荧光定量PCR法检测副溶血弧菌tlh和tdh基因的表达差异_陈星

荧光定量PCR法检测副溶血弧菌tlh和tdh基因的表达差异_陈星DOI:10.13344/j.microbiol.china.2022.07.009微生物学通报MicrobiologyChinatongbao@https://www.sodocs.net/doc/0615173645.htmlJUL20,2022,38(7):1077?1083?2022byInstituteofMicrobiology,CAS简报荧光定量PCR法检测副溶血弧菌tlh和tdh基因的表达差异陈星潘迎捷孙晓红赵勇*(上海海洋大学食品学院上海202206)摘要:副溶血弧菌是广泛存在于近海区域,盐湖和海产品中的食源性致病菌,会引起大规模的食物中毒。TLH(不耐热溶血毒素)和TDH(耐热直接溶血毒素)是副溶血弧菌最主要的毒力基因,通过比较毒力基因的表达量可以间接比较同种菌株在不同应激条件下以及不同菌株之间的毒力差异。本文以在不同条件下培养的3株Vp为材料,分别提取其总RNA,以16SrRNA为内标基因,运用荧光定量PCR技术检测副溶血弧菌TLH和TDH基因在不同应激条件下的表达差异。结果表明:不同菌株和同种菌株在不同应激条件下tlh、tdh基因表达差异均显著;tlh的最适表达条件分别为5%盐度和20°C;tdh的最适表达条件分别为1%盐度和25°C。运用SPSS软件对实验结果进行统计学分析表明:菌株对tlh表达的影响大于盐度大于温度;菌株对tdh表达的影响大于温度大于盐度。关键词:副溶血弧菌,tlh,tdh,RT-PCR,基因表达DetectionoftlhandtdhexpressiondifferencesinVibrioparahaemolyticusbyreal-timequantitativePCRCHENXingPANYing-JieSUNXiao-HongZHAOYong*(FoodCollege,ShanghaiOceanUniversity,Shanghai202206,China)Abstract:Vibrioparahaemolyticusisafoodbornepathogenicbacteriawhichcouldbewidelyfoundincoastalareas,saltlakesandseafoods,itcouldcauselarge-scalefoodpoisoning.Tlh(Themolabilehemolysin)andtdh(Thermostabledirecthemolyticus)aretwoofthemostimportantvirulencegenesofVp,wecancomparethevirulenceofstrainswhichindifferentstressconditions,aswellasdifferencesstrainsbycomparingtheexpressionlevelsoftlhandtdhindirectly.Inthispaper,threekindsofVpculturedunderdifferentconditions,totalRNAwereextractedfromthem,16SrRNAasaninternalstan基金项目:国家863计划重点项目(No.2022AA101804);上海市科技兴农重点攻关项目(沪农科攻字[2022]第6-1号);国家“十一五”科技支撑计划课题—世博科技专项(No.2022BAK43B17)*通讯作者:Tel:86-21-61900379;:yzhao@https://www.sodocs.net/doc/0615173645.html收稿日期:2022-11-16;接受日期:2022-02-22本文来源:网络收集与整理,如有侵权,请联系作者删除,谢谢!---本文来源于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---

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