TERT（端粒酶逆转录酶）启动子高频突变在膀胱癌屮的临床意义吴松123,张蒙2,唐爱发2,王倚天2,蔡志明25（1.北京大学深圳医院中心实验室；2.深圳市第二人民医院中心实验室，深圳518035：3.深圳北京大学香港科技大学医学中心男性生殖实验室）摘要：日的：为了确定端粒酶逆转录酶启动子的突变在膀胱癌中的临床意义。方法:在这项1（）研究中，通过Sanger测序确定了我们筛选的膀胱癌中TERT启动子的体细胞高频突变的基因，再用体外测定法将突变热点引入膀胱癌T24细胞系进行功能分析，以及通过皮肤划痕试验判断是否影响膀胱癌细胞的侵袭力。结果：通过将端粒酶逆转录酶启动子的突变热点228G>Aand250G>A引入T24细胞中，我们发现这些突变都与转录因子Etsl相关，I次I此增强了端粒酶逆转录酶的表达及膀胱癌T24细胞的侵袭能力。我们还观察到的TERT启15动子突变与染色体不稳定性显著相关。结论：TERT启动子突变可增强端粒酶逆转录酶的活性，可提高膀胱癌细胞的侵袭能力，对膀胱癌的诊断及预后有重要意义。关键词：膀胱癌；端粒酶逆转录酶启动子；体细胞突变；染色体不稳定性中图分类号：R737.120ClinicalSignificanceofHighfrequencymutationsofTERTpromoterinurinarysystemtumorsWUSongi.2.3,ZHANGMeng2,TANGAifa2,WANGYitian2,CAIZhiming2(1.CentralLab,PekingUniversityShenzhenHospital;252.CentralLab,ShenzhenSecondPeople'sHospital;3.MaleReproductionLab,ShenzhenPKU-HKUSTMedicalCenter)Abstract:Objectives:Todeterminetheclinicalsignificanceoftelomerasereversetranscriptase(TERT)promotermutationsinbladdercancers・Methods:ObservationalstudyofSangersequencingandclinicaldataonbladdercancers.Thernutationsdiscoveredinthecorepromoterof30TERTgenewereintroducedintoT24cells.ChiP,qPCR,westernblotsandwoundhealingassaywereperformedtoevaluatedthefunctionalimpactsofTERTpromotermutationsinbladdercancer.Results:Byintroducingthe228G>Aand250G>ATERTpromotermutationsintoT24cells,wefoundthatthesemutationsgenerateddenovoconsensusbindingmotifsfortranscriptionfactorEtsl,andconsequentlyincreasedTERTexpressionaswellasenhancedmigrationabilityof35T24cells・Moreover,weobservedthatTERTpromotermutationssignificantlyassociatedwithchromosomeinstabilityinourbladdercancelscohort.Conclusion:ThesemutationsincreasedTERTexpressionandenhancedmigrationabilityofbladderCarcinomacells.Hence,TERTpromotermutationsmayplayanirnportantroleindiagnosisandsurveillanceofbladdercancers・Keywords:Bladdercancer；TERTPromoter；Somaticmutations；chromosomeinstability401引言端粒酶是一种通过稳定端粒导致人类肿瘤发生及恶性病变的核糖核蛋门酶复合物，现作为早期肿瘤检测和预后的潜在的仃用的一种生物标志物而被广泛研究。鈿粒酶的高浓度表基金项冃：高等学校博士学科点专项科研基金资助课题(20100001110100)作者简介：吴松(1986・)，男，主治医师，主要硏究方向：泌尿生殖系统肿斓基因组通信联系人：蔡志明(1956-),男，教授，主要研究方向：泌尿系肿瘤基因组研究.caizhiining2000@I63.com达，尤其是端粒酶逆转录酶催化亚基，儿乎在所冇人类肿瘤组织分型中均冇发现。從前的研究表明，在拥有完整P53通路的动物模型中发现端粒的缩短可抑制肿瘤的发生，同时端粒酶逆转录酶的过度表达可使主要人类细胞因避免衰老无线增殖。躲而，导致端粒酶逆转录酶在各种人类肿瘤中激活的原因尚未发现。至今端粒酶逆转录酶核心启动子的体细胞突变已被证实发生在人类黑色索瘤及其他肿瘤细胞中，这可能为我们发现其机制提供一些线索。4然而端粒酶逆转录酶启动了突变对人类肿瘤的诊断和预后的影响仍需大批的患者来证实。尿端粒酶水平活性的测定可用于诊断、监测泌尿系统最常见的肿瘤膀胱癌（美国医学会杂志），在89%的案例研究中预浸润性膀胱癌己被证实拥有很短的端粒o最近的一项研究报道，端粒酶逆转录酶的表达增加与膀胱癌的病理分级、临床分期相关。此外，冇初步和间...