乙型肝炎血清标志物与HBV-DNA的相关性分析摘要：目的：分析乙型肝炎病毒（HBV）血清学检测出现的组合模式与HBV-DNA定量之间的关系，而为临床诊断、治疗、预后提供有价值的判断标准。方法：1483例血清标本采用酶联免疫吸附试验方法对其免疫学标志物进行检测，并采用实时荧光定量（PCR-荧光探针法）检测血清HBV-DNA。结果：473例HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)的标本，其HBV-DNA检出率为99.57%（471例），平均HBV-DNA拷贝数为5.82×6；504例HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)的标本，其HBV-DNA检出率为42.46%（214例），平均HBV-DNA拷贝数为1.85×5；428例HBsAg(+)HBcAb(+)的标本其HBV-DNA检出率为40.18%（172例），平均HBV-DNA拷贝数为1.05×4；58例HBsAg(+)HBeAg(+)的标本其HBV-DNA检出率为94.82%（55例），平均HBV-DNA拷贝数为3.34×3。结论：荧光定量PCR检测血清HBV-DNA准确灵敏，可以检测HBV的真实感染和复制状态，结合；乙型肝炎病毒的血清标志物检测，对于乙型肝炎临床诊断，治疗方案的选择，疗效观察及预后判断有极其重要的作用。关键词：肝炎病毒/乙型；乙型肝炎标志物；荧光定量PCR；酶联免疫吸附试验（ELISA）乙型肝炎病毒是一种严重威胁人类健康的传染病，据世界卫生组织统计，约有12亿人为乙型肝炎病毒携带者，每年100万人死于乙型肝炎[1]。乙型肝炎血清标志物检测是目前诊断乙型肝炎最常用的指标，但它主要反映人体对乙型肝炎免疫反应状态，但不能直接反应HBV在患者体内的具体含量，因其价格低廉，操作方便快捷，现仍是检测乙型肝炎的常用方法，随着分子生物学的发展，荧光定量PCR技术广泛用于临床的诊断与治疗，它是直接检测血清中的乙型肝炎病毒DNA，是反应人体内乙型肝炎病毒复制的直接指标，也是最特异，最灵敏的指标，反映了乙型肝炎病毒数量不同在患者肝脏中的复制情况[2]。通过检测乙型肝炎患者血清病毒含量和血清标志物，将结果进行统计分析，掌握他们之间的变化规律，以探讨该方法的实用性及临床应用价值。1资料与方法1.1一般资料：乙型肝炎患者血清标本于陕西省榆林市第一医院2006年3月～2009年3月的门诊及住院患者，共1483份。男925例，女558例，年龄1～77岁，平均39岁，临床诊断符合2000年全国传染病学术会议诊断标准[3]。1.2仪器与试剂：血清标志物仪器为RT-2100酶标仪测定，试剂由上海科华生物股份有限公司提供；HBV-DNA检测仪器DA-7600荧光定量扩增仪由中山大学达安基因股份有限公司提供；试剂由中山大学达安基因股份有限公司提供。1.3方法：乙型肝炎血清标志物采用酶联免疫吸附试验（ELISA），严格按操作说明检测，结果由酶标仪测定，每一批标本均设阴阳性和临界对照，荧光定量PCR测定HBV-DNA严格按试剂盒说明书和仪器厂家提供的方法进行。每批试验设立4个HBV-DNA标准品系列浓度，分别为1×104IU/ml、1×105IU/ml、1×106IU/ml、1×107IU/ml，其检测灵敏度为1×102IU/ml，严格按照Kword等提出的防污染措施进行实验操作[4]。1.4统计学处理：定量结果采用求算术平均值的方法计算HBV-DNA平均拷贝数，组间样本率比较采用u检验，计数资料采用t检验，最后用SPSS软件统计处理。2结果血清标志物经ELISA所分的模式：见表1。表1血清标志物经ELISA所分模式组别例数（n=1483）HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)(大三阳)473HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)（小三阳）504HBsAg(+)HBcAb(+)428HBsAg(+)HBeAg(+)58HBsAg(-)HBsAb(-)HBeAg(-)HBeAb(-)HBcAb(+)20表1结果显示：标志乙型肝炎感染期的血清HBsAg、HBeAg、HBcAb、均阳性的标本（大三阳），473例中PCR-荧光探针法检测HBV-DNA几乎全为阳性（阳性率为99.57％），标志长期HBV携带者的血清HBsAg、HBeAb、HBcAb（俗称小三阳）的504例标本中PCR-荧光探针法检测HBV-DNA有214例为阳性（阳性率为42.46％）其余HBsAg阴性的常见血清标志物模式HBV-DNA有10%阳性。这些说明依据酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒的感染及治疗情况并不完全可靠。通过表1～2可以找出乙型肝炎病毒血清标志物和HBV-DNA数量之间的相关性。表2乙型肝炎病毒血清标志物和HBV-DNA数量之间的相关性组别项目大三阳（例）小三阳（例）HBsAg(+)HBcAb(+)（例）HBsAg(+))HBeAg(+)（例）HBs...