MEKC血样中药物.第1页原始文件沃尔夫冈·BuchbergerÆ马蒂亚斯Ferdig鲁道夫·索默Æ翠THANHVO雷帕霉素在人体血液中的微量分析胶束电动色谱收稿日期：2004年3月16日/日期：112004/5月接受日期：2004年5月18号/发表时间：2004年7月20日Ó施普林格出版社2004年摘要毛细管电泳法与UV检测波长为278nm的分析已经开发在人类的免疫抑制剂雷帕霉素（西罗莫司）血微克每升的水平低。分离有在酸性载体电解质含有已取得十二烷基硫酸钠和30％（体积/体积）腈。为样品净化和富集，离线固固相萃取的步骤中使用的基于二氧化硅的反相材料和毛细管聚焦技术采用。后者允许注射增加扩大样本量，而不会过度带。虽然这种新方法是不敏感，比现有的质谱联用液相色谱程序法，它是完全适合常规分析的RA-pamycin血液中这种药物治疗的患者。最后，但并非最不重要的，低的成本使一个有吸引力的建立的方法替代。关键词雷帕霉素Æ胶束电动血色谱Æ分析介绍雷帕霉素（西罗莫司）是三烯大环内酯类抗生素具有抗真菌，消炎，抗肿瘤和这是目前使用的免疫抑制特性用于预防器官移植排斥反应的反式种植园。雷帕霉素的结构图给出。1。雷怕霉素已被证明是阻止T细胞活化和扩散以及激活P70S6文FK-506结合激酶，表现出很强的结合蛋白质。它也抑制活性的蛋白质哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的，该功能蒸发散在促进肿瘤生长的信号转导通路。雷帕霉素结合到受体蛋白质（FKBP12），和的rapamycin/FKBP12复杂的结合mTOR的并阻止mTOR的互动与目标蛋白质在这一信号通路。对于栽种的器官的患者是必不可少的监测雷帕霉素在他们的血液中的水平。决定雷帕霉素在血液中的中断可以确定迄今已完成高效液相色谱紫外检测器[1-4]，最近由高效液相色谱法，连字符和质谱（MS）[5-8]。耦合的毛细管电泳（CE）电电喷MS的检测的非共价键受体配位体配合物之间的亲免素FKBP12和Hsieh等人已经描述了雷帕霉素。[9]。旁总是需要去蛋白，样品制备净化和富集的步骤，这是主要管理固相萃取（SPE）。KIR-chner等。[10-14]更换离线SPE一步通过柱，一上线提取切换。基于HPLC与雷帕霉素的现有方法紫外检测器可能会受到比较长的分析时间（40分钟），这也可能导致过量的溶剂消费。大约是定量限2LGLA1差，但由于峰分辨率矩阵往往阻碍了测定低浓度。采用高效液相色谱法的方法结合MS产量的定量限一个数量级低于用UV检测得到的那些。在除了这一优势，分析时间被降低约15分钟，因为质量选择性检测，并不需要矩阵组成的完整的解决方案，组件。使用MS的所有方法的缺点检测昂贵拉琴要求-tation。BuchbergerÆ：M.Ferdig（）AETDT武分析化学研究所，约翰内斯·开普勒大学林茨Altenbergerstraße69，4040，奥地利林茨电子邮件：matthias.ferdigjku.atR.索默医学研究所与化学实验室诊断，瓦格纳Jauregg医院，瓦格纳Jauregg-WEG15，4020林茨，奥地利，肛门Bioanal化工（2004）380：68-71DOI10.1007/s00216-004-2687-x第2页许多免疫抑制治疗药物监测pressants往往是做与免疫测定法，以保持每次分析的成本低。不幸的是，没有免疫市售雷帕霉素[15]，从而使可靠的分析仍然依赖于仪器分析分离技术。本文的目的是要表明，CE设备可以是一个有吸引力的替代品建立的HPLC方法，特别是电泳技术往往表现出这些不同的分离选择性，中遇到的色谱。对于中性分析物雷帕霉素胶束电动色谱法（MEKC）可以被认为是合适的技术。作为一个结果的比较普遍较低的灵敏度，行政长官会同行政会议伊森与HPLC，富集步骤是必要的。在这项工作扫描法（毛细管preconcen加以登记）被用在除了强制性SPE诉dure实现适当的量化限制。扫富集技术为CE据报道由几位作者的各种应用，其中包括生物体液中的药物[16-23]。在目前的工作进行分析的样品预处理血液中的雷帕霉素（蛋白质沉淀），是基于目前使用的方法在常规的HPLC分析[7]。实验的仪器仪表所有实验均在一个电泳ATI的UNICAM水晶CE系统（ATIUNICAM，才可桥，英国）。一个100TSP光谱。可变UV/VISCE检测器（热分离产品，加利福尼亚州的圣何塞，检测器中的美国）用氘灯担任。检测波长为278nm。该系统是配备的熔凝硅石毛细管75厘米总长度（60厘米有效长度从入口到检测窗口）...