外周血PMN激活吞噬化学发光与原发性肝癌患者免疫功能变化(精)

外周血PMN激活吞噬化学发光与原发性肝癌患者免疫功能变化外周血PMN激活吞噬化学发光与原发性肝癌患者免疫功能变化中国肿瘤临床与康复2000年第1期第7卷临床研究作者:曹锐马文书李天星单位:曹锐(第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤科重庆400042);马文书(第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤科重庆400042);李天星(第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤科重庆400042)关键词:原发性肝癌;多形核白细胞;化学发光;细胞因子〔摘要〕目的探讨外周血多形核白细胞化学发光(Polymorphonuclear-Chemilluminescence,PMN-CL)及细胞因子活性改变与原发性肝癌的发病机制关系。方法采用液体闪烁技术(LSC)体外激活PMN生成、释放过氧化阴离子,诱导吞噬作用产生化学发光,并应用ELISA及RIA检测相关指标IL-2、sIL-2R、IL-8、TNF、SOD,并以健康献血员为对照。结果体内激活明显,基础CL升高(P<0.05),最大峰值低下,峰时延迟(P<0.01)。相关指标IL-9、sIL-2R、TNF、SOD显著高于对照组(P<0.01),IL-2低于对照组(P<0.05)。结论原发性肝癌患者外周血PMN化学发光变化,客观反应了细胞免疫功能水平,以及超氧离子的生成、释放与损伤状态。对深入研究原发性肝癌的发病机理具有重要意义。〔中图分类号〕R735.7〔文献标识码〕BThePMN-CLandthechangeofimmunefunctioninpatientswithprimaryhepaticcancerCAORui,MAWen-shu,LITing-xing(TheThirdMilitaryMedicalCollegeDapingHospitalResearch,InstituteofFieldSurgery,Chongqing400042)〔Abstract〕ObjectiveToexploretherelationshipofPMN-CLandthechangeofcytokinesactivitywithpathogenesisofprimaryhepaticcancer.MethodsThePMN-CLandIL-2,sIL-2R,Il-8TNFandSODinseraof38patientswithprimaryhepaticcancerweredetectedbyLSC(Liquidscintillationcounting)、ELISAandRIA.ResultsThelevelofbasicluminescenceincreased(P<0.05).Iym-inducedphagoluminescencemaximalpeakvaluedecreased.Thepeaktimewasdelayedremarkably(P<0.01).Atthesametime,thesIL-2R、IL-8、TNF、SODweresignificantlyhigherthanthoseofnormalcontrol(P<0.01),IL-2waslowerthanthatofnormalcontrol(P<0.05).ConclusionsThechangeofPMN-CLreflectedtheimmunologicfunctionofthepatientsandthestateofproduction,releaseofhyperoxideanionwhichmightbeanimportantroleintheresearchofpathogenesisofprimaryhepaticcancer.〔Keywords〕primaryhepaticcancer;cytokine;polymorphonuclear;chemilluminescencePMN是人体外周血中主要的抗炎症细胞。近年来对PMN的吞噬化学发光研究表明,PMN-CL是反映细胞吞噬免疫功能的标志,是过氧化物离子生成释放致损伤的反应。本文研究原发性肝癌患者外周血PMN激活、依赖Luminal化学发光,诱吞噬探测极限CL值,并检测血清中相关指标IL-2、sIL-2R、IL-8、SOD以及TNF值的变化,现报道如下。材料和方法一、检测对象38例原发性肝癌患者,男性28例,女性10例,中位年龄42.1±0.9岁。均符合1977年全国肝癌协作会议制订的临床标准[1]。20例健康献血员作为正常对照组,男性15例,女性5例,中位年龄37.5±1.8岁。二、方法1.仪器:FJ-2108细胞代谢液闪仪(262厂),功能方式Ⅲ、测量方式Ⅳ、单光子辐射、KV0740调至仪器本底14CP/6s±2,并能敏感地对Luminal毫微摩尔浓度水平自然发光成数千倍放大。2.Luminal(北京化工厂):取20mg放入小烧杯,加入pH8.2PBS10ml,三乙胺一滴,磁搅拌18小时左右,过滤后-20℃保存,应用液计算稀释成10-4M。3.PMN分离与浓度:肝素抗凝血用1∶1Hans平衡液(无酚红含1%小牛血清)稀释,分离装细胞分离液(比重1.077),稀释血叠复于上面,中速离心15min,按常规提取法获得PMN,并按所需浓度稀释成悬液。4.IL-2、sIL-2R、IL-8:ELISA双抗体夹心法,试剂盒由第四军医大学免疫教研室提供。5.SOD:放射免疫分析法,药盒由成都同位素研究所提供。6.TNF:试剂盒购自军事医学科学院北京邦定生物医药公司,方法按说明书操作。结果原发性肝癌患者PMN在体内呈被激活状态,基础化学发光值显著高于正常人对照组(P<0.05),诱PMN吞噬酵...

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