食品中对卷基苯甲酸酯类检测一高效液相色谱法摘要：文章采用超声提取-高效液相色谱法同时测定食品中3种对軽基苯甲酸酯（对轻基苯甲酸甲酯、对释基苯甲酸乙酯、对務基苯甲酸丙酯）含量的方法。对務基苯甲酸酯类属于防腐剂,按GB/T5009.31-2003国家推荐方法检测[1],样品提取比较繁琐、费时，且回收效果欠佳。本文利用较为常见的紫外检测器通过优化条件，摸索出一个简捷、快速、经济、灵敏，又能保证一定精度的测定方法。本方法加标回收率在86.08%〜112.71%之间，线性系数R>0.9998,检出限可达0.10ug/ml,分析时间短，完全能够满足分析要求，可广泛应用于食品中对龛基苯甲酸酯类检测分析。关键词：对轻基苯甲酸酯类；高效液相色谱法中图分类号：0657.7+2文献标识码：A文章编号：1674-0432（2012）-10-0064-21实验部分1.1仪器和试剂1.1.1仪器ShimadzuLc10vpplus高效液相色谱系统（日本Shimadzu公司），配紫外检测器及Lcsolution色谱工作站；分析天平：感量0.lmg；氮吹仪：美国OrganomationN-EVAP112型；均质机：IKARwerkeT25型均质机；溶剂过滤装置；0.45Lim和0.2211m过滤膜和过滤头；Milli-Q超纯水机。1.1.2试剂甲醇、乙月青为HPLC级；乙醇为分析纯；水为超纯水。标准品：对轻基苯甲酸甲酯、对軽基苯甲酸乙酯、对轻基苯甲酸丙酯，纯度为99.0%,美国进口，购于上海安谱。1.2标准溶液的配制[2]标准贮备液：精密称取三种标准物质0.05g,用无水乙醇溶解并定容于50mL容量瓶中，配制成浓度为lmg/mL的标准贮备液，贮于4X：冰箱中备用。标准使用液：用刻度吸管准确吸取三种标准贮备液，根据需要用无水乙醇配制成不同浓度的标准溶液系列，待用。1.3色谱条件色谱柱：DiamonsilC18,粒度5pm,4.6mmX250mm（IDXL）；检测波长：254nm；流速：1.OmL/min；进样量：20uL；流动相：水-乙月青（体积比为45：55）；柱温：室温。1.4实验方法1.4.1样品准备和处理称取样品5g（精确至0.Olg）,置于50mL比色管中，加入25mL无水乙醇，置超声波水浴中提取lOmin,取出，4000rpm离心lOmin,上清液转入容量瓶中，残留物再用25mL无水乙醇重复提取1次，合并上清液,用无水乙醇定容至50.OmL,静止，上清液经微孔滤膜(4.5um)过滤作为试液，供高效液相色谱仪测定。1.4.2样品分析在相同色谱条件下，将标准工作液按照浓度由低到高的顺序进样测定，以各组分的峰面积对其浓度绘制标准曲线。待测液在于标准曲线进样相同的条件下进样分析，以保留时间定性，峰面积外标法定量。2结果与讨论[3]2.1提取溶剂的确定对軽基苯甲酸酯类难溶于水，易溶于甲醇、乙醇等有机溶剂。分别选用乙醇、甲醇作为提取溶剂进行回收率试验。试验结果表明，甲醇和乙醇均具有较高的提取效率，无明显中毒，对长期接触的实验人员具有一定的伤害，而乙醇毒性较小，因此本试验中采用乙醇作为提取溶剂。2.2流动相的选择为选择最佳的流动相，分别用乙月青-水、甲醇-水和甲醇-乙酸鞍溶液三种流动相体系进行了试验。由于此仪器为单泵系统，无法采用梯度而只能采用等度的流动相配比。结果显示，使用甲醇-水流动相的分离度不是很好；甲醇-乙酸铁溶液分离较好，但由于溶液中含有盐类，用久了会对柱子寿命有一定影响；乙睛-水流动相体系，分离度较好，且配制简单，对柱子无不良影响。此外，还考察了不同体积分数的乙睛-水对各组分分离的影响。结果显示，乙醇体积分数为55%时流动相最为适合，分离效果好，色谱峰明显，而且保留时间合适。2.3检测波长的选择用紫外检测器分别在254、248nm波长处对各组分的标差异。由于甲醇挥发后易被呼吸道、冃准溶液进行检测，发现3种组分在254nm处紫外吸收较强，灵敏度较高，因此本实验优先选择254nm作为该实验的检测波长。2.4方法的评价对轻基苯甲酸酯类的混合标准工作液均用乙醇稀释并定容，三种对轻基苯甲酸酯类标准溶液浓度系列为0.008mg/L、0.04mg/L、0.4mg/L和4.Omg/L。对轻基苯甲酸酯类标准品通过高效液相色谱进行分析，检测结果如图1所示。实验结果表明，在乙騰-水（55：45）为流动相条件下,各组分保留时间合适，而且分离效果较好。图1为三种对轻基苯甲酸酯类四种标准系列的标准品的高效液相色谱图。图1三种对務基苯甲酸酯类四种浓度标准...