豎南大学学报(医学版)Journalof激nanUniversity(MedicineEdition)脂肪的间充质干细胞分离方法的改进李冬艳，字丽，李发涛，刘红，罗京资(If南大学医学院生物化学教研室，广东广州510632)［播要］目的:从供体年龄、取材部位、提取方法3方面来研究稳定的脂肪间充质干细胞(ADMSCs)分离提取方法。方法：从兔颈背部皮下、肌间以及腹股沟皮下的脂肪组织取材，分别采用一次消化收集法和多次消化收集法分离提取ADMSCs,单层传代培养。分别比较不同提取方法•老年兔、壮年兔与幼年兔，同一供体不同部位的脂肪组织，所分离的ADMSCs产质和生物学特性。结果：运用多次消化收集法能从脂肪组织中稳定分离出生长旺盛的ADM・SCs,与一次消化收集法相比能显著提高所获取的的细胞产扯。从老年兔、壮年兔、幼年兔以及同一供体的不同部位脂肪组织中所提取的ADMSCS生长增殖活性无明显差异,但从单位体积脂肪组织提取得到的ADMSCs产fit显著不同。结论：多次消化收集法能显著提高分离获得的ADMSCs产fit,是对传统的一次消化收集法的改进。选择不同供体年龄和取材部位提取ADMSCs,对细胞的生物学活性影响不大，但对细胞产fit有明显影响。［关键词］脂肪间充质干细胞；原代细胞；细胞分离提取；组织工程［］R331.1［文献标识码］B［］1000-9965(2007)06-0585-05TheimprovementoftheextractionmethodforadiposetissuederivedmesenchymalstemcellsLIDong-yan,YULi,LIFa-tao,LIUHong,LUO激ng-zi(DepartmentofBiochemistry,MedicalCollegef激nanUniversity,Guangzhou510632.China)［Abstract］Aim：Inordertoestablishastableextractionmethodforadiposetissuederivedmcscnchy・malstemcells(ADMSCs),theresearchwascarriedoutonthreerespects:donoragetlocationoffatob-tainedandextractionway.Methods:Adiposetissuefromrabbitwasdrawnunderscrufffur,amongmus-cles,andingroin.ADMSCswereextractedwiththesingle-digestion-separatemethodorthemulti-digestion-separatemethod-TheyieldofextractedADMSCsandthebiologicalactivityofculturedcellswerecomparedamongthegroupswithdifferentextractionmethods,fromdiflerentlocationsandages.Results:TheeugonicADMSCscouldbestablyextractedfromadiposetissuewiththemulti-digestion-separatemeth・od,andtheyieldfromitwasobviouslybetterthanthatfromdiegroupwiththesingle-digestion-separatemethod.TheproliferationactivityofextractedADMSCswassimilaramongtherabbitsfromdifferentagesandlocations,buttheADMSCsyieldfromadiposetissueofunitvolumewasdifferentsignificantly・Conclusion：Themulti-digestion-separate-methodcansignificantlyraisetheyieldofextractedADMSCs,whichisbetterthantraditionalsingle-digcstion-separate-method.Theageofrabbitandlocationofadiposetissue［收稿日期］2007-09-10［基金项目］教育部科学技术研丸電点基金项目（02910）；广东省自然科学里金项目（31875）；广州市科委科技攻关重大项H（2002714X）032）［作者简介］李冬艳（1981-）,女，硕土研究生，研究方向：软骨组织工程•通讯联系人:宇ffli,Tel:020-85220256.E-mail：doctoryuli©ya-hoo・comhadlittleeffectonthebiologicalactivityofextractedADMSCs,buthaveobviouseffectonthecellyield.[Keywords]adiposetissuederivedmesenchymalstemcell;primarycell；cellextraction；tissueengineering间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)具有自我更新及多向分化潜能，是一种具有潜力的组织工程种子细胞。目前研究得比较多的是骨髓的MSCs,但骨他中的间充质干细胞数fit很少(约占细胞总数的1/105),且存在取材困难等问题。MSG广泛分布于其他组织中，包括肌肉、血管、肝脏、胰腺和脂肪等'其中脂肪的MSCs由于广泛，取材方便，日益受到研究者的重视。而且近年来，国外研究表明，脂肪的间充质干细胞(adiposetissuederivedmesenchymalstemcells,ADMSCs)在体外适当的诱导培养条件下能分化为多种细胞,如:脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、成肌细胞和心肌细胞等，因此在细胞治...