基于正交试验的野木瓜中反丁烯二酸提取工艺的优化［摘要］目的：采用高效液相色谱法，利用正交试验L9(34)探究野木瓜中有机酸的最佳提取工艺条件。方法：运用正交试验对贵州野木瓜干燥根茎的提取条件进行探究，采用HPLC测定反丁烯二酸的含量。结果：极差分析表明，在各提取条件中，对反丁烯二酸的含量影响的顺序是：溶剂种类〉提取次数〉提取时间〉料液体积比；方差分析表明，溶剂种类的差异性大于其他三个因素。结论：运用正交试验得到野木瓜最佳提取工艺是90%的乙醇提取3次，每次2h,料液体积比8倍量较为合适，且各项考察结果均符合要求,提示该提取工艺切实可行，为野木瓜中反丁烯二酸的含量测定提供了实验依据。［关键词］野木瓜；正交试验；反丁烯二酸；高效液相色谱法［中图分类号］R282.71［文献标识码］A［文章编号］1673-7210(2011)12(a)-077-03OptimizationoftheextractiontechnicsforfumaricacidsfromStarntoniachinensisDC.basedonorthogonaltestHUShuping,LIUTongxiang,LIUShijieInstituteofChineseMinorityTraditionalMedical,MinzuUniversityofChina,Beijing100081,China[Abstract]Objective:ToexplorethebestextractionconditionsoffumaricacidinStarntoniachinensisDC.byusingHPLCandorthogonaltestL9(34).Methods:OrthogonaltestwasappliedtoprobetheextractionprocessondriedleafandstemofStarntoniachinensisDC.fromGuizhou;HPLCwasutilizedtomeasurethefumaricacidcontent.Results:Rangeanalysisshowedthattheextractionconditionsonthecontentoffumaricacidwasintheorder:kindsofsolvent>extractiontimes>extractiontime>volumeratioofsolid;varianeeanalysisindicatedthatkindsofsolventhadgreatereffectsthanotherfactors・Conclusion:Theoptimalconditionoftheorthogonaltestisthat,thesoliddissolvedin90%ethanol,extractionlastedfor2hours,3times,solidtoliquidvolumeratioof8ismoreappropriateandtheresultsofmethodinvestigationcomplywithallrequirements.Thetechniqueprovestobepractical,whichprovidestheoreticalfoundationformeasuringthecontentoffumaricacidinStarntoniachinensisDC..[Keywords]StarntoniachinensisDC.;Orthogonaltest;Fumaricacid;HPLC野木瓜（starntoniachinensisDC.）,常用名七叶莲，为木通科（Lardizabalaceae）野木瓜属植物，性温，味微苦，具有祛风止痛及舒筋活络等功效[—2]。临床用于各种手术止痛、坐骨神经痛、腰椎骨质增生、跌打损伤等，疗效显著，且具有无耐药性、无成瘾性、毒副作用小的特点[3-4],是卫生部公布的药食两用植物，全株具有较高的药用价值。原标准中有一个显微鉴别，但未见该药材质量标准研究的报道。为了探究野木瓜中反丁烯二酸的含量，本实验运用高效液相色谱法测定野木瓜中反丁烯二酸的含量，并进行方法学研究，为野木瓜的质量标准研究提供一定的实验数据。1仪器与试药1.1仪器Waters600-2996高效液相色谱仪（美国Waters公司），Waters2996检测器，Empower色谱工作站；Milli-Q超纯水纯化系统（美国Millipore公司）；MetilerToledoAL104电子天平（瑞士Metiler公司）；KQ-500E型超声波清洗器（昆山超声仪器有限公司,功率500W,频率40kHz）o1.2试剂反丁烯二酸对照品（购自中国药品生物制品检定所，批号：1541-200001）；甲醇、乙月青为色谱纯（美国FisherChemical）,水为超纯水，磷酸等其余试剂均为分析纯。1.3实验药材野木瓜购于安徽亳州药材市场，经北京中医药大学张贵君教授鉴定为木通科野木瓜属野木瓜StarntoniachinensisDC.的干燥根茎。2方法与结果2.1提取方法考察分别以超声提取、回流提取进行考察，结果表明回流提取效果优于超声提取，同时回流提取是较传统、方便的提取方法，故选取回流提取方法。2.2因素水平的确定参照文献⑸报道，并根据野木瓜药材的理化性质,提取工艺选取了对提取率影响较大的溶剂种类（A）、提取时间（B）、料液体积比（C）和提取次数（D）作为参考因素，以反丁烯二酸的含量为考察指标，选定L9（34）正交表进行试验。正交因素水平见表1。2.3试验方法取野木瓜药材，40i过筛，...