一肾一夹高血压鼠血清及组织内哇巴因含量及其与血压相关性的研究［摘要］目的：探讨内源性哇巴因(EO)在“一肾一夹(1k1c)”高血压模型血压升高中的作用及其分泌特点。方法：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定“1k1c”高血压大鼠血清及多种组织内EO含量的改变，并对体内EO含量与大鼠血压进行相关性分析。结果：“1k1c”高血压鼠血清及心脏、肾脏、肾上腺、垂体及下丘脑内EO含量均高于正常大鼠；尤以肾上腺及下丘脑内EO含量最高；其中血清、肾脏及下丘脑内EO含量与大鼠血压呈显著正相关。结论：EO含量增加可能在“1k1c”模型高血压的发生机制中发挥着较为重要的作用；肾上腺可能是EO的之一。［主题词］哇巴因；高血压，肾血管性；大鼠；血压［中分类号］R544.1［文献标识码］A［］1000-4718(2000)10-0891-03RelationshipsbetweenouabainofplasmaandtissuesandbloodpressureinlklchypertensiveratsYUANWei-qing（DepartmentofCardiology,FirstTeachingHospital）WANGHao（DepartmentofCardiology,FirstTeachingHospital）LUZhuo-ren（DepartmentofCardiology,FirstTeachingHospital）YUANYu-kang（DepartmentofImmunology,Xi'anMedicalUniversity,Xi'an710061，China）RENHui-xun（DepartmentofImmunology,Xi'anMedicalUniversity,Xi'an710061，China）［Abstract］AIM:Toexploretheroleofendogenousouabain(EO)inthedevelopmentofhypertensionanditssecretioncharacterin1k1chypertensiverats(HR).METHODS:EOcontentsofplasmaandtissuesin1k1cHRweredetectedbyELISA.Therelationshipsbetweenplasmaandtissuesouabainandbloodpressurewereanalyzed.RESULTS:EOcontentsofplasma,heart,kidney,adrenalgland,pituitaryandhypothalamusinlklcHRweresignificantlyhigherthanthoseofnormalrats,especiallyintheadrenalglandandhypothalamus.EOcontentsofserum,kidneyandhypothalamuswerecorrelatedwithbloodpressure.CONCLUSIONS:EOmightplayanimportantroleinthedevelopmentofhypertensionin1k1chypertensiverats.AdrenalglandmightbethemajorsourceofEO.［MeSH］Ouabain;Hypertension,renovascular;Rats;Bloodpressure内源性哇巴因(endogenousouabain,EO)，即既往所称的“内源性类洋地黄物质(endogenousdigitalis-likesubstance,EDLS)”或“内源性钠泵抑制物(endogenoussodiumpumpinhibitor,ESPI)”是新近发现的主要由肾上腺皮质所分泌的一种类固醇激素，盐、血容量扩张及血管紧张素II(angiotensinII,AngII)等因素可刺激其分泌增加，具有重要的生理和病理生理意义。大量证据表明，EO升高可能是高血压的发病因素之一［1-6］，而高血压研究的一种重要的动物模型“一肾一夹(1k1c)”高血压大鼠血清及组织内EO含量的改变及这种改变在血压升高中的意义国内外未见报道。本研究采用高度灵敏与特异的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法，测定“一肾一夹”高血压大鼠体内EO含量的改变，并对血清及组织内EO含量与大鼠血压进行相关性分析，旨在进一步揭示EO的分泌特点及其在该模型血压升高中的作用。材料和方法一、“一肾一夹”高血压大鼠模型的制备选择180-210g雄性SD大鼠(n=14)，参照文献［7］介绍的方法制备“一肾一夹”高血压模型：用内径为0.30mm的U形银夹夹住左肾动脉，1周后切除对侧肾脏。8只正常SD大鼠为对照组。每周2次间接法尾动脉监测血压（MRB-IIIA型大鼠血压心率测定仪，上海高血压研究所监制）。术后4周处死动物采集血清及心脏、肝脏、肾脏、肾上腺、垂体、下丘脑等脏器备测。二、ELISA检测法测定大鼠血清及组织内EO含量(一)样本的采集及处理［8］1.血清样品处死动物前一夜禁食、禁水。收集血清，等体积的0.1%三氟乙酸酸化标本，室温混合3h，3000g离心30min，取上清液注入已做预处理的C18固相柱内，接负压装置使标本通过小柱，去离子水冲洗3次，25%乙腈洗脱结合的哇巴因，收集洗脱液，冷冻干燥后0.01mol/LpH7.4PBS溶解备测。2.大鼠组织样品摘取大鼠相应组织，生理盐水冲洗血液并用滤纸吸干后加入约10倍体积的甲醇，2mol/L抗坏血酸，匀浆，离心后收集上清液并冻干，然后溶于0.1%三氟乙酸，过C18固...