结肠癌中Bmi-1、p21和p27阳性表达水平及临床意义石峰王亚东梁廷明阜宁县人民医院妇产科江苏阜宁224400【中图分类号】R6【文献标识码】B【文章编号】1008—6315(2015)12—0102—01结肠癌位居消化恶性肿瘤发病率第3位[1],好发于直肠和乙状结肠交界处,男性多发,其病因尚未定论,但是肿瘤相关因子表达水平的异常可能与结肠癌的发生、发展关系密切[2].其中Bmi-1是多疏基因家族的成员之一,其在白血病、肝癌等组织中发现表达水平异常[3].而p21和P27均为周期素依赖激酶抑制因了(Cyclin—dependentkinasesinhibitor,CDKI)成员,其功能抑制周期素依赖性激酶(Cyclin—dependentkinases,CDK)的活性,抑制细胞的增殖[4,5].木研究通过联合检测结肠癌中Bmi-1、p21和p27表达水平并检测其相关性,探讨上述3种基因在结肠癌的发生和发展中的作用.1资料和方法1.1病例资料2010年1月至2014年12月,在我院进行结肠癌手术治疗的患者80例,其中男56例,女24例,均经病理检查确诊,并均在术中留取瘤旁(距肿瘤2cm以上)结肠上皮组织作为对照.1.2免疫组化方法均采用4%多聚甲醛固定,常规脱水也埋,切片厚度为5mm,常规脱蜡水化,3%过氧化氢孵育去除内源性过氧化物酶,微波修复抗原,一抗孵育过夜(一抗分别为鼠抗人Bmi-1单克隆抗体、鼠抗人p21单克隆抗体和鼠抗人p27单克隆抗体购自美国Abeam公司),PBS清洗后使用二抗(二抗均为羊抗兔抗体,均购自美岡SantaCurz公司)孵育1h,PBS清洗后使用Elite—ABC(英国Vector公司生产)孵育30min,清洗后使用DAB染色,清洗后苏木素复染30sec,常规脱水、透明,中性树胶封片.1.3结果判断光镜下观察标木的着色程度.Bmi—1、p21和p27蛋白阳性表现均为细胞核和胞浆内出现棕黄色颗粒.随机选择5个高倍视野(400×)计数肿瘤细胞总数和阳性细胞数,先按按阳性细---本文来源于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---胞百分比将0°%、1—25%、26—50%、51—75%、76-100%分别计为0、1、2、3、4分;然后同吋根据染色程度的不同进行打分,0分为无色,,1分为浅黄色.2分为棕黄色,3分为棕褐色.将上述两种计分方法得分相乘,≤4分为一,5—8分为+;9—12分为++,13—16分为+++.以++和+++计为阳性表达.1.4统计学分析采用SPSS18.0统计学软件进行统计分析处理,率的比较采用c2检验,相关性采用Spearman相关分析,P<0.05为差异有统计学意义.2结果2.1Bmi-1、p21和p27在结肠癌组织和正常组织中的表达水平比较在结肠癌组织中,Bmi—1阳性率为81.25%,明显高于正常组织,差异具有统计学意义(c2=44.55,P<0.05);p21阳性表达率为28.75%,明显低于正常组织(c2=30.63,P<0.05);p23讨论肿瘤发生、发展时,与恶性肿瘤相关细胞因子的表达水平较正常组织发生明显改变,导致其相关的细胞周期发生明显的异常,引起细胞增殖的异常,导致肿瘤的发生[6].本次研究结果发现,Bmi—1在结肠癌组织中的阳性表达率明显升高,而p21和p27蛋白在结肠癌组织的阳性表达率明显降低,Bmi—1在Ducks分期较晚的C、D期和临床分期为III期的患者的阳性表达率明显的高于Ducks分期为A,B期和临床分期为1,11期的患者.而p21和p27的阳性表达率情况则正好和Bmi-1相反.研究结果表明,Bmi—1、p21和P27蛋白的阳性表达水平可以作为判断结肠癌预后的重要标志.我们的研究结果还发现,Bmi—1在结肠癌的阳性表达和p21以及p27呈负相关.动物实验表明,Bmi—1敲除小鼠的p21、p27在皮肤、骨骼等多个器官中的蛋白表达水平均明显上调[11-13],表明Bmi-1基因对p21、p27的蛋白表达水平具有一定的调控作用,和我们的研究结构基本一致.我们的研宄结果表明,Bmi—1蛋白在结肠癌组织的阳性表达水平明显增加,p21和p27蛋白在结肠癌组织的阳性表达水平明显降低,并HBmi—1的表达水平和p21以及p27呈负相关,表明Bmi—1蛋白在结肠癌组织过度表达,其可能对p21以及p27蛋白的负向---本文来源于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---调控在结肠癌的发生及发展中发挥重要作用,可以作为结肠癌预后判断的参考.参考文献[1]于绍珍,尤奎成.结肠癌的诊治进展[」].医学综述,2006,12(13):798-799.[2]黄慧峰,杜芳腾.早期结肠...