口蹄疫灭活疫苗基础研究影响口瞬疫贴壁种毒质量因素的探讨与分析李培林.，张龙，刘国民，刘艳霞，韩四娥，胡斌，张玉梅(金宇保灵生物药品有限公司，内蒙古呼和浩特010030)摘萋：口蹄疫灭活疫笛目前仍然是控制口蹄疫的主要手段随着悬浮工艺和纯化工艺的改进.使口玷疲灭活疫筋的质量有很大的提高，但基础研•究也不容忽视本丈主要探讨影响种毒材备的一些因素，包括如胞映态、接毒量的改变及春液保存条件时种*质量的影响&表得出如下姑论：如胞状态会影响枚毒时间的变化.同时一定程度上也会影响LD”毒价的变化；第二.接*含量增高.故获时间编短.而低制量、正常剂量接*传代试脸均能.茯得合格的种毒支系.适宜地改变接径量有助于提高种毒质量；第三.不论是4*c冷藏保存,还是-m冷冻保存,随着保存时间的延长.毒价均有不同程度的损失.而A4X：保存的毒液下降率明显依于-20X：保存方式因此.上壕因素在生产中要抽化研究，对提高科毒质量起到指导意义关键词：BHK-21细电：口玲疫夭活疫苗；种再制备；腐量•坦制中图分类号：S855.3文献标识码：A口蹄疫是由口蹄疫病毒(FMDV)引起偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，严重危害畜牧业的发展"气0IE将该病列为A类家畜传染病之首，而我国农业部也把该病列为第一类防控疫病。对于口蹄疫的防控，目前仍以灭活疫苗为主。此项措施在我国重大疫情中发挥巨大防治作用。对于口蹄疫疫苗生产企业，质景的提高、产品创新以及员工素质提高是企业发展的动力。因此，疫苗质量提高离不开工艺革新以及基础方面的优化研究。工艺革新是疫苗制备企业的硬件系统，由企业的综合实力决定。而基础研究主要包括：种细胞的驯化与筛选、种毒的优化制备以及抗原纯化等相关研究'S。从种毒制备人员的自身素质讲，筛选制备出良好的种毒，不仅给疫苗前端解决了问题,而且也给后端工艺带来可喜的成果。因为种毒质最好坏、抗原含量高低，直接影响口蹄疫抗原中的有效成分，而且关系到疫苗的免疫效果。在生产中获得一支理想的种涛支系，不仅给生产人员带来方便，而且也给企业带来很大的经济收益。因此，制苗毒株的选择及质量的提高是疫苗生产的首要问题⑸。筛选优质的种奇需要有正确的操作方法，更需要•掌握影响种毒质最的-些因素。目前，影响贴壁种毒因素主要有细胞贴壁状态、维持液的酸碱度、接毒量、最佳收获时•作者简介：李培休，女.金宇保灵生物药品有限公司技*骨干.主要从事口仲瑾生产种.也和种毒研充，联系电话：159474l8O85a文章编号：1001-0769(2015)09-0028-03间、检验周期、种毒保存时间以及种毒传代路线及无菌观念等，上述因素均能影响种毒毒价及质量效果。因此，本次试验主要探讨影响种毒质量的一些因素，并进行分析与总结，从而通过过程控制，调整传代条件、保存方法，筛选出毒价稳定、146S高的基础种毒，从而保障种毒质最，提高企业竞争力。I材料与方法1.1材料1.1.1仪器与设备二氧化碳培养箱(Thermo8000WJ)；生物安全柜(HFsafe-1200型)；倒置显微镜清(OLMPUS)；4用平温冰箱；-20弋卧式冷冻冰柜；温室、生物细胞转瓶机、细胞观察台；超低温冰箱(ThermoULT1386-3-V41).移液器、恒温震荡培养箱等仪器。以上设备均由金宇保灵生物药品有限公司提供。1.1.2BHK-21细咆由金宇保灵生物药品有限公司提供，分种传代一般按1：3~1：4进行操作，加入营养液，置37气培养箱中培养。营养液配制按本公司的配液SOP进行操作。I.I.3O型口玷疫去址种毒---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---由金宇保灵生物药品有限公司质量检验部提供FMDV基础种毒，由车间领取并由专人管理。1.2方法---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---1.2.1BHK-2I伽陷贴壁状态时种毒的影响按常规细胞传代的方法，将细胞复苏传代后，将同批培养24h、48h、53h、72h、96h细胞，每瓶细胞换液，加入病毒维持液100mL,同时每个培养时间组下设两个重复，分别按5%~8%的接毒量接毒，接毒完成后置二氧化碳培养箱37气培养6h~8h观察，病变达到90%时收获病毒冷冻保存后混匀测病毒含量。122玫交接种比例对铮逸轩毒的影响选同批48h、72h培养阶段的BHK-2...