第46卷第3期中山大学学报（自然科学版）2007年5月ACTASCIENTIARCMNATCRALICMUNIVERSITATISSUNYATSENI荧光试剂衍生化液相色谱分析生物检材中的氟乙酸钠1谢珍茗I,施文兵2,刘岚-邓芹英'(1.中山大学化学与化学工程学院，广东广州510275；2.广东霜公安厅，广东广州510050)摘要：建立了使用新的荧光衍生试剂9.氯甲基恿(CA)衍生化生物检材中的緘乙酸钠，并通过薄层色谱和荧光检测的髙效液相色谱(HPLC)分析的方法。合成得到氟乙酸钠的荧光衍生物——緘乙酸・9■亚甲基恿酯(MA-MFA),纯度达到98%以上，通过红外光谱、核磁共振、尤素分析和质谐対其进行结构表征。薄层色谱中展开剂为石油髓/乙酸乙商(•体积比为95：5),检测限为5xl0-*g(TLC)O高效液相色谱用AgilentHypersilODS反相色谱柱，以乙購/水(体积比为85：15)为流动相，荧光检测波长几为256nm,入亦为412nm。方法在2.5xlO-^125xlO-9mol/mL浓度范围内呈良好的线性关系.线性相关系数为0.9988,生物样品空白添加实验的回收率为83%-90%,最低检测限为2xlO-°g(S//V=3),H内、日间RSD均小于4%。该方法用于中毒死亡者的血液样品及其他检材的测定.效果良好。关键词：氛乙酸钠；9•氯甲基蔥；氛乙酸-9.亚甲基蔥酯(MA-MFA)；高效液相色谱；荧光检测；薄层色谱中图分类号：0657.7文献标识码：A文章编号：0529-6579(2007)03-0064-041收稿日期：2006-09-10基金项目：广东省科技计划资助项目(2001C32202)；广东省公安厅科研基金资助项目(2001)作者简介：谢珍茗(1979年生).女，博士研究生；通讯联系人：邓芹英；E-mail：ceslgk@2su.edu.cnVol.46No.3May2007氟乙酸钠(CHzFCOONa,代码1080,Sodiummonofluoroacetate),是一种急性剧毒灭鼠药，亦是一种内吸性杀虫剂，其纯品为白色无味粉末，极性大，易溶于水，难溶于有机溶剂。法医毒理学认为，氟乙酸钠通过作用于中枢神经系统和心脏而使动物中毒死亡⑴。文献报道大鼠急性口服的半致死量LDw为0・22mg/kg,人口服的半致死量为0.1~10mg/kg不等S刃。自上世纪80年代以来，氣乙酸钠的检测方法不断发展，最初有硫靛反应的化学法⑷，到采用强酸化GC/MSf5\,9F核磁共振©MR)®?)、区带毛细管电泳⑻和离子色谱凹■叩等宜接分析法，以及衍生化后GC/NPD、GC/ECD、CC/MS分析法⑴■⑶对氟乙酸钠的测定均有报道。简单的化学方法检验检测限低，容易受检材复杂性干扰而出现假阳性。直接分析方法的样品前处理方法简单，灵敏度不高，可用于氟乙酸钠含誡较高的样品的分析；强酸酸化的GC分析方法对气相色谱柱的要求较髙。柱前衍生化的GC分析是目前报道的检测氟乙酸钠灵敏度最高的方法。但由于生物检材的复杂性，GC的低选择性使氟乙酸钠衍生物的峰难以辨认。髙效液相色谱是目前广泛使用的最有效的分析工具，常用的检测器包括紫外检测器和荧光检测器，紫外检测器在髙灵敏度和高选择性上都不如荧光检测器，为了追求更好的分析结果，选择采用荧光检测的高效液相色谱。氟乙酸钠没有荧光团，因此柱前荧光衍生化使氟乙酸钠形成稳定的荧光衍生物是本方法的关键。本研究选用了9■氯甲基蔥(CA)为氟乙酸钠的衍生化试剂，在相转移催化剂四丁基漠化钱的存在下，合成了氟乙酸・9■亚甲基蔥(MA-MFA)衍生物，此产物具有很强的荧光性质，可作液相色谱分析的标准样品。方法用于高效液相色谱检测生物检材中的氟乙酸钠分析，灵敏度高，重复性好。1实验部分.1.1仪器与试剂高效液相色谱仪(Agilent1100HPLCsystem,USA)；UV-1型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)；荧光分光光度计；EQUINOX55傅立叶变换红外光谱仪(Bru畑)；核磁共振波谱仪(Mer・cury-Plus300MHz,Varian)；元素分析器(VarioEL,Elementar)；AgilentGC6890/5973N气质联用仪(RF-53O1PC,岛津公司)；X4数字显示显微熔点测定仪(北京泰克仪器有限公司)。氟乙酸钠标准品由广东省公安厅提供，W>98%；四丁基漠化钱(AR)购自上海试剂一厂;9-氯甲基蔥(AR)购自Merck公司(USA),配制成10-5mol/mL的乙睛溶液，置冰箱储存备用；薄层色谱硅胶G(10-40pun,青岛海洋化工厂)；其余试剂均为国产分析纯。1.2氟乙酸・9•亚甲基蕙酯的合成与表征将氟乙酸钠与9■氯甲羞恿以摩尔比3：1的比例加入小烧瓶中，加入乙睛至9•氯甲革...