胞和成熟红细胞才释放入外周血。因此，检查外周血中网织红细胞数，可以推知骨髓生成红细胞的情况。网织红细胞是反映骨髓红系造血功能以及判断贫血和相关疾病疗效的重要指标。可通过显微镜检查、某些血液自动分析仪及流式细胞术检测法进行网织红细胞计数。网织红细胞计数方法目前最常用的有以下几种:1.普通光学显微镜计数用普通光学显微镜,在放大1000倍情况下计数1000个红细胞内网织红细胞的百分率,由于对网织红细胞的辨认受染色效果的影响,存在着主观上的误差,且一般只计数1000个红细胞内网织红细胞的百分率,代表性不全面,不能作网织红细胞的绝对数,此外该检测方法变异系数大,精确度差,而且费时,因此其临床应用的价值远未能充分发挥。2.多参数流式细胞仪流式细胞仪的问世,为网织红细胞计数提供了准确、快速的实验手段。由于网织红细胞是成熟红细胞的前阶段,其胞浆中尚残存有RNA可与某些染料结合形成复合物,在特定波长激发光照射时产生荧光,其荧光强度可持续数十分钟,因而可用流式细胞仪测量出这种特定波长的荧光,进行单参数定量RNA。仪器根据胞内RNA含量精确的计数出网织红细胞绝对值和占红细胞的百分率。流式细胞仪能在几秒钟内检测上万个红细胞中的网红数,大大提高了结果的准确度,平均变异系数(CV)为4.3%(范围1.7-6.6%)[2]。3.血细胞分析仪计数全血标本与荧光染料混合染色,当每一个细胞通过检测孔受到激光照射时,仪器的前向角散射光测量细胞的大小,而侧向荧光强度是测量细胞内RNA含量,如此可检测红细胞中网织红细胞的百分率和每微升血中网织红细胞的绝对值。由于荧光强度与胞内RNA的量呈比例关系,将网织红细胞分低荧光强度网织红细胞比率（LFR）、中荧光强度网织红细胞比率（MFR）、高荧光强度网织红细胞比率（HFR）三类。越是幼稚的网织红细胞红显示出越强的荧光,而成熟的红细胞极少或没有荧光。此类仪器每小时可检测几十甚至上百个标本,温度和孵育时间自动控制,精密度CV值低于5%[3]。放化疗是目前肿瘤治疗的主要方法之一,其最大的不良反应就是可以造成不同程度的骨髓抑制,引起白细胞（WBC）、红细胞（RBC）和血小板（PLT）数量的减少,从而引发感染、贫血、出血,危害极大。因此，寻求一种灵敏、可靠的指标来反映肿瘤患者在放化疗治疗过程中的骨髓造血功能情况,对指导临床选择放化疗时机及科学、合理用药具有重要意义。[4]目前,在肿瘤放化疗过程中监测骨髓造血功能状况主要是依靠检测外周血WBC(或中性粒细胞NEU)和PLT数,但临床实践发现:(1)WBC数易受感染、应激、输血等因素的影响；(2)当WBC和PLT数下降时,骨髓已明显受抑,错过采取有效治疗措施的最佳时机。网织红细胞及其参数在反映恶性肿瘤患者放化疗中骨髓造血功能变化有一定的临床价值[5]。有研究显示,在肿瘤放化疗后MRF的变化一般早于WBC(或NEU)和PLT数的变化,是反映骨髓造血功能状态较为敏感的指标[6-11]。郭学松等[12]实验结果显示，恶性肿瘤患者在化疗开始后，RET绝对数与白细胞计数均下降，当RET绝对数降至0.01×1012/L以下时，MFR和HFR也逐步降至最低水平，网红分类几乎全部由LFR组成；化疗后的第十五天，MFR首先...