产毒真菌的分子生物学鉴定方法的研究进展王文丽1,2,谭赌1.2,郑润生1,2,徐晖1,2(1.广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心，广州510006；2.教育部(省部共建)中药资源科学亜:点实验室，广州510006)摘要：其菌毒索污染口益受到关注，其中受污染的包括食品、谷物、饲料等。真菌毒索是丝状真菌产生的次级代谢产物，如黄曲霉毒素、单端范褊烯族毒索、伏马菌索、棒曲霉索等。人或动物摄取后，就会对身体造成严巫的损害。因此，为了提高食品安全性和加强人们的健康保护，就必须对产毒真菌进行严格的检测和鉴定。木文综述了近年来运用在真菌种类检测和鉴定方面的一些分子生物学新技术和新方法。关键词：产毒真菌；分子鉴定；PCR中图分类号:Q939.5ResearchadvanceonmolecularidentificationofmycotoxigenicfungiWANGWenliuz,TANJingi,2?ZHENGRunshengi,^XUHuii.2(1.ResearchCentreofChineseHerbalResourceScienceandEngineering,GuangzhouUniversityofChineseMedicine,GuangZhou510006;2.KeyLaboratoryofChineseMedicineResourcesofMinistryofEducation,GuangZhou510006)Abstract:Thecontaminationofmycotoxigenicfungiinfood,grainandfeed,etc.,isattractingmoreandmoreattentionallovertheworld.Mycotoxinsaresecondarymetabolitesproducedbyfilamentousfungi,suchasaflatoxins,trichothecenes,fumonisins,patulinandsoon.Ifingestedbyhumanoranimals,itwillcauseseriousdamagetothebody.Therefore,itisnecessarytodetectandidentifymycotoxigenicfungiinordertoimprovefoodsecurityandenhancepeople'shealthprotection,Thispaperreviewstheliteraturesrelevanttonewmolecularbiologytechnologiesandmethodsofdetection,specieidentificationandquantificationofmycotoxigenicfungiuptodate.Keywords:mycotoxigenicfungi;molecularidentification;PCR0引言产毒真菌系指来源于曲霉菌属⑴、青霉菌属［切、镰刀霉菌属H］的多种真菌，它们能够产生多种有毒的次级代谢产物,如黄曲霉毒索、单端抱霉烯族毒索、伏马菌索、棒曲霉索等等。大量研究表明，这些真菌毒素有致畸、致癌和肾毒性等有害作用冋o人或动物不慎摄入被污染的食物，会造成食物中毒或诱发一定的疾病⑺。例如，2004年肯尼亚Makucni地区及附近爆发的急性黄曲霉中毒事件,造成125人死亡凶o近年来,有关真菌毒素污染的报道越来越多。拯联合国粮农组织(FAO)统计，世界上约彳j25%的谷物不同程度地受到真菌毒索的污染［9］。这些污染造成了巨大的经济损失，因此为了食品的安全和消费者的健康，对食品、谷物和药材中污染产毒真菌的早期检测和鉴定成为当今研究的热点。在过去，产毒真菌的分类鉴别一般采用的是形态学方法，主要按照真菌的形态、生理特点、抗原构造等特征加以区分。然而真菌的种类较多，形态特征复杂，而且少数形态特征和基金项H:国家留学基金会(CSC)和徳意志学术交流中心(DAAD)联合资助项目―中徳合作科研项H(PPP),留金欧［2009］6037号作者简介：王文丽，(1986-),女，硕士研究生，主要研究方：微生物功能基因、中药质量标准研究。通信联系人：徐晖，(1970-),女，研究员，主要研究方向：中药质最评价新方法.&mail:zy6csheiTy@gzhtcm.Gdu.cn生理生化指标随着环境的变化而不稳定何。常规的形态学检测方法存在一定的缺陷和困难(，1］o如在种的鉴别水平上不够准确g；需要耗费的时间长，而且在鉴定菌种方面需要较强的的专业知识等［13］oW此如何快速、准确鉴别产毒真菌污染的种类成为难点。随着生物化学、遗传学以及分子生物学等学科的发展，人们对产毒真菌的遗传信息认识日益深入，分子生物学的鉴定方法在产毒真菌的种类检测和鉴定方面得到了深入的研究和广泛的应用，相关的文献综述不少(14-15JO木文主要就近年发展起来的各种相关技术和方法做一综述，探讨各种方法的优缺点，为进一步优化检测体系，建立产毒真菌的预警报告方法提供参考。1常规PCR(多聚酶链式反应)在真菌鉴定学领域中，PCR是一个有用的分子生物技术胸。PCR的岀现为真菌DNA扩，增提供了方便冃准确的方法，通过扩增具有种间特异性的DNA片段来确定种间的差异。1993年T...