FQ-PCR检测BALF中结核杆菌一DNA对肺结核诊断的应用研究【摘耍】目的：对FQ-PCR检测BALF中结核杆菌-DNA对肺结核诊断的应用进行研究。方法：随机选収2013年12月-2014年11月期间本院收治的肺结核患者110例作为本次研究的对象，所有患者实施纤支镜检查、活检、刷检，BALF中结核杆菌-DNA行FQ-PCR检测，对检查结果进行分析研究。结果：在本次研究屮，确诊为肺结核的患者冇40.00%(44/110)；FQ-PC检测的敏感性明显高于常规涂片镜检，差异有统计学意义(P〈0・05)o结论：在肺结核的诊断屮，FQ-PCR检测的敏感度高，操作简单方便，检测速度较快，是BALF中结核杆菌-DNA检查的重要方法，在肺结核的诊断中有重要的应用价值。【关键词】FQ-PCR检测；BALF；结核杆菌-DNA；肺结核诊断TheApplicationofMycobacteriumTuberculosis-DNAinBALFbyFQ-PCRfortheDiagnosisofPulmonary/TONGJian-lin,RAOChang-hong,HUANGBo.//MedicalInnovationofChina,2015,12(26)：066-067[Abstract]Objective：Tostudytheapplicationofmycobacteriumtuberculosis~DNAinBALFbyFQ-PCRforthediagnosisofpulmonary・Method：110caseswithtuberculosisinourhospitalwererandomlyselectedfromDecember2013toNovember2014astheobjectsofthestudy,allpatientsweregiventhefiberopticbronchoscopy,biopsy,brushbiopsy,mycobacteriumtuberculosisDNAinbronchoalveolarlavagefluid(BALF)wasdetectedbyFQ-PCR,theexaminationresultswereanalyzed.Result：Inthisstudy,44casesofpulmonarytuberculosis,accountedfortheproportionto40.00%(44/110)；thesensitivityofFQ-PCdetectionwassignificantlyhigherthanthatofconventiormlsmearmicroscopy,thediffereneewasstatisticallysignificant(P<0.05)・Conelusion：Inthediagnosisofpulmonarytuberculosis,theFQ-PCRdetectionhashighsensitivity,simpleoperationandthedetectionspeedfaster,itisanimportantexaminationmethodofmycobacteriumtuberculosisDNAinBALFandhasimportantapplicationvalue・[Keywords]FQ-PCRdetection；Bronchoalveolarlavagefluid；Mycobacteriumtuberculosis-DNA；TuberculosisdiagnosisFirst-author'saddress:Affi1iatedHospitalofJiujiangUniversity,Jiujiang332000,Chinadoi：10.3969/j.issn.1674-4985.2015.26.020本文通过FQ-PCR检测BALF(Bronchoalveolarlavagefluid)中结核杆菌-DNA对肺结核的诊断进行分析研究，具体如下。1资料与方法1.1一般资料随机选取2013年12月-2014年11月期间本院收治的肺结核患者110例作为本次研究的对象，其中男67例，女43例，年龄17-68岁，平均（43・5±2.2）岁。所有患者临床诊断表现为胸片或胸部CT检查显示肺部有病变，肺部单侧或双侧有斑块状或片状阴影、结节等［1-2］o所有患者自愿参与本次研究，且签订了知情同意书。1.2方法所冇患者均实施纤支镜检查、活检、刷检，BALF屮结核杆菌-DNA等检查，且在这些检查之前，对患者实施血常规、血凝四项等检查［3］。检查中使用到的设备、仪器主要有：纤支镜型号为PENTAX,PCR扩增仪由美国PE公司提供；荧光检测仪(DA7600)、DNA提取液、TaG-DNA酶、荧光标记引物、定量标准品(TB-DNA浓度:106基因拷贝/uL)由中山医科大学达安基因诊断屮心提供。检查步骤如下：(1)支气管镜检查：按照支气管镜仪器使用说明书，进行相关的操作检查，并让患者做好相关的检查前准备，参照患者的X线检查、CT检查结果，在支气管镜下对患者的肺部进行观察，如果有可以进行活检的病灶，则使用活检钳在病灶上取下3〜5块的组织，使用10%福尔马林固定后进行病理检验。一次性细胞刷对病变部位进行涂片、抗酸染色、细胞学检查，牛理盐水支气管灌洗，收集灌洗液，进行BALF结核杆菌DNA检查［4-5］。如果在支气管镜下没有发现可以进行活检的病灶，需要根据患者的病变位置，刷检后再进行灌洗。(2)BALE结核杆菌DNA检查处理：取灌洗液1〜1・5mL,在转速为12000r/min的离心机中离心5min；取沉淀物，加入无菌生理盐水1mL,振荡混匀，然后在转速12000r/min的离心机屮离心5min；取沉淀物，加入50mLDNA提取液混匀，在100°C恒温下处理10min...